天王补心制剂中地黄苷D含量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种天王补心制剂中地黄苷D含量的测定方法，属于中医药检测技术领域。该方法通过采用超高效液相色谱仪进行测定天王补心丸/天王补心丸（浓缩丸）中地黄苷D的含量，方法简单、操作简便、测定准确，专属性强，检测效率高，采用该方法能方便快速的检测出天王补心制剂中地黄苷D的含量，有利于考察天王补心制剂中地黄的质量情况，检查企业是否存在不投料或少投料、劣药材投料的行为，从而有利于进一步准确、全面的控制天王补心制剂的质量，确保临床药效。保临床药效。保临床药效。

【技术实现步骤摘要】
T3（1.8μm，2.1
×
100mm）为色谱柱；甲醇
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0.1%磷酸（1.5：98.5）为流动相；检测波长为203nm，流速为每分钟0.3ml，理论板数按地黄苷D峰计算应不低于3000；（2）对照品溶液的制备：取地黄苷D对照品适量，加25%甲醇制成每1ml含50μg的对照品溶液；（3）供试品溶液的制备：取本品水蜜丸样品适量，研细，取约2.3g，精密称定；或取大蜜丸、小蜜丸，剪碎，取约3g，精密称定；或取浓缩丸适量，研细，取约0.9g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇溶液25ml，称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用25%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；（4）测定：分别精密吸取对照品溶液2μl、水蜜丸、大蜜丸、小蜜丸供试品溶液溶液2μl、浓缩丸供试品溶液溶液4μl，注入超高效液相色谱仪，测定，即得。
[0006]所述的天王补心制剂,本品含地黄以地黄苷D（C
27
H
42
O
20
）计，水蜜丸每1g不得少于0.17mg；小蜜丸每1g不得少于0.11mg；大蜜丸每丸不得少于1.00mg；浓缩丸每1g不得少于0.32mg。
[0007]本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了一种天王补心制剂中地黄苷D含量的测定方法，通过采用超高效液相色谱仪进行测定天王补心丸/天王补心丸（浓缩丸）中地黄苷D的含量。该方法操作简单、测定准确，检测效率高，误差小，采用该方法能方便快速的检测出天王补心制剂中地黄苷D的含量，从而能有效的控制天王补心制剂的质量，确保临床药效。
[0008]本专利技术的方法通过了方法学验证，精密度高、灵敏度高、专属性强，重现性好、稳定性好、回收率高、测定结果准确，完善了天王补心制剂的质量检测标准。采用本专利技术方法进行检测天王补心制剂中地黄苷D含量，有利于考察天王补心制剂中地黄的质量情况，检查企业是否存在不投料或少投料、劣药材投料的行为，从而有利于进一步准确、全面的控制天王补心制剂的质量。
附图说明
[0009]图1 天王补心丸（大蜜丸）（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，生产批号：20015229） Waters液相色谱图；图2 天王补心丸（大蜜丸）（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，生产批号：20015229）Waters超高效液相色谱图；图3 天王补心丸（大蜜丸）（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，生产批号：20015229）色谱图；图4 天王补心丸（水蜜丸）（广州白云山敬修堂药业股份有限公司，生产批号：K01007）色谱图；图5 天王补心丸（浓缩丸）（兰州佛慈制药股份有限公司，批号：20A6）色谱图；图6 地黄苷D紫外吸收图谱；图7 地黄苷D标准曲线图；图8 地黄苷D对照品图谱；图9 天王补心丸模拟样图谱；图10 天王补心丸阴性样（缺地黄）图谱；
图11 天王补心丸（大蜜丸）（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，生产批号：20015229）色谱图；图12 天王补心丸（浓缩丸）模拟样图谱；图13 天王补心丸（浓缩丸）阴性样（缺地黄）图谱；图14 天王补心丸（浓缩丸）（仲景宛西制药股份有限公司，批号：200504）色谱图；图15 地黄苷D对照品混合溶液色谱图；图16 天王补心丸（大蜜丸）（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，生产批号：20015229）色谱图；图17 天王补心丸（水蜜丸）（承德御室金丹药业有限公司，生产批号：191101）色谱图；图18 天王补心丸（小蜜丸）（九芝堂股份有限公司，生产批号：202010029）色谱图；图19 天王补心丸（浓缩丸）（仲景宛西制药股份有限公司，批号：200504）色谱图。
具体实施方式
[0010]实施例11、仪器与试药Waters超高效液相色谱仪ACQUITY UPLC H
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CLASS；ML204型电子分析天平（梅特勒
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托利多仪器上海有限公司）。地黄苷D（中国食品药品检定研究院提供，供含测用，批号：112063
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201815，含量96.9%），甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3（1.8μm，2.1
×
100mm）。127批天王补心丸（其中大蜜丸62批，小蜜丸30批，水蜜丸35批）；31批天王补心丸（浓缩丸）均为2021年国家评价性抽验的样品。
[0011]方法考察所用石斛夜光丸（大蜜丸）为北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，批号：20015229；天王补心丸（水蜜丸）为太极集团重庆桐君阁药厂有限公司，批号：20060002；天王补心丸（浓缩丸）为兰州佛慈制药股份有限公司，批号：20A6。
[0012]2、本专利技术实验条件的考察及方法学验证2.1 仪器的选择：参考文献报道，分别比较了以甲醇
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0.1%磷酸溶液为流动相，分别在液相色谱仪和超高效液相色谱仪上进行试验。由于地黄苷D属紫外末端吸收，吸收较弱；天王补心丸药味多，干扰杂峰多，经摸索，确定以超高效液相色谱仪作为分析仪器，在此梯度下，地黄苷D出峰时间较早，峰形对称，分离效果好，见图1～2。
[0013]2.2 流动相的选择：参考文献报道，分别比较了以甲醇
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水、乙腈
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水、甲醇
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0.1%磷酸溶液、乙腈
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0.1%磷酸溶液为流动相。经摸索，确定以甲醇
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0.1%磷酸（1.5：98.5）为流动相，在此条件下，分离效果好，峰形对称。见图3～5。
[0014]检测波长的选择：参考《中国药典》2020年版一部地黄含量测定项下地黄苷D的测定方法，结合地黄苷D的紫外吸收图谱，结果发现地黄苷D为末端吸收，203nm波长下所得色谱峰吸收较强，且干扰小，故确定检测波长为203nm，见图6。
[0015]2.3 供试品溶液制备的考察2.3.1 提取溶剂的选择（分别考察了水、15%甲醇、25%甲醇、35%甲醇4种溶剂的提取效果）取本品水蜜丸适量，研细，取约2.3g，精密称定；取大蜜丸，剪碎，取约3 g，取浓缩
丸适量，研细，取约0.9g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入水、15%甲醇、25%甲醇、35%甲醇各25ml，称定重量，超声提取60分钟，取出，放冷，再称定重量，再分别用水、15%甲醇、25%甲醇、35%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0016]测定结果显示，35%甲醇提取待测成分的含量稍低，水、15%甲醇、25%甲醇提取待测成分的含量无明显差别，但25%甲醇提取的样品溶液较容易过滤，故选择25%甲醇作为提取溶剂，详见表1。
[0017]2.3.2 提取方式的选择超声提取：取本品水蜜丸适量，研细，取约2.3g，精密称定；取大蜜丸，剪碎，取约3 g，取浓缩丸适量，研细，取约0.9g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇溶液25ml，称定重量，超声提取60分钟，取出，放冷，再称定重量，用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种天王补心制剂中地黄苷D含量的测定方法，其特征在于，所述天王补心制剂包括天王补心丸与天王补心丸（浓缩丸），该测定方法包括以下步骤：（1）色谱条件与系统适用性试验： 在UPLC上分析，以Waters ACQUITY UPLC HSS T3为色谱柱；甲醇
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0.1%磷酸为流动相，流动相中甲醇：0.1%磷酸的体积比为1.5：98.5；检测波长为203nm，流速为每分钟0.3ml，理论板数按地黄苷D峰计算应不低于3000；（2）对照品溶液的制备：取地黄苷D对照品适量，加25%甲醇制成每1ml含50μg的对照品溶液；（3）供试品溶液的制备：取本品水蜜丸样品适量，研细，取2.3g，精密称定；或取大蜜丸、小蜜丸，剪碎，取3g，精密称定；或取浓缩丸适量，研细，取0....

【专利技术属性】
技术研发人员：覃丽郦，李丽莉，吴桂凡，陆游，谷立勍，甘勇强，凌婕，
申请(专利权)人：广西壮族自治区食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：