雷公藤红素在制备抑制角膜基质纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术实施例公开了一种雷公藤红素在制备抑制角膜基质纤维化药物中的应用。本发明专利技术通过体外实验证明雷公藤红素有效促进兔角膜基质细胞自噬相关蛋白LC3A、LC3B、Beclinc

【技术实现步骤摘要】
雷公藤红素在制备抑制角膜基质纤维化药物中的应用


[0001]本专利技术实施例涉及生物技术和医学
，具体涉及一种雷公藤红素在制备抑制角膜基质纤维化药物中的应用。

技术介绍

[0002]我国角膜盲患者约500万，每年新增角膜盲病人约10
‑
20万，是我国第二大致盲性眼病，给患者及家庭带来沉重的经济和精神负担，给国家带来巨大的社会负担。角膜外伤、手术、感染等均可导致角膜基质纤维化。角膜基质纤维化是角膜盲的最常见表现形式，可导致视力下降，也是板层角膜移植术后影响视力的重要原因之一。深入探究角膜基质纤维化的发生机理，探寻有效的防治措施，是眼科工作者亟待解决的重要难题。临床上尚无被批准的可逆转纤维化的药物，为减轻角膜瘢痕形成，目前主要局部用药包括糖皮质激素和丝裂霉素C。但长期应用会引起并发性白内障、继发性青光眼，甚至角巩膜溶解。药物治疗失败时，需要角膜移植手术干预。角膜移植尤其是板层角膜移植术后，角膜基质层间纤维化可明显影响术后视力。因此，积极有效的干预角膜基质纤维化的发生、发展，对角膜盲的预防具有重要的理论意义，对我国的防盲、治盲工作具有重大的社会意义。自噬是真核生物细胞中物质循环的一种高度保守的过程，对细胞的存活和维持起重要作用。研究显示，细胞自噬与纤维化疾病的发生、发展、转归过程有相关性。近期研究发现，自噬可调节肺部、肾脏和肝脏纤维化，而PI3K/Akt/mTOR信号通路负性调节自噬。自噬在角膜基质纤维化中的作用，尚不明确。雷公藤红素(Celastrol)是从中药雷公藤中提取的生物活性单体，其分子式为C
29
H
38
O4，分子量为450.61。雷公藤红素具有抗炎、抗肿瘤、抑制新生血管和肥胖等多种生物学活性，显示强大的生物学功能。研究显示，雷公藤红素抑制在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化和系统性硬化，可有效抑制肾脏和肝脏纤维化。雷公藤红素显示强大的抗炎和抗纤维化活性。在角膜基质纤维化的研究中，未见雷公藤红素调控自噬抑制角膜基质纤维化的研究报道。
[0003]尽管雷公藤红素具有较强大的生物活性，具备抗组织纤维化的潜在药物，但其极差的水溶性限制了其进一步应用。如何增强其水溶性，提高其生物利用度是研究者要解决的首要难题。眼部给药存在独特的三大屏障：泪膜、角膜和血液
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房水屏障，使得局部点药这种给药方式的生物利用度小于5％，造成药物治疗效果欠佳。如何提高眼部靶组织的药物浓度，一直是药学研究的热点和难点，也是眼科亟待解决的关键难题。目前尚未发现将其药物制剂应用到术中以抑制角膜基质纤维化的报道。

技术实现思路

[0004]为此，本专利技术实施例提供一种雷公藤红素在制备抑制角膜基质纤维化药物中的应用。
[0005]具体地，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]雷公藤红素在制备抑制角膜基质纤维化药物中的应用。
[0007]进一步地，本专利技术的上述应用中，所述药物抑制PI3K/AKt/mTOR，促进角膜基质细胞自噬，抑制角膜基质细胞FN、COL1的表达，抑制其向肌成纤维细胞转化。
[0008]进一步地，本专利技术的上述应用中，所述药物为雷公藤红素温敏性水凝胶，其制备方法包括以下步骤：
[0009](1)将10g聚乙二醇15
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羟基硬脂酸酯和0.1
‑
1.5g雷公藤红素溶解于2
‑
20mL有机溶剂中，得混合液；
[0010](2)在超声搅拌下，将所得混合液滴加到用量为所述有机溶剂体积的5
‑
15倍的注射用水中，旋蒸除去有机溶剂，得载药聚合物胶束；
[0011](3)将0.05
‑
5g所述载药聚合物胶束和1
‑
50g温敏性聚合物水凝胶进行配料，混匀后，补加注射用水定容至100mL，即得所述雷公藤红素温敏性水凝胶。
[0012]进一步地，本专利技术的上述应用中，所述有机溶剂为浓度95％以上的乙醇溶液。
[0013]进一步地，本专利技术的上述应用中，所述温敏性聚合物水凝胶选自泊洛沙姆水凝胶、聚异丙基丙烯酰胺水凝胶、聚甲基丙烯酸
‑2‑
(N，N
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二甲氨基)乙酯水凝胶、聚乙二醇水凝胶、壳聚糖基聚合物水凝胶中的一种或几种。优选壳聚糖基聚合物水凝胶(TSG)，其可按现有技术制备，比如参考文献ACS Applied Materials&Interfaces 2021,13,49369
‑
49379。
[0014]进一步地，本专利技术的上述应用中，所述雷公藤红素温敏性水凝胶的制备方法包括以下步骤：
[0015]将10g聚乙二醇
‑
15羟基硬脂酸酯和0.8g雷公藤红素溶解于10mL无水乙醇中，得混合液；
[0016]在超声搅拌下，将所得混合液滴加到100mL注射用水中，旋蒸除去无水乙醇，得载药聚合物胶束；
[0017]将1g所述载药聚合物胶束和1.8g温敏性聚合物水凝胶进行配料，混匀后，补加注射用水定容至100mL，即得所述雷公藤红素温敏性水凝胶。
[0018]本专利技术发现，在上述投料比下制成的雷公藤红素温敏性水凝胶具有较高的载药量和包封率，同时还具有最佳抑制角膜基质纤维化的作用。
[0019]进一步地，本专利技术的上述应用中，所述角膜基质纤维化由角膜外伤、手术、感染所致。
[0020]本专利技术实施例具有如下优点：
[0021]本专利技术通过体外实验证明雷公藤红素有效促进兔角膜基质细胞自噬相关蛋白LC3A、LC3B、Beclinc
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1，消耗自噬蛋白P62，抑制自噬调控信号通路PI3K/Akt/mTOR的表达。
[0022]本专利技术采用纳米技术，首先制备负载雷公藤红素的纳米胶束，以增强其表观溶解度，再将雷公藤红素纳米胶束与温敏性聚合物水凝胶自组装，形成可注射的负载雷公藤红素纳米胶束的温敏性水凝胶，在板层角膜移植术中将其注射于角膜植床上，形成薄层透明凝胶，实现药物雷公藤红素在靶组织的缓慢释放，并有效抑制角膜基质纤维化。
附图说明
[0023]图1为本专利技术提供的雷公藤红素通过抑制PI3K/AKt/mTOR，促进角膜基质细胞自噬，抑制角膜基质细胞FN、COL1的表达，抑制其向肌成纤维细胞转化；
[0024]图2为本专利技术提供的温敏性聚合物水凝胶在负载载药聚合物胶束之前(A)以及负
载载药聚合物胶束之后的电镜图(B)、以及雷公藤红素温敏性水凝胶在不同温度下的外观性能(C)；
[0025]图3为本专利技术提供的雷公藤红素温敏水凝胶促进角膜基质细胞自噬，有效抑制角膜基质纤维化。
具体实施方式
[0026]以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.雷公藤红素在制备抑制角膜基质纤维化药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物抑制PI3K/AKt/mTOR，促进角膜基质细胞自噬，抑制角膜基质细胞FN、COL1的表达，抑制其向肌成纤维细胞转化。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述药物为雷公藤红素温敏性水凝胶，其制备方法包括以下步骤：(1)将10g聚乙二醇15
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羟基硬脂酸酯和0.1
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1.5g雷公藤红素溶解于2
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20mL有机溶剂中，得混合液；(2)在超声搅拌下，将所得混合液滴加到用量为所述有机溶剂体积的5
‑
15倍的注射用水中，旋蒸除去有机溶剂，得载药聚合物胶束；(3)将0.05
‑
5g所述载药聚合物胶束和1
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50g温敏性聚合物水凝胶进行配料，混匀后，补加注射用水定容至100mL，即得所述雷公藤红素温敏性水凝胶。4.根据权利要求3所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：栗占荣，李景果，刘瑞星，储丹丹，祝磊，张颖，
申请(专利权)人：河南省立眼科医院河南省眼科研究所，
类型：发明
国别省市：