抗CSF-1R抗体及其产品、方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种抗人CSF

【技术实现步骤摘要】
抗CSF
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1R抗体及其产品、方法和用途


[0001]本专利技术涉及生物药物领域。具体而言，本专利技术涉及一种新型的经人工设计的抗体，特别是CSF
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1R人源化抗体或抗原结合片段。本专利技术还涉及这些结合CSF
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1R的抗体的治疗和诊断用途，特别是在治疗、预防和/或诊断CSF
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1R相关疾病，例如肿瘤中的用途。

技术介绍

[0002]目前，癌症抗体治疗已逐渐建立起来，成为了治疗血液系统恶性肿瘤和实体瘤最成功及最重要的策略之一。这种疗法可通过改变抗原或受体的功能（例如采用激动剂或拮抗剂），或将特异性药物偶联到靶向特定抗原的抗体上来发挥功能。
[0003]巨噬细胞抗肿瘤被认为是T细胞抗肿瘤之外的另一重要方向， CSF/CSF
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1R信号通路对单核/巨噬细胞的分化和发育具有重要作用，在肿瘤微环境中诱导TAM，形成抑制性的免疫微环境。抗CSF
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1R的抑制剂的研究为巨噬细胞抗肿瘤提供了新的治疗方向。目前有多个小分子抑制剂和2个单克隆抗体药物在临床研究阶段， 探索CSF
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1/CSF
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1R通路抑制对多种肿瘤和GVHD的治疗效果。由此，抗CSF
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1R抗体类药物分子有待研究。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在解决现有技术中，肿瘤治疗的问题，具体来说，解决肿瘤靶向抗体分子疗效低的技术问题。为此，本专利技术的一个目的在于制备一种特异性结合CSF
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1R的抗体或抗原结合片段。
[0005]集落刺激因子1受体（colony
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stimulating factor 1 receptor ，CSF
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1R），又称CD115或M
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CSF
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R，属于Ⅲ型蛋白酪氨酸激酶受体家族，表达于单核/巨噬细胞、腹腔渗出细胞、浆细胞样和常规树突状细胞、破骨细胞上。该基因产物的天然配体包括CSF1和IL
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34。CSF
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1R直接影响组织巨噬细胞和破骨细胞的分化和增殖。CSF
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1R介导的信号对单核吞噬细胞系统，特别是巨噬细胞的分化和存活至关重要。CSF
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1与CSF
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1R形成的信号轴在多种恶性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌、鼻咽癌等中与肿瘤的发生发展密切相关。肿瘤细胞通过分泌CSF
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1作用于巨噬细胞表面的CSF
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1R，激活其下游信号通路，使其转变为促进肿瘤生长的肿瘤相关巨噬细胞（TAM），TAM可以通过限制T细胞功能支持肿瘤细胞生长，阻断CSF
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1/CSF
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1R可以抑制TAMs接收CSF
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1信号，从而降低TAM增殖、分化、存活，解除TAMs在肿瘤中的作用。肿瘤细胞分泌的CSF1细胞因子促进M2表型的持续存在，阻断CSF
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1R信号通路促进巨噬细胞向M1表型复极化，增强抗肿瘤活性。因而，根据本专利技术实施例的一个方面，提供了一种抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区（VH）和轻链可变区（VL），其中，所述VH包括抗原决定区VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述VH CDR1包含如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列，所述VH CDR2包含如SEQ ID NO：13所示的氨基酸序列，所述VH CDR3包含如SEQ ID NO：14所示的氨基酸序列；所述VL包括抗原决定区VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3，所述VL CDR1包含如SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列，所述VL CDR2包含如SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列，所述VL CDR3包含如SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列。
[0006]本专利技术实施例公开了1株来自杂交瘤的人源化抗CSF
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1R抗体。该抗体高亲和力结合人CSF
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1R，阻断CSF
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1R与其配体CSF
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1的结合，介导CSF
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1R发生内化，并有效阻断CSF
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1/CSF
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1R信号通路。根据本专利技术实施例的CSF
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1R抗体或抗原结合片段，所得抗体可以与人CSF
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1R结合，且结合人CSF
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1R活性，和抑制CSF
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1结合人CSF
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1R的活性，均优于对照抗体。人源化抗体抑制IL34结合人CSF
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1R活性明显优于对照抗体。本专利技术实施例的抗体具有强亲和力，并且表现出与人CSF
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1R的高特异性，通过结合、内化和阻断CSF
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1R，可为CSF
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1R相关疾病的治疗提供有效解决方案。
[0007]另外，根据本专利技术上述实施例的抗体或抗原结合片段，还可以具有如下附加的技术特征：根据本专利技术的实施例，所述VH包括如SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列；且所述VL包括如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列。
[0008]根据本专利技术的实施例，所述VH包括如SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列；且所述VL包括如SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列。进一步说明的是，该抗体或抗原结合片段的VH和VL序列可以是在SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列的基础上进行一个或多个氨基酸的插入、删除、突变或修饰等得到的。
[0009]根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段为单克隆抗体。
[0010]根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段为嵌合抗体或人源化抗体。人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，经改造后与人的靶点结合，重新表达的抗体，其大部分氨基酸序列为人源序列取代，基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体，例如，本专利技术实施例的抗体或抗原结合片段经人源化后，可以与人的CSF
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1R特异性结合。
[0011]根据本专利技术的实施例，所述抗体或其抗原结合片段是特异性结合人CSF
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1R的抗体片段，且选自Fv、Fab、Fab'、scFv和F(ab')2。
[0012]根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种分离的多核苷酸。根据本专利技术的实施例，所述分离的多核苷酸编码前述抗人CSF
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1R抗体或其片段。根据本专利技术的实施例，所述分离的多本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区（VH）和轻链可变区（VL），其中，所述VH包括抗原决定区VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述VH CDR1包含如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列，所述VH CDR2包含如SEQ ID NO：13所示的氨基酸序列，所述VH CDR3包含如SEQ ID NO：14所示的氨基酸序列；所述VL包括抗原决定区VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3，所述VL CDR1包含如SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列，所述VL CDR2包含如SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列，所述VL CDR3包含如SEQ ID NO：11所示的氨基酸序列。2.如权利要求1所述抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述VH包括如SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列；且所述VL包括如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列。3.如权利要求1所述抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述VH包括如SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列；且所述VL包括如SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列，或与所选序列具有至少80%同一性的氨基酸序列。4.如权利要求1所述抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为单克隆抗体。5.如权利要求4所述抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为嵌合抗体或人源化抗体。6.如权利要求5所述抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段是特异性结合人CSF
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1R的抗体片段，且选自Fv、Fab、Fab'、scFv和F(ab')2。7.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求1
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6中任一项所述抗人CSF
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1R抗体或其抗原结合片段。8.一种分离的多核苷...

【专利技术属性】
技术研发人员：王双，王荣娟，焦莎莎，张畅，张姣，芦维宁，张锦超，
申请(专利权)人：北京科诺信诚科技有限公司，
类型：发明
国别省市：