一种同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用高效液相色谱法同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量的方法，以葡萄糖酸钙和葡萄糖二酸钙为研究对象，利用高效液相色谱法同时测定，达到两种物质同时分离的目的。所述高效液相色谱条件为：采用糖分析色谱柱，以盐酸水溶液为流动相，柱温为25～45℃；检测器为示差折光检测器，检测器温度为35～45℃，外标法定量。该质量控制方法专属性、稳定性、准确性均较好，为添加葡萄糖二酸钙作为增溶剂的葡萄糖酸钙注射液的质量控制提供了简易可靠的分析方法。注射液的质量控制提供了简易可靠的分析方法。注射液的质量控制提供了简易可靠的分析方法。

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙含量的方法


[0001]本专利技术属于药物分析领域，涉及使用高效液相色谱法同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量的方法。
技术背景
[0002]钙，作为人体内含量最大的无机盐组成元素，在人体内含量高达1000-1300克。同时，钙也是人体生命活动最重要的参与者之一，如神经传导、免疫、消化、激素调控等。葡萄糖酸钙中的二价钙离子为生物活性钙，生物利用度高，是人体补钙首选药物。葡萄糖酸钙注射液是临床上的常用药物，用于治疗急性低血钙引起的手足抽搐、荨麻疹、急性湿疹及皮炎等多种疾病，以及治疗镁中毒、氟中毒、高钾血症等。
[0003]葡萄糖酸钙注射液为过饱和溶液，生产及贮存过程中存在易析出结晶等问题，可通过添加葡萄糖二酸钙等钙添加剂改善其溶解度。2020版中国药典规定葡萄糖酸钙注射液含葡萄糖酸钙(C
12
H
22
CaO
14
.H2O)应为标示量的97.0％～107.0％。本品需添加钙盐或其他适宜的稳定剂，但加入的钙盐按钙(Ca)计算，不得超过葡萄糖酸钙中含有钙量的5.0％。美国FDA橙皮书中载明，原研公司FRESENIUS KABI USA通过添加适量的葡萄糖二酸钙增加其溶解度。然而现行美国药典(USP40)、中国药典均采用EDTA配位法测定总钙，虽然方法简便对仪器的要求不高，但只能测定注射液的总钙量，不能反映葡萄糖酸钙或葡萄糖二酸钙在制剂中的比例。文献：高效液相色谱法同时测定复方葡萄糖酸钙口服溶液中2组分的含量[J]，中国药房2005年第16卷第17期，通过HPLC法同时测定葡萄糖酸钙口服液中葡萄糖酸钙及乳酸钙的含量，但无法分离并测定葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量，如图1所示。
[0004]高效液相色谱法(HPLC)由于具有分离效能高、分析速度快等优点，在制剂的分离检测中应用较多，但目前同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量方法尚未见报道。本专利技术开发了新的HPLC法同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供一种利用高效液相色谱法同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量的方法，以葡萄糖酸钙和葡萄糖二酸钙为研究对象，利用高效液相色谱法同时测定，达到两种物质同时分离的目的。
[0006]一种利用高效液相色谱法同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量的方法，所述高效液相色谱法的条件为：采用糖分析色谱柱，以盐酸水溶液为流动相，柱温为25～45℃；检测器为示差折光检测器，检测器温度为35～45℃，外标法定量。
[0007]进一步地，所述糖分析色谱柱固定相为磺化交联的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物；
[0008]进一步地，所述流动相为pH2.5～3.5盐酸水溶液；
[0009]进一步地，所述流动相为pH2.5～3.0盐酸水溶液；
[0010]进一步地，所述流动相为pH3.0～3.5盐酸水溶液；
[0011]进一步地，所述流动相为pH2.5盐酸水溶液；
[0012]进一步地，所述流动相为pH3.0盐酸水溶液；
[0013]进一步地，所述流动相为pH3.5盐酸水溶液；
[0014]进一步地，所述流动相的流速为0.6～1.0mL
·
min-1
；
[0015]进一步地，所述流动相的流速为0.6～0.8mL
·
min-1
；
[0016]进一步地，所述流动相的流速为0.8～1.0mL
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min-1
；
[0017]进一步地，所述流动相的流速为0.6mL
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；
[0018]进一步地，所述流动相的流速为0.8mL
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min-1
；
[0019]进一步地，所述流动相的流速为1.0mL
·
min-1
；
[0020]进一步地，检测时进样量为20μL；
[0021]进一步地，所述柱温为25～45℃；
[0022]进一步地，所述柱温为25～35℃；
[0023]进一步地，所述柱温为35～45℃；
[0024]进一步地，所述柱温为25℃；
[0025]进一步地，所述柱温为35℃；
[0026]进一步地，所述柱温为45℃；
[0027]进一步地，检测器温度为35～45℃；
[0028]进一步地，检测器温度为35～40℃；
[0029]进一步地，检测器温度为40～45℃；
[0030]进一步地，检测器温度为35℃；
[0031]进一步地，检测器温度为40℃；
[0032]进一步地，检测器温度为45℃；
[0033]进一步地，检测波长为280nm。
[0034]采用高效液相色谱法同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的成分，根据所述2种特征成分各自的标准曲线得到葡萄糖酸钙注射液中该2种特征成分的含量。
[0035]同时专利技术人将上述色谱条件进行了方法学验证。
[0036]1)专属性
[0037]取溶剂、空白溶液、葡萄糖酸钙、葡萄糖二酸钙对照品溶液以及混合对照品溶液，分别进样，考察溶剂和空白溶剂对葡萄糖酸钙和葡萄糖二酸钙测定的干扰情况及各组分间的分离情况，结果表明溶剂和空白溶剂对葡萄糖酸钙和葡萄糖二酸钙的测定均无干扰，且葡萄糖酸钙峰与葡萄糖二酸钙峰之间的分离度均大于1.5，本法专属性较好(图2)。
[0038]2)线性和范围
[0039]取葡萄糖酸钙、葡萄糖二酸钙对照品适量，分别用适量流动相溶解并稀释制成每1ml中含有葡萄糖酸钙4mg、葡萄糖二酸钙200μg的溶液，作为对照品储备液。取上述各储备液3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用水稀释制成一系列浓度的溶液，依法依次进样，记录色谱图。
[0040]葡萄糖酸钙：在1.2～2.8mg
·
mL-1
的浓度范围内，葡萄糖酸钙浓度(X)与峰面积(Y)
呈良好的线性关系，其线性回归方程为：Y＝16773X+5235.8，相关系数R2＝0.9997。
[0041]葡萄糖二酸钙：60～140μg
·
mL-1
的浓度范围内，葡萄糖二酸钙浓度(X)与峰面积(Y)呈良好的线性关系，其线性回归方程为：Y＝126872X-354.1，相关系数R2＝0.9998，(表1)。
[0042]表1葡萄糖酸钙和葡萄糖二酸钙的标准曲线
[0043][0044]3)准确度
[0045]按处方量的80％、100％、120％称取葡萄糖酸钙和葡萄糖二酸钙，按测定方法检测，计算回收率，结果见表2，表3。
[0046]表2葡萄糖酸钙回收率试验结果
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用高效液相色谱法同时测定葡萄糖酸钙注射液中葡萄糖酸钙与葡萄糖二酸钙的含量的方法，所述高效液相色谱法的条件为：采用糖分析色谱柱，以pH 2.5～3.5盐酸水溶液为流动相，流动相的流速为0.6～1.0mL
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min-1
，柱温为25～45℃；检测器为示差折光检测器，检测器温度为35～45℃，外标法定量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖分析色谱柱固定相为磺化交联的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相为pH 2.5～3.0盐酸水溶液，或pH 3.0～3.5盐酸水溶液。4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，流动相为pH 2.5盐酸水溶液，或pH 3.0盐酸水溶液，或pH 3.5盐酸水溶液。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相的流速为0....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘任，陆爱玲，戚龙献，徐凡，高红，魏春燕，徐俊福，
申请(专利权)人：江苏正大丰海制药有限公司，
类型：发明
国别省市：