阿胶组分在制备提高细胞免疫活性药物或保健品中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种阿胶组分在制备提高细胞免疫活性药物或保健品中的应用。本发明专利技术所述阿胶组分通过以下方法制备得到：将阿胶研磨成粉并加入水中，加热炖化，获得阿胶炖化液，然后固液分离取液相获得阿胶提取液，分离阿胶提取液得到所述阿胶组分，所述阿胶组分分子量为10

【技术实现步骤摘要】
阿胶组分在制备提高细胞免疫活性药物或保健品中的应用


[0001]本专利技术属于食品加工
，尤其是指阿胶组分在制备提高细胞免疫活性药物或保健品中的应用。

技术介绍

[0002]阿胶为驴的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶，与人参、鹿茸并称为“滋补三宝”，始载于《神农本草经》，列为上品，其药用历史已有2000多年。阿胶味甘、性平，归肺、肝、肾经。具有补血滋阴、润燥、止血之功效。主治血虚萎黄，眩晕心悸，肌痿无力，心烦不眠，虚风内动，肺燥咳嗽，痨咳咯血，吐血尿血，便血崩漏，妊娠胎漏。在卫生部2002年公布的药食两用资源名单中，阿胶作为一种名贵中药材被确定为药食两用资源。
[0003]阿胶的主要成分为蛋白质、脂质、糖类和微量元素，其中，蛋白质含量高达70％以上。阿胶主要由驴皮经熬煮、浓缩制作而成，在驴皮的化胶过程中，其主要成分胶原蛋白会发生聚集和降解而形成不同分子量分布的阿胶阿胶组分，其分子质量大多在10kDa以上，胶原蛋白聚集和降解程度与驴皮熬煮加工温度和时间等条件密切相关，并且阿胶制作过程中胶原蛋白也会和糖类发生美拉德反应，产生具有一定活性的物质。基于此考虑，本专利技术提出一种通过体外和体内两种实验模型，基于分子量的不同分离筛选出了免疫活性强的阿胶组分。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种阿胶组分在制备提高细胞免疫活性药物或保健品中的应用。经本制备方法制备的10
‑
30kD的阿胶组分，在1000μg/mL的浓度下其促进RAW264.7巨噬细胞释放NO和TNF
‑
α的量是阿胶组的1.79倍和4.40倍，其增强免疫活性较阿胶有较大提升。
[0005]一种阿胶组分在制备提高细胞免疫活性药物或保健品中的应用，所述阿胶组分的分子量为10～30kDa。
[0006]在本专利技术的一个实施例中，所述细胞为RAW264.7小鼠巨噬细胞、THP
‑
1人单核细胞白血病细胞或NR8383大鼠肺泡巨噬细胞。
[0007]在本专利技术的一个实施例中，所述药物或保健品还包括药学上可接受的载体。
[0008]在本专利技术的一个实施例中，所述载体选自崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、表面活性剂和防腐剂中的一种或多种。
[0009]在本专利技术的一个实施例中，所述药物或保健品的剂型为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液、乳剂、干混悬剂、干浸膏剂或注射剂。
[0010]在本专利技术的一个实施例中，所述阿胶组分通过以下方法制备得到：将阿胶研磨成粉并加入水中，加热炖化，获得阿胶炖化液，然后固液分离取液相获得阿胶提取液，分离阿胶提取液得到所述阿胶组分。
[0011]在本专利技术的一个实施例中，所述水的质量为阿胶的10
‑
40倍。
[0012]在本专利技术的一个实施例中，加热温度为40
‑
80℃，时间为1
‑
3h；
[0013]在本专利技术的一个实施例中，固液分离采用离心方法，离心条件：5000
‑
8000g的转速下进行离心，离心时间为20
‑
40min。
[0014]在本专利技术的一个实施例中，通过葡聚糖凝胶柱法或超滤法进行分离。
[0015]本专利技术的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：
[0016]本专利技术得到不同分子量的阿胶组分，然后以RAW264.7和环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠作为免疫活性评价模型，研究不同分子量的阿胶组分免疫增强活性的强弱。经实验结果表明，阿胶不同分子量的组分都能在一定程度上增强免疫活性，特别是分子量在10～30kDa和高分子量组的阿胶组分相对于原阿胶来说，具有更强的免疫活性，可以用于相关健康食品的生产加工。
附图说明
[0017]为了使本专利技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本专利技术的具体实施例并结合附图，对本专利技术作进一步详细的说明，其中
[0018]图1是本专利技术不同分子量的阿胶组分对RAW264.7细胞NO(A)和TNF
‑
α(B)释放量的影响。其中，F0、F1、F2和F3对RAW264.7细胞NO(A)和TNF
‑
α(B)释放量的影响；F0:阿胶，F1:分子量<10kDa的阿胶组分，F2:分子量为10
‑
30kDa的阿胶组分，F3:分子量>30kDa的阿胶组分；不同字母表示样品间具有显著性差异(P＜0.05)。
具体实施方式
[0019]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本专利技术并能予以实施，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。
[0020]其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本专利技术至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
[0021]以下各实施例中所用到的实验仪器包括：CO2恒温培养箱(美国Throme公司)；酶标仪(美国Molecular Device)；AKTApure蛋白质纯化系统、葡聚糖凝胶柱(美国GE)；血细胞分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)；超滤设备(美国Millipore)。
[0022]所用到的实验药品包括：阿胶由山东华信制药集团提供，脂多糖(LPS)、环磷酰胺购自sigma公司，DMEM培养液、RPMI
‑
1640培养液、胎牛血清购自Gibco公司，RAW264.7细胞购自中国科学院细胞库，PBS缓冲液、NO检测试剂盒、新生牛血清购自碧云天公司，肿瘤坏死因子
‑
α(Tumor necrosis factor
‑
α，TNF
‑
α)ELISA检测试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，盐酸左旋咪唑购自芮城县维尔富兽药有限公司，肝素钠抗凝剂购自国药集团。
[0023]所用到的实验动物包括：ICR小鼠，购买自南京模式动物研究所，饲养于江南大学动物实验中心。
[0024]实施例1不同级分阿胶组分的制备
[0025](1)称取一定量的阿胶研磨成粉，加入20倍体积的去离子水，60℃下炖化1h，然后6000g离心10min，取上清液，得到阿胶提取液。
[0026](2)对阿胶提取液使用50mM pH＝7.0的磷酸盐缓冲溶液于AKTApure蛋白质纯化系
统进行分级，分离获得<10kDa、10
‑
30kDa、>30kDa三种不同分子量范围的阿胶组分溶液，冷冻干燥后备用，分别命名为F1、F2、F3。
[0027](3)将阿胶提取液通过100kDa的超滤膜，截留液冻干为高分子量组分，透过液继续通过10kDa的超滤膜，截留液冻干为中分子量组分，透过液冻干为低分子量组分。
[0028]实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种阿胶组分在制备提高细胞免疫活性药物中的应用，其特征在于，所述阿胶组分的分子量为10～30kDa。2.一种阿胶组分在制备提高细胞免疫活性保健品中的应用，其特征在于，所述阿胶组分的分子量为10～30kDa。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述细胞为RAW264.7小鼠巨噬细胞、THP
‑
1人单核细胞白血病细胞或NR8383大鼠肺泡巨噬细胞。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述保健品还包括药学上可接受的载体。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述载体选自崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、表面活性剂和防腐剂中的一种或多种。6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述保健品的剂型为片剂、胶囊剂、软胶...

【专利技术属性】
技术研发人员：何志勇，张国伟，陈洁，曾茂茂，王召君，秦昉，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：