一种全人源抗PD-L1抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种全人源抗PD

【技术实现步骤摘要】
一种全人源抗PD
‑
L1抗体及其应用


[0001]本专利技术属于抗体药物领域，具体涉及一种全人源抗PD
‑
L1单克隆抗体及其应用。

技术介绍

[0002]程序性死亡受体配体（PD
‑
L1，也称为CD 274或B7
‑
H1）是程序性死亡受体（PD
‑
1）的配体。PD
‑
L1在多种肿瘤上表达，肿瘤细胞上高表达的PD
‑
L1通过增加T细胞的凋亡从而在肿瘤免疫逃逸中起着重要的作用。针对PD
‑
L1设计特定的单克隆抗体，可阻止PD
‑
1和PD
‑
L1的识别，恢复T细胞正常功能，从而使T细胞有效杀伤肿瘤细胞。
[0003]鉴于PD
‑
L1在癌症发展和免疫调节中的作用，本领域仍需能够与PD
‑
L1结合并能阻断PD
‑
1与PD
‑
L1结合的抗PD
‑
L1单克隆抗体。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种特异性结合PD
‑
L1的单克隆抗体及其应用。所述抗PD
‑
L1抗体具有下述性质中的一种或者多种：（1）能够分别与人PD
‑
L1、猴PD
‑
L1、鼠PD
‑
L1结合；（2）能够阻断PD
‑
1蛋白与PD
‑
L1蛋白的结合；（3）能够刺激淋巴细胞分泌细胞因子；（4）和/或具有亲水性、热稳定性、有利于制备和纯化。本专利技术还提供了所述抗PD
‑
L1单克隆抗体的制备方法和应用。
[0005]一方面，本专利技术提供一种特异性结合PD
‑
L1蛋白的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含氨基酸序列如SEQ ID NO: 20所示的轻链CDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO: 21所示的轻链CDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO: 22所示的轻链CDR3，氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示的重链CDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示的重链CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO: 3所示重链CDR3。
[0006]在某些实施方式中，所述的单克隆抗体或其抗原结合片段包含与SEQ ID NO: 7所示的氨基酸序列至少95%同一性的重链可变区VH和包含与SEQ ID NO: 26所示的氨基酸序列至少95%同一性的轻链可变区VL，且其中VH包含氨基酸序列如SEQ ID NO: 1
‑
3所示的重链CDR1
‑
3，且其中VL包含氨基酸序列如SEQ ID NO: 20
‑
22所示的轻链CDR1
‑
3。
[0007]在某些实施方式中，所述的单克隆抗体或其抗原结合片段包含氨基酸序列如SEQ ID NO: 7所示的重链可变区VH和氨基酸序列如SEQ ID NO: 26所示的轻链可变区VL。
[0008]在某些实施方式中，所述抗原结合片段包含Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fv或scFv。
[0009]在某些实施方式中，所述单克隆抗体为全人源抗体。
[0010]在某些实施方式中，所述的单克隆抗体还包含人IgG1亚型的重链恒定区，和κ亚型的轻链恒定区。
[0011]在某些实施方式中，所述重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 17所示，和所述轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 34所示。
[0012]另一方面，本专利技术提供一种核酸分子，其编码本专利技术所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
[0013]另一方面，本专利技术提供一种载体，其包含本专利技术所述的核酸分子。
[0014]另一方面，本专利技术提供一种细胞，其导入了本专利技术所述的核酸分子或转染了本专利技术所述的载体。
[0015]另一方面，本专利技术提供一种制备本专利技术所述特异性结合PD
‑
L1蛋白的单克隆抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括在允许所述单克隆抗体或其抗原结合片段表达的条件下培养所述细胞，以及回收这样产生的所述抗体或其抗原结合片段。
[0016]另一方面，本专利技术提供一种免疫缀合物，其包含与治疗剂偶联的本专利技术所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
[0017]在某些实施例中，所述治疗剂为毒素、放射性同位素、免疫调节剂或细胞毒性剂。
[0018]另一方面，本专利技术提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的本专利技术所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，以及药学上可接受的佐剂。
[0019]另一方面，本专利技术涉及所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述的核酸分子、所述的载体、所述的细胞、所述的免疫缀合物和/或所述的药物组合物在制备治疗与PD
‑
L1相关的疾病的药物中的用途。
[0020]本申请的抗PD
‑
L1抗体具有较好的亲和力、结合能力，能够竞争性阻断PD
‑
1和PD
‑
L1的结合作用，且细胞活性实验中证明其具有激活混合淋巴细胞释放IL
‑
2的能力，产生了有益的效果。
[0021]除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本专利技术所属
普通技术人员通常所理解的相同的含义。
[0022]本专利技术中，术语“一种”和“所述”通常包括多个指示物。
[0023]本专利技术中，术语“约”通常指本领域技术人员容易知道的相应值的普通误差范围，例如，在20%内，更优选在10%内，并且最优选在5%内。
[0024]本专利技术中，术语“特异性结合”通常是指可测量且可再现的相互作用。例如抗原和抗体之间的结合，抗体通过其抗原结合域与表位结合，并且该结合需要抗原结合域和表位之间的一些互补性。例如，特异性结合靶物（其可以是表位）的抗体是以比其结合其它靶物更高的亲和力、亲合力、更容易和/或以更长的持续时间结合此靶物的抗体。当抗体相比于其将结合随机的、不相关的表位而言更容易通过其抗原结合域与表位结合时，抗体被称为“特异性结合”该抗原。
[0025]本专利技术中，术语“PD
‑
L1”（程序性死亡配体1），也称为分化簇274（CD 274）或B7同源物1（B7
‑
H1）。PD
‑
L1的基本结构包括4个结构域：胞外免疫球蛋白样V型结构域、免疫球蛋白样C 2型结构域、跨膜结构域及C端胞内结构域，其基因位于人染色体的9p24位点。PD
‑
L1可以结合其受体（例如程序性死亡受体1，PD
‑
1），PD
‑
L1与PD
‑
1的结合可以抑制T细胞的增殖，激活下游抑制信号，从而使肿瘤细胞逃逸机体免疫系统的识别和攻击。本专利技术中，术语“PD
‑
L1”涵本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性结合PD
‑
L1蛋白的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含氨基酸序列如SEQ ID NO: 20所示的轻链CDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO: 21所示的轻链CDR2，氨基酸序列如SEQ ID NO: 22所示的轻链CDR3，氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示的重链CDR1，氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示的重链CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO: 3所示重链CDR3。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含氨基酸序列如SEQ ID NO: 7所示的重链可变区VH和氨基酸序列如SEQ ID NO: 26所示的轻链可变区VL。3.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗原结合片段包含Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fv或scFv。4.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中，所述单克隆抗体为全人源抗体。5.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中，所述单克隆抗体还包含人IgG1亚型的重链恒定区，和κ亚型的轻链恒定区。6.根据权利要求5所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中，所述重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 17所示，和所述轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 3...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾春银，王宗达，曹晓丹，刘培培，邓俗俊，王学萍，
申请(专利权)人：上海济煜医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：