检测甘胆酸的试剂盒、方法及用途技术

本发明专利技术涉及用于检测甘胆酸的试剂盒，包括：第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；其中，所述试剂盒含有氨基酸，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸中的一种或多种。通过添加氨基酸，本发明专利技术提高了甘胆酸检测的准确性和抗干扰能力。此外，还涉及检测甘胆酸的方法和氨基酸的抗干扰用途。酸的方法和氨基酸的抗干扰用途。

【技术实现步骤摘要】
检测甘胆酸的试剂盒、方法及用途


[0001]本专利技术涉及甘胆酸检测领域，具体涉及基于免疫比浊法的甘胆酸检测。

技术介绍

[0002]甘胆酸(Cholyglycine,CG)是一种结合型胆酸，其由胆酸和甘氨酸结合而成。
[0003]在正常情况下，外周血中胆酸含量甚微，正常成人无论空腹或餐后，其血清甘胆酸浓度稳定在低水平。当肝脏细胞受损时，肝脏细胞摄取甘胆酸的能力下降，致使血液中甘胆酸含量增高；胆汁淤积是肝脏排泄胆酸所发生的障碍，由于返流血液循环的甘胆酸含量增高，故胆汁淤积也使血清甘胆酸含量增高。因此，可将血清甘胆酸水平与其他临床指标结合，对肝病以及胆汁淤积的发生、进展和预后进行辅助判断。
[0004]甘胆酸检测的反应原理采用基于竞争抑制的胶乳增强免疫比浊法。在该方法中，血清中的甘胆酸与甘胆酸-蛋白偶联复合物竞争结合甘胶乳微粒表面包被的甘胆酸单克隆抗体。其中，人工设计的甘胆酸-蛋白偶联复合物有较多抗体结合位点，与胶乳微粒产生明显交联反应；而血清中甘胆酸抗原与抗体结合位点较少，表现为仅封闭微粒表面抗体，降低交联反应。据此，可通过对交联反应产生的吸光度的变化，来定量检测样本中血清甘胆酸抗原。
[0005]然而，由于甘胆酸是胆酸的结合型胆酸之一，是胆汁酸的一种。而人体内胆汁酸还包括：甘氨熊脱氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺熊脱氧胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、牛磺脱氧胆酸、熊脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、胆酸、甘氨石胆酸、牛磺石胆酸、石胆酸。在检测过程中，这些甘胆酸的类似物会干扰甘胆酸检测过程中的竞争关系，从而对实验结果带来影响。
[0006]当前，已知市面上在售的多种甘胆酸试剂盒均存在不同甘胆酸类似物的干扰问题。然而，对于如何抑制的甘胆酸类似物带来的干扰，目前尚未找到十分有效的方法。
[0007]因此，在甘胆酸检测领域，存在着降低甘胆酸类似物干扰，从而提高试剂检测的分析灵敏度的强烈需求。

技术实现思路

[0008]在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
[0009]如下文中所使用，术语“具有”、“包含”或“包括”以非排他性的方式使用。因此，这些术语既可以是指其中除了这些术语引入的特征之外在本上下文中描述的实体中没有另外特征存在的情况，而且可以是指其中存在一个或多个另外特征的情况。作为实例，表述“A具有B”、“A包含B”和“A包括B”既可以是指其中除了B之外在A中没有另外要素存在的情况(即其中单独且仅由B组成的情况)，而且可以是指其中除了B之外在实体A中存在一种或多种另外要素诸如要素C、要素C和D或甚至其它要素的情况。
[0010]如上文所述，目前，甘胆酸检测基于采用基于竞争抑制的免疫比浊法，而样本中甘胆酸类似物的存在会干扰检测时的竞争关系，从而造成检测准确性的下降。
[0011]为了解决上述问题，本专利技术甘胆酸类似物的抗干扰成分进行研究，并发现在反应体系中存在氨基酸的情况下，可以抑制甘胆酸类似物所带来的干扰，从而完成了本专利技术。
[0012]据此，在第一方面，本专利技术提供了一种检测甘胆酸的试剂盒，包括：
[0013]第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和
[0014]第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；
[0015]其中，所述试剂盒含有氨基酸，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸中的一种或多种。
[0016]在第二方面，本专利技术提供了一种检测甘胆酸的试剂盒，包括：
[0017]第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和
[0018]第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；
[0019]其中，所述试剂盒含有氨基酸，所述氨基酸的浓度被配制为使得在检测样本时其以14-130mM的终浓度存在。
[0020]通过引入特定种类的氨基酸或引入特定浓度的氨基酸，本专利技术在测定甘胆酸时将检测偏差率控制在≤10％的范围内，同时将甘胆酸类似物的检出率控制在≤15％。就这一点而言，本专利技术取得了优于当前市售甘胆酸检测产品的抗干扰水平。
[0021]除非特殊说明，本专利技术中的用语“第一”和“第二”等仅用于区分多个相似的要素，而不意在表示要素之间重要性或次序等方面的任何差异。
[0022]在一些实施方式中，氨基酸是极性氨基酸。本专利技术的极性氨基酸可选自带正电极性氨基酸、带负电极性氨基酸和中性极性氨基酸。
[0023]在具体的实施方式中，氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、组氨酸或其组合。
[0024]在将本专利技术的试剂与待测样本混合后，氨基酸在反应体系中的终浓度可为14-130mM，尤其为16-120mM。例如，15mM、16mM、20mM、30mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM、90mM、100mM、110mM、120mM或130mM。
[0025]在一些实施方式中，氨基酸仅存在于第一试剂中。在这样的情况下，氨基酸在第一试剂中的浓度可为18-165mM，尤其为20-150mM。例如，19mM、20mM、30mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM、90mM、100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM或160mM。
[0026]在一些实施方式中，氨基酸仅存在于第二试剂中。在这样的情况下，氨基酸在第二试剂中的浓度可为70-660mM，尤其为80-600mM。例如，80mM、90mM、100mM、150mM、200mM、250mM、300mM、350mM、400mM、450mM、500mM、550mM、600mM或650mM。
[0027]在一些实施方式中，氨基酸可同时存在于第一试剂和第二试剂中，且被配制为满足在反应体系中所需要的终浓度。
[0028]在一些实施方式中，氨基酸可以存在于额外的试剂中，且被配制为满足在反应体系中所需要的终浓度。
[0029]优选地，在将本专利技术的试剂与待测样本混合后，氨基酸在反应体系中的终浓度可为40-60mM，例如可为41mM、42mM、43mM、44mM、45mM、46mM、47mM、48mM、49mM、50mM、51mM、52mM、53mM、54mM、55mM、56mM、57mM、58mM或59mM。
[0030]在示例的实施方式中，氨基酸可以50-75mM的浓度存在于第一试剂中，例如，可以
55mM、60mM、65mM或75mM的浓度存在。
[0031]在另一示例性的实施方式中，氨基酸可以200-300mM的浓度存在于第二试剂中，例如，可以220mM、240mM、260mM或280mM的浓度存在。
[0032]通过对氨基酸浓度范围进行优化，本专利技术进一步降低了甘胆酸检出偏差率，从而进一步提高甘胆酸检测的准确性。
[0033]本专利技术的第一试剂中含有甘胆酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测甘胆酸的试剂盒，包括：第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；其中，所述试剂盒含有氨基酸，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸中的一种或多种。2.权利要求1所述的试剂盒，其中，所述氨基酸存在于所述第一试剂或第二试剂中。3.权利要求1所述的试剂盒，其中，所述氨基酸的浓度被配制为使得在检测样本时其以14-130mM，优选以16-120mM，更优选以40-60mM的终浓度存在。4.一种用于检测甘胆酸的试剂盒，包括：第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；其中，所述试剂盒含有一种或多种氨基酸，所述氨基酸的浓度被配制为使得在检测样本时其以14-130mM，优选以16-120mM，更优选以40-60mM的终浓度存在。5.权利要求4所述的试剂盒，其中，所述氨基酸为极性氨基酸，优选地，所述氨基酸为带正电极性氨基酸，例如，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈伟，江明，张裕平，
申请(专利权)人：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：