BET蛋白抑制剂在制备慢性移植物抗宿主病药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，具体涉及BET蛋白抑制剂在制备慢性移植物抗宿主病药物中的应用及小鼠模型建立方法。本发明专利技术中I

【技术实现步骤摘要】
BET蛋白抑制剂在制备慢性移植物抗宿主病药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及BET蛋白抑制剂在制备慢性移植物抗宿主病药物中的应用。

技术介绍

[0002]异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo
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HSCT)是目前治疗恶性血液系统疾病、某些遗传性疾病及骨髓衰竭性疾病的重要手段。然而，慢性移植物抗宿主病(chronic graft
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versus host disease，cGVHD)的发生，是目前制约移植后病人长期生存和生活质量的主要原因之一。cGVHD的临床表现与自身免疫性疾病类似，表现为硬皮病、闭塞性细支气管炎、靶器官异基因抗体的沉积等多器官受损的自身免疫性血管性胶原病的特征，主要累及的脏器包括口腔、眼、皮肤、生殖道、肝脏、肺、肾脏、消化道。cGVHD 的发生率达30％
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70％，病死率达30％
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50％。相对于aGVHD而言，cGVHD的发病机制更加复杂，治疗效果更差，因此，寻找有效的防治cGVHD手段显得尤为重要。
[0003]小分子抑制剂I
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BET151，是一种异噁唑类化合物，可靶向阻断BET蛋白和乙酰化赖氨酸残基结合，参与染色体修饰，对细胞功能起重要调控作用。有临床前研究证明BET蛋白抑制剂I
‑
BET151对人和鼠MLL融合阳性的白血病细胞系的增殖具有明显的抑制作用，且体内研究表明，I
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BET151治疗能使两种不同的伴MLL融合阳性的小鼠模型生存受益。有研究报告I
‑
BET151可抑制HEL细胞系以及从真性红细胞增多症患者中分离出的红系幼稚细胞的增殖，其作用是通过高度下调LMO2基因实现的，并且其抑制作用在JAK2抑制剂耐药的HEL 细胞株中仍然存在。Liu
[
等的研究显示I
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BET151可能通过抑制Stat3信号通路抑制卵巢癌转移，并且I
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BET151具有明显的抗卵巢肿瘤活性。Sun等的研究表明BET蛋白抑制剂I
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BET151 能明显抑制树突细胞和T细胞功能，在小鼠allo
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HSCT模型中，早期给予短程I
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BET151治疗能明显降低急性GVHD的严重程度。
[0004]相对于aGVHD而言，cGVHD的发病机制更加复杂，治疗效果更差，糖皮质激素治疗反应率仅50％～60％，难治性cGVHD患者预后差，且长期使用激素会带来糖尿病、感染、骨质疏松、精神状态异常等不良反应，影响患者生活质量，严重者危及患者生命。且既往仅有BET 蛋白抑制剂I
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BET151在小鼠模型中预防aGVHD的应用。
[0005]近年来，靶向阻断BET蛋白和乙酰化赖氨酸残基结合的小分子化合物的研究取得了丰硕的成果。2010年，第一个BET蛋白小分子抑制剂JQl问世，但其成药性不如2012年合成的新型小分子抑制剂I
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BET。I
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BET151能明显抑制树突细胞和T细胞功能，在小鼠allo
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HSCT 模型中可降低急性GVHD的严重程度，但是其在cGVHD中的作用至今尚未报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术通过动物实验研究探索一种BET蛋白抑制剂I
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BET151在制备预防和治疗移植物抗宿主病药物中的应用。
[0007]本专利技术提供一种BET蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗慢性移植物抗宿主病药物中的应用。
[0008]优选的，所述BET蛋白抑制剂为小分子抑制剂I
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BET151。
[0009]优选的，所述药物用于抑制供体肠系膜淋巴结中的免疫细胞。
[0010]优选的，所述免疫细胞为CD3
+
T细胞、CD8
+
T细胞和树突状细胞中的一种或多种。
[0011]优选的，所述药物用于抑制脾脏中T细胞功能。
[0012]优选的，所述药物用于抑制脾脏中Tfh细胞比例。
[0013]优选的，所述药物用于减轻移植后胸腺损伤。
[0014]本专利技术还提供一种预防和/或治疗慢性移植物抗宿主病的药物，包括权利要求1或2所述的BET蛋白抑制剂。
[0015]进一步地，所述BET蛋白抑制剂的剂量为8
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12mg/kg。
[0016]进一步地，所述药物的给药方式为口服、腹腔注射、皮下注射、静脉注射和肌肉注射中的一种或多种。
[0017]本专利技术的技术方案相比现有技术具有以下优点：
[0018]本专利技术中I
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BET151具有抑制异基因造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病的作用；能抑制供体T细胞增殖和T细胞的功能，抑制Th1细胞反应；抑制树突状细胞的增殖；抑制Tfh 的增殖，促进胸腺细胞增殖，促进胸腺免疫重建。
附图说明
[0019]图1为小鼠移植后的体重变化(A)、cGVHD评分(B)、腹泻情况(C)。
[0020]图2为Vehicle组和I
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BET151小鼠肺部、肾脏、肠道、皮肤组织H&E染色图。
[0021]图3为I
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BET151在肠系膜淋巴结中对T细胞和树突状细胞的抑制作用图。
[0022]图4为I
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BET151对T细胞功能的抑制作用图。
[0023]图5为I
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BET151对脾脏细胞中Tfh细胞抑制图。
[0024]图6为Vehicle组和I
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BET151小鼠胸腺组织及胸腺细胞计数图。
[0025]图7为I
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BET151对胸腺细胞中CD4
+
T，CD8
+
T细胞促进作用图。
具体实施方式
[0026]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本专利技术并能予以实施，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。
[0027]实施例1
[0028]受体小鼠(BALB/c，H
‑2d
)于移植前7天开始饮用含庆大霉素的酸化水(庆大霉素32万单位/升)，一直维持到实验结束。
[0029]实施例2
[0030]采用颈椎脱臼的方法处死供体小鼠，用70％酒精消毒体表，在超净台中无菌取出小鼠脾脏，置于含RPMI 1640培养基的平皿中，使用无菌毛边玻璃片轻柔研磨脾脏直到大部分细胞均已被研磨出，然后经200目尼龙网过滤至50ml干净离心管制成单细胞悬液。倒入适量RPMI1640培养基至平皿中涮洗一次，以免细胞损失。离心，1300转，4℃，5min，倾倒废液，加入5ml红细胞裂解液(裂红液的量根据细胞数进行调整)，轻吹本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.BET蛋白抑制剂在制备预防和/或治疗慢性移植物抗宿主病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述BET蛋白抑制剂为小分子抑制剂I
‑
BET151。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于抑制供体肠系膜淋巴结中的免疫细胞。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述免疫细胞为CD3
+
T细胞、CD8
+
T细胞和树突状细胞中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于抑制脾脏中T细...

【专利技术属性】
技术研发人员：王荧，程巧，吴德沛，徐杨，刘吟，张文丽，雷蕾，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：