杰米拉类芽孢杆菌W51在草莓和桃采后病害防治中的应用及应用方法技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，公开了一种杰米拉类芽孢杆菌W51在草莓和桃采后病害防治中的应用及应用方法，用W51菌悬液对草莓进行浸泡处理，对桃进行接种处理。经过处理后，在贮藏8天后，处理组的草莓腐烂率和腐烂指数显著低于对照组，相关品质指标如硬度、失重率、可滴定酸、VC含量、可溶性固形物等也明显优于对照组。经过接种处理后的桃，在贮藏期间，病斑直径均小于对照组，维持了相关品质指标如硬度、可滴定酸、VC含量、可溶性固形物等。因此，杰米拉类芽孢杆菌在草莓和桃采后病害防治方面效果显著，能够维持果实品质，延长其货架期。延长其货架期。延长其货架期。

【技术实现步骤摘要】
杰米拉类芽孢杆菌W51在草莓和桃采后病害防治中的应用及应用方法
[0001]

[0002]本专利技术涉及水果采后病害防治领域，特别涉及一种杰米拉类芽孢杆菌W51在草莓和桃采后病害防治中的应用及应用方法。

技术介绍

[0003]草莓属于浆果类水果，果实鲜红柔嫩，美味可口，具有很高的营养和药用价值，同时将其深受消费者喜爱。但是草莓质软多汁，成熟期短，不易储藏，采后极易受到机械损伤和病原菌侵染，在我国每年都会造成严重的经济损失。桃原产地为中国，每年产量极大，因其色香味俱佳，在我国受欢迎度极高。而夏季是桃的主要成熟期，同时桃皮薄，汁水丰厚，因此贮藏运输极不方便，易受果实损失率很高。灰霉（Botrytis cinerea）和葡枝根霉（Rhizopus stolonifer）分别是引起草莓和桃采后腐烂的主要病原菌。
[0004]目前主要的防治手段有化学防治和生物防治两种。化学杀菌剂见效快，抑制力强，在我国被广泛使用。但是连续多年使用容易使得病原菌产生抗药性，降低防效，同时由于化学杀菌剂多为人工合成，使用在果实上会造成残留，极易污染环境并对人体健康造成威胁。生物防治作为有效的生防手段，生防菌不仅具有良好的拮抗病原菌能力，同时对环境友好，生物防治的开发利用能够有效降低化学杀菌剂对人体和环境的危害，因此生物防治具有广阔的发展前景。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种杰米拉类芽孢杆菌W51在草莓和桃采后病害防治中的应用及应用方法，杰米拉类芽孢杆菌W51具有广泛的抑菌能力，能够拮抗引起草莓采后腐烂的病原菌灰霉以及引起桃采后腐烂的病原菌葡枝根霉，对防治草莓和桃采后病害有良好的效果，能被开发利用在果实采后病害防治领域；该菌株易培养，生长繁殖快。
[0006]技术方案：本专利技术提供了一种杰米拉类芽孢杆菌（Paenibacillus jamilae）W51在防治灰霉所致草莓采后病害和葡枝根霉所致桃采后病害中的应用。
[0007]进一步地，所述杰米拉类芽孢杆菌W51于2018年10月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC No.16639。
[0008]本专利技术还提供了一种杰米拉类芽孢杆菌（Paenibacillus jamilae）W51在防治灰霉所致草莓采后病害和葡枝根霉所致桃采后病害中的应用方法，其特征在于：使用活菌总浓度为1
×
10
8 CFU/mL的杰米拉类芽孢杆菌W51的菌悬液对草莓进行浸泡处理，对桃进行接种处理。
[0009]进一步地，所述杰米拉类芽孢杆菌W51的菌悬液的制备方法如下：将杰米拉类芽孢杆菌W51划线培养于LB平板培养基上；在30~35
º
C下培养22~26h后转接于LB培养液中，28~32
ꢀº
C、180~200 rpm培养22~26h；将所得菌液在4000~6000 rpm室温离心10 min，所得菌体用无菌水悬浮。
[0010]进一步地，所述浸泡处理的具体方法如下：对草莓进行消毒处理，表面消毒晾干后，在菌悬液中浸泡3 min；自然晾干放入盒中，每盒放150~200 g草莓，置于20 ℃，湿度为80~90%的恒温恒湿培养箱中贮藏8天。
[0011]进一步地，所述接种处理的具体方法如下：在桃赤道部刺孔，向孔中定量注入所述杰米拉类芽孢杆菌W51的菌悬液，24 h之后再定量注入葡枝根霉病原菌孢子悬浮液，自然风干后，将接种的果实装入聚乙烯袋中，置于20
±
1 ℃贮藏3天。
[0012]进一步地，所述葡枝根霉病原菌孢子悬浮液的制备方法如下：葡枝根霉在PDA平板上生长48h后，向平板加入10 ml无菌水清洗孢子，用血球计数板计数，并将葡枝根霉孢子液浓度稀释至1
×
10
5 CFU mL
‑1，现配现用。
[0013]优选地，在所述桃赤道部等距离刺孔2个。
[0014]优选地，使用微量移液器向孔中定量注入所述杰米拉类芽孢杆菌W51的菌悬液。
[0015]优选地，所述草莓的品种为“红颜”，成熟度为八成熟，形状大小一致，无损伤病害；所述桃的品种为“突围”，形状大小一致，无损伤病害。
[0016]有益效果：杰米拉类芽孢杆菌W51能够拮抗引起草莓采后腐烂的主要病原菌灰霉和引起桃采后腐烂的主要病原菌葡枝根霉。分别对草莓进行浸泡菌悬液处理，对桃进行接种注射菌悬液处理，通过对处理后的草莓测定腐烂率、腐烂指数、失重率，检测相关品质指标：硬度、VC、可滴定酸和可溶性固形物的含量。对处理过的桃测定发病率、病斑直径，检测硬度、VC、可滴定酸和可溶性固形物含量。结果显示W51菌悬液处理对草莓和桃采后病害防治效果显著优于对照组。由此可见，W51能够有效防治草莓、桃的采后腐烂，维持果实的相关品质指标。本专利技术对果实采后病害防治效果好，同时操作简单，所使用的杰米拉类芽孢杆菌W51尚未在果实采后病害防治领域有所应用，具有创新性。
附图说明
[0017]图1为W51对灰霉和葡枝根霉的抑制效果柱状图。
具体实施方式
[0018]下面结合附图对本专利技术进行详细的介绍。
[0019]实施方式1：杰米拉类芽孢杆菌W51对灰霉和葡枝根霉的抑制效果测定灰霉和葡枝根霉分别是引起草莓和桃采后腐烂的主要病原菌。采用牛津杯法，在PDA平板中间接种直径为5 mm的灰霉菌饼，将牛津杯对称放置在距菌饼2 cm处，其中一个牛津杯注入50 μL菌悬液，另一个牛津杯中注入等量无菌水作为对照，当菌丝生长接触到注入无菌水的牛津杯时，计算抑制率。抑制率（%）=（对照组菌落直径
‑
处理组菌落直径）/对照组菌落直径
×
100。对葡枝根霉的抑制效果测定方法同上。
[0020]结果如图1所示，杰米拉类芽孢杆菌W51对灰霉的抑制率为84.60%，对葡枝根霉的
抑制率为75.00%。因此可以看出杰米拉类芽孢杆菌W51对灰霉和葡枝根霉有明显的抑制作用。
[0021]实施方式2：杰米拉类芽孢杆菌W51对草莓采后病害防治效果验证和相关品质指标测定对草莓采用浸泡的方式处理。分组排列经过挑选的草莓并对其进行消毒处理，表面消毒晾干后，分成两组，分别为对照组和处理组。对照组将筛选出的草莓浸泡无菌水3 min，处理组则将筛选出的草莓在1
×
10
8 CFU mL
‑
1 W51菌悬液中浸泡3 min。两组在室温下自然晾干后放入盒中，每盒放150~200 g草莓，置于20 ℃，湿度为80~90%的恒温恒湿培养箱中贮藏8天，观察草莓腐烂情况，并分别在第0、2、4、6、8天取样。
[0022]每隔两天记录草莓的腐败变质情况，测定样品的腐烂率、腐烂指数，腐烂率=腐烂果数/总果数。腐烂指数根据草莓腐烂程度分级：0级，无草莓腐烂；1级，低于10%的腐烂面积；2级，10%~30本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种杰米拉类芽孢杆菌（Paenibacillus jamilae）W51在防治灰霉所致草莓采后病害和葡枝根霉所致桃采后病害中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述杰米拉类芽孢杆菌W51于2018年10月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC No.16639。3. 一种杰米拉类芽孢杆菌（Paenibacillus jamilae）W51在防治灰霉所致草莓采后病害和葡枝根霉所致桃采后病害中的应用方法，其特征在于：使用活菌总浓度为1
×
10
8 CFU/mL的杰米拉类芽孢杆菌W51的菌悬液对草莓进行浸泡处理，对桃进行接种处理。4. 根据权利要求3所述的应用方法，其特征在于，所述杰米拉类芽孢杆菌W51的菌悬液的制备方法如下：将杰米拉类芽孢杆菌W51划线培养于LB平板培养基上；在30~35
º
C下培养22~26h后转接于LB培养液中，28~32
ꢀº
C、180~200 rpm培养22~26h；将所得菌液在4000~6000 rpm室温离心10 min，所得菌体用无菌水悬浮。5.根据权利要求3所述的应用方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓莉，李习冉，王云鹏，朱晶凤，韦欢，李甲，丁志鹏，刘藻，
申请(专利权)人：淮阴工学院，
类型：发明
国别省市：