一种多肽合成的氨基酸保护剂及DCC产物沉淀的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种多肽合成的氨基酸保护剂及DCC产物沉淀的制备方法，取保护剂X，X为4

【技术实现步骤摘要】
一种多肽合成的氨基酸保护剂及DCC产物沉淀的制备方法


[0001]本专利技术涉及多肽合成的相关
，尤其涉及一种多肽合成的氨基酸保护剂及DCC产物沉淀的制备方法。

技术介绍

[0002]目前多肽合成技术所用氨基酸保护剂的分子结构复杂，且污染比较大，不易于沉淀分离，急需一种分子简单易于分离的氨基酸保护剂来满足市场需求，而氨基酸链合成中加入了DCC催化剂，其产物二环己脲少一部分溶于水中，未能完全除去，缺少一种能除去水中溶解的二环亚胺的方法，来节省成本。本方案提供一种简单易行的氨基酸保护剂引物和二环亚胺沉淀的技术。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是为了解决现有的问题，而提出的一种多肽合成的氨基酸保护剂及DCC产物沉淀的制备方法。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0005]一种多肽合成的氨基酸保护剂的制备方法，包括以下步骤：
[0006]步骤一：取保护剂X，X为4
‑
氨基苯磺酸钠，取1mmol的保护剂溶于10ml水中，充分溶解，然后取丙氨酸1mmol反应，X氨基与丙氨酸羧基端结合形成酰胺键；
[0007]步骤二：在丙氨酸氨基端后依次接A、B、C、D、E等氨基酸，同时分别加入DCC碳二亚胺1mmol进行反应，反应2
‑
2.5h，直到多肽链合成末尾为止；
[0008]步骤三：取1mmol的丙氨酸氨肽酶，用酶切下X
‑
丙氨酸，然后加入沉淀剂氯化钙进行反应，除去保护剂X分子上由苯磺酸基结合钙离子沉淀形成的Ca
2+
－X－Ala
‑
NH2；
[0009]一种多肽合成的DCC产物沉淀的制备方法，包括以下步骤：
[0010]步骤一：加入了n个1mmol的碳二亚胺，催化产生了二环己脲沉淀，少量溶于水中未能完全除去；
[0011]步骤二：在步骤一的产物中加入酒石酸沉淀剂，通过反应沉淀除去二环己脲，通过过滤器过滤掉沉淀，滤出清液；
[0012]步骤三：利用烘干器干燥水分，从而得到纯的多肽产物。
[0013]综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：该专利技术中通过添加保护剂X的4－氨基苯磺酸钠和丙氨酸，保护剂X与丙氨酸反应，由于保护剂X中含苯磺酸基与钙离子结合，其氨基在丙氨酸羧基端中起封端作用，起引物作用引导连接丙氨酸，而丙氨酸在在DCC催化剂下结合多种氨基酸结合形成氨酰键，与A、B、C、D、E等氨基酸依次反应合成一条链条。用丙氨酸氨肽酶切离丙氨酸，保护剂X头端与沉淀剂结合而沉淀；保护剂X价格较便宜，比其他保护剂方便且无毒无害，易于沉淀，X可结合丙氨酸羧基端，又可与沉淀剂结合而沉淀，非常实用，而DCC产物二环己脲用另外的沉淀剂沉淀，DCC反应产物二环己脲有少量溶于水中，用另外的沉淀剂酒石酸沉淀，比较便宜方便，且纯度提取的效率较高，精度较高，易
于合成纯的多肽。
附图说明
[0014]图1为氨基酸多肽合成的化学分子式；
具体实施方式
[0015]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0016]实施例一：
[0017]一种多肽合成的氨基酸保护剂的制备方法，包括以下步骤：
[0018]步骤一：取保护剂X，X为4
‑
氨基苯磺酸钠，取1mmol的保护剂溶于10ml水中，充分溶解，然后取丙氨酸1mmol反应，X氨基与丙氨酸羧基端结合形成酰胺键；
[0019]步骤二：在丙氨酸氨基端后依次接A、B、C、D、E等氨基酸，同时分别加入DCC碳二亚胺1mmol进行反应，反应2
‑
2.5h，直到多肽链合成末尾为止；
[0020]步骤三：取1mmol的丙氨酸氨肽酶，用酶切下X
‑
丙氨酸，然后加入沉淀剂氯化钙进行反应，除去保护剂X分子上由苯磺酸基结合钙离子沉淀形成的Ca
2+
－X－Ala
‑
NH2；
[0021]一种多肽合成的DCC产物沉淀的制备方法，包括以下步骤：
[0022]步骤一：由权利要求1中步骤三的产物中加入了2个1mmol的碳二亚胺，催化产生了二环己脲沉淀，少量溶于水中未能完全除去；
[0023]步骤二：在步骤一的产物中加入酒石酸沉淀剂，通过反应沉淀除去二环己脲，通过过滤器过滤掉沉淀，滤出清液；
[0024]步骤三：利用烘干器干燥水分，从而得到纯的多肽产物。
[0025]制备后的多肽产物纯度较高，且反应速度和效率较高，并且反应的成本便宜，利于大量需求。
[0026]实施例二：
[0027]一种多肽合成的DCC产物沉淀的制备方法，包括以下步骤：
[0028]步骤一：由权利要求1中步骤三的产物中加入了5个1mmol的碳二亚胺，催化产生了二环己脲沉淀，少量溶于水中未能完全除去；
[0029]步骤二：在步骤一的产物中加入酒石酸沉淀剂，通过反应沉淀除去二环己脲，通过过滤器过滤掉沉淀，滤出清液；
[0030]步骤三：利用烘干器干燥水分，从而得到纯的多肽产物。
[0031]制备后的多肽产物纯度比实施例一中的较低，且反应速度和效率比实施例一中的较低，并且反应的成本较高，不利于大量需求。
[0032]实施例三：
[0033]一种多肽合成的DCC产物沉淀的制备方法，包括以下步骤：
[0034]步骤一：由权利要求1中步骤三的产物中加入了8个1mmol的碳二亚胺，催化产生了二环己脲沉淀，少量溶于水中未能完全除去；
[0035]步骤二：在步骤一的产物中加入酒石酸沉淀剂，通过反应沉淀除去二环己脲，通过过滤器过滤掉沉淀，滤出清液；
[0036]步骤三：利用烘干器干燥水分，从而得到纯的多肽产物。
[0037]制备后的多肽产物纯度与实施例一相差不多，且反应速度和效率跟实施例一相似，但反应的成本很高，不利于大量需求。
[0038]综上所述，当加入2mmol的碳二亚胺之后反应的DCC产物沉淀纯度最高，并且成本经济，利于大规模生产需求。
[0039]以上所述，仅为本专利技术较佳的具体实施方式，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
的技术人员在本专利技术揭露的技术范围内，根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽合成的氨基酸保护剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：取保护剂X，X为4
‑
氨基苯磺酸钠，取1mmol的保护剂溶于10ml水中，充分溶解，然后取丙氨酸1
‑
1.5mmol反应，X氨基与丙氨酸羧基端结合形成酰胺键；步骤二：在丙氨酸氨基端后依次接A、B、C、D、E等氨基酸，同时分别加入DCC碳二亚胺1mmol进行反应，反应2
‑
2.5h，直到多肽链合成末尾为止；步骤三：取1mmol的丙氨酸氨肽酶，用酶切下X
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：柳春曦，柳光旭，
申请(专利权)人：柳春曦，
类型：发明
国别省市：