本发明专利技术涉及生物医药技术领域，公开了一种新冠病毒的中和性抗体及其变体和应用。本发明专利技术从噬菌体展示抗体文库中，通过噬菌体淘选技术筛选获得了多株抗体，其能够特异性地与多种新冠病毒的S蛋白上的RBD结构域结合，从而抑制S蛋白与人ACE2蛋白的结合。本发明专利技术的中和抗体亲和力高，广谱性强，可以抑制新冠病毒对人的细胞侵染，起到中和病毒毒性的作用，可以用于制备预防和治疗新冠病毒疾病的药物，用于制备新冠病毒检测产品等，具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
新冠病毒中和抗体及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及新冠病毒的中和性抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]新型冠状肺炎病毒(SARS
‑
Cov
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2)简称新冠病毒，可以侵染人的细胞并引起新冠肺炎，侵染的机理是新冠病毒利用其外壳上的棘突蛋白S与人的细胞表面的血管紧张素转化酶2(Ang iotensin converting enzyme 2，ACE2)结合后，新冠病毒遗传物质进入人的细胞进行复制并引发肺炎。新冠病毒的棘突蛋白S简称S蛋白，是新冠病毒毒力的关键因子，是决定新冠病毒毒力、组织嗜性和宿主范围的关键部分。S蛋白由1200多个氨基酸残基组成，分为若干个结构域。S蛋白是通过其上的受体结合结构域(receptor binding domain,RBD)RBD结构域结合而完成侵染的，因此，开发抗体来特异性地结合S蛋白的RBD并阻断其与ACE2的结合成为治疗和预防新冠肺炎的一种有效的方法。
[0003]新冠病毒不断出现变异菌株，对于治疗抗体的要求也越来越高，目前抗新冠病毒的抗体亲和力不高，表达量低，或广谱性不强，因此，迫切需要开发亲和力强、表达量高且具有广谱抗新冠病毒的抗体。
技术实现思路
[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种新冠病毒的中和抗体及所述中和抗体的应用，解决上述新冠病毒抗体亲和性不高、广谱性差、表达量低等的技术问题。
[0005]本专利技术一方面提供了一种新冠病毒的中和抗体，包括VH部分；所述VH部分包括CDR H1、CDR H2和CDR H3；
[0006]所述CDR H1具有SEQ ID NO:1(KYSHLGF)、SEQ ID NO:4(EYSQLRF)或SEQ ID NO:7(KFSHLVF)所示的氨基酸序列，或者具有与SEQ ID NO:1、4或7所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列；
[0007]所述CDR H2具有SEQ ID NO:2(GLGAYEDG)、SEQ ID NO:5(GLGANEDG)或SEQ ID NO:8(GLGAYESG)所示的氨基酸序列，或者具有与SEQ ID NO:2、5或8所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列；
[0008]所述CDR H3具有SEQ ID NO:3(AALVVFSRDSPEFLAQNY)、SEQ ID NO:6(AALVIFSHDGPEFLAQNY)或SEQ ID NO:9(AALVVLSRDNTEFIAHNY)所示的氨基酸序列，或者具有与SEQ ID NO:3、6或9所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列。
[0009]本专利技术中，所示CDR可以以各种成对组合进行组合以产生多种中和性抗体。
[0010]在一些实施方式中，所述VH部分中，
[0011]所述CDR H1的氨基酸序列选自：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:7。
[0012]所述CDR H2的氨基酸序列选自：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:8。
[0013]所述CDR H3的氨基酸序列选自：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:9。
[0014]在一些实施方式中，所述VH部分包括以下任何一种：
[0015](1)包含氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的CDR H1，包含氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的CDR H2，和包含氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的CDR H3；或其变体；
[0016](2)包含氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的CDR H1，包含氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示的CDR H2，和包含氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示的CDR H3；或其变体；
[0017](3)包含氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的CDR H1，包含氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示的CDR H2，和包含氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示的CDR H3；或其变体，
[0018]其中，所述变体是在所述多个CDR区中包含多个氨基酸突变后的抗体。在一些实施方式中，所述变体是在所述多个CDR区中共包含最高达约3个(例如1个、2个或3个)氨基酸突变后的抗体。
[0019]在一些实施方式中，所述VH部分还可以包括框架区。在一些实施方式中，所述框架区包含氨基酸序列如SEQ ID NO:10(DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASG)所示的FR1，氨基酸序列如SEQ ID NO:11(LGWFRQAPGKEREGVAA)所示的FR2，氨基酸序列如SEQ ID NO:12(YYADSVKGRFTVSLDNAENTVYLQMNSLKPEDTALYYC)所示的FR3，以及氨基酸序列如SEQ ID NO:13(WGQGTQVTVSS)所示的FR4。
[0020]在一些实施方式中，所述VH部分的氨基酸序列：
[0021]如SEQ ID NO:14
[0022](DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGKYSHLGFLGWFRQAPGKEREGVAAGLGAYEDGYYADSVKGRFTVSLDNAENTVYLQMNSLKPEDTALYYCAALVVFSRDSPEFLAQNYWGQGTQVTVSS)所示；或
[0023]如SEQ ID NO:15
[0024](DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGEYSQLRFLGWFRQAPGKEREGVAAGLGANEDGYYADSVKGRFTVSLDNAENTVYLQMNSLKPEDTALYYCAALVIFSHDGPEFLAQNYWGQGTQVTVSS)所示；或
[0025]如SEQ ID NO:16
[0026](DVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGKFSHLVFLGWFRQAPGKEREGVAAGLGAYESGYYADSVKGRFTVSLDNAENTVYLQMNSLKPEDTALYYCAALVVLSRDNTEFIAHNYWGQGTQVTVSS)所示；或
[0027]具有与SEQ ID NO:14～16所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列。
[0028]在一些实施方式中，所述中和抗体为纳米抗体(VHH)，所述VHH氨基酸序列如SEQ ID NO:14～16任一所示，或者具有与SEQ ID NO:14～16所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列。
[0029]在一些实施方式中，所述中和抗体还包括Fc区，所述Fc区为人免疫球蛋白IgG1的Fc区。
[0030]在一些实施方式中，所述中和抗体为VHH+Fc。
[0031]在一些实施方式中，所述中和抗体为Fab+Fc。
[0032]在本专利技术的另一方面，提供一种核酸，其编码以上任一实施方案的中和抗体。
[0033]在本专利技术的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种新冠病毒的中和抗体，包括CDR H1、CDR H2和CDR H3，其特征在于，所述CDR H1具有SEQ ID NO:1、4或7所示的氨基酸序列，或者具有与SEQ ID NO:1、4或7所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列；所述CDR H2具有SEQ ID NO:2、5或8所示的氨基酸序列，或者具有与SEQ ID NO:2、5或8所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列；所述CDR H3具有SEQ ID NO:3、6或9所示的氨基酸序列，或者具有与SEQ ID NO:3、6或9所示的氨基酸序列存在至少80％同源性的序列。2.如权利要求1所述的中和抗体，其特征在于，所述CDR H1具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述CDR H2具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，所述CDR H3具有SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；或，所述CDR H1具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列，所述CDR H2具有SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列，所述CDR H3具有SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；或，所述CDR H1具有SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列，所述CDR H2具有SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列，所述CDR H3具有SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列。3.如权利要求1或2所述的中和抗体，其特征在于，所述的中和抗体还包括骨架区，所示骨架区包括具有下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:10所示的FR1，SEQ ID NO:11所示的FR2，SEQ ID NO:12示的FR3，和SEQ ID NO:13所示的FR4。4.根据权利要求1
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3任一项所述的中和抗体，其特征在于，所述中和抗体为VH...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄海明，赵东平，尹羽清，栾林莉，杨雄，蒋定文，庄贤韩，
申请(专利权)人：上海纳为生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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