一种对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的检测方法技术

本领域属于分析化学领域，具体涉及对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的检测方法。配制待测样品溶液，分别注入高效液相色谱仪，采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以水和乙腈

【技术实现步骤摘要】
一种对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的检测方法


[0001]本领域属于分析化学领域，具体涉及对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的检测方法。

技术介绍

[0002]利鲁唑为神经系统用药，用于肌萎缩侧锁硬化症，可延长肌萎缩侧锁硬化患者的生命或延长其发展至需要机械通气支持的时间，临床试验已经证明利鲁唑可延长肌萎缩侧锁硬化患者的存活期。
[0003]对三氟甲氧基苯胺是合成利鲁唑的一个重要的起始物料，其结构式如下：
[0004][0005]为了控制对三氟甲氧基苯胺的质量，需要清楚对三氟甲氧基苯胺的合成工艺，目前对三氟甲氧基苯胺的合成主要以三氟甲氧基苯为原料经硝化、还原等反应得到对三氟甲氧基苯胺，其合成工艺中常见的杂质主要有：
[0006][0007]对其原料进行检测，需要检测出其相关杂质，然而，对三氟甲氧基苯胺及其相关杂质的结构极其相似，有一定的分离难度。对于三氟甲氧基苯胺的检测现有技术多采用气相色谱法，例如，兰瑛等公开了一种气相色谱法测定对三氟甲氧基苯胺的含量(气相色谱法测定对三氟甲氧基苯胺的含量，科技信息，2008年第23期)，该方法准确性低，灵敏度低，并且不能测定对三氟甲氧基苯胺原料中的相关杂质。目前还没有分离测定对三氟甲氧基苯胺及其杂质的HPLC方法，因此，开发一种分离测定对三氟甲氧基苯胺及其杂质的方法，对于实现对三氟甲氧基苯胺的质量控制具有极其重要的意义。
[0008]由于对三氟甲氧基苯胺原料中的杂质多，且结构非常近似，在采用HPLC方法检测时，容易导致有些性质极为相近的杂质不能有效分开，尤其在分离对三氟甲氧基苯胺与杂质A、B、杂质C、杂质D与杂质E时，由于他们在苯环上的取代基相同，只是取代位置不同，分离难度非常大。因此，开发一种能够同时检测主物质及杂质A、B、C、D、E、F六种杂质的HPLC方法非常有必要。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的，在于提供一种分离对三氟甲氧基苯胺及其相关杂质的方法，该方法能够实现对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的分离，还能够准确测定对三氟甲氧基苯胺及其
相关杂质的含量，本专利技术的方法各杂质项分离度好，灵敏度、准确性高，耐用性好，可实现对三氟甲氧基苯胺的质量控制。
[0010]本专利技术的技术方案如下：
[0011]一种对三氟甲氧基苯胺及其相关杂质的检测方法，配制待测样品溶液，分别注入高效液相色谱仪，采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以水和乙腈-甲醇的混合溶液为流动相，利用紫外吸收检测器进行检测。
[0012]优选地，所述流动相分别为水、乙腈-甲醇的混合溶液，其混合溶液中乙腈和甲醇的体积比为(60～70％)：(40～30％)，更加优选地，乙腈和甲醇的体积比为(64～66％):(36:34％)；进一步优选地，乙腈和甲醇的体积比为65％:35％。
[0013]优选地，所述流动相的流速为0.5～1.5ml/min，更加优选为0.8～1.2ml/min；进一步优选地，所述流动相的流速为1.0ml/min。
[0014]优选地，所述方法采用水和乙腈-甲醇溶液进行梯度洗脱，在0～25min，流动相中乙腈-甲醇的体积占比为50～75％。
[0015]进一步优选地，所述方法的洗脱梯度为：
[0016][0017]在一个优选的实施方式中，所述方法的洗脱梯度为：
[0018][0019][0020]优选地，所述紫外吸收检测器的检测波长为205nm～215nm。
[0021]进一步，优选地，所述检测波长为210nm。
[0022]优选地，所述色谱柱温度为30～40℃。
[0023]进一步，优选，所述色谱柱温度为35℃。
[0024]优选地，所述的色谱柱为YMC Triart C18 EXRS或YMC J
’
Sphere H80。
[0025]优选地，色谱柱规格为4.6mm
×
150mm，3μm。
[0026]以下内容进一步详细阐述一种对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的检测方法。
[0027]一种对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的检测方法，包括如下步骤：
[0028](1)溶液的配制
[0029]对照品溶液配制：精密称取对三氟甲基苯胺及杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和杂质F的标准品，用乙腈或乙腈水溶液为稀释剂稀释配制成对三氟甲基苯胺及杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和杂质F的对照品溶液。
[0030]供试品溶液配制：精密称取供试品，用乙腈或乙腈水溶液为稀释剂稀释配制成供试品溶液。
[0031](2)液相系统检测
[0032]分别取各对照品溶液及供试品溶液注入高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以水和乙腈-甲醇混合溶液为流动相进行检测分析，确定对三氟甲氧基苯胺及杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和杂质F的相对保留时间，记录色谱图，按外标法或加校正因子的自身对照法计算供试品中对三氟甲氧基苯胺及杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和杂质F的含量。
[0033]HPLC检测条件如下：
[0034]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；
[0035]流动相：A相为水；B相为乙腈-甲醇(体积比60～70％:40～30％)；
[0036]流动相流速：0.8～1.2ml/min；
[0037]检测波长：205～215nm；
[0038]色谱柱温度：30～40℃；
[0039]进样量：10～20μl。
[0040]洗脱梯度如下：
[0041][0042][0043]优选地，所述稀释剂为50％乙腈水溶液。
[0044]在一个优选的实施例中，HPLC检测条件如下：
[0045]色谱柱：YMC Triart C18 EXRS(4.6mm
×
150mm，3μm)；
[0046]流动相：A相为水；B相为乙腈-甲醇(体积比65:35)；
[0047]流动相流速：1.0ml/min；
[0048]检测波长：210nm；
[0049]色谱柱温度：35℃；
[0050]进样量：10μl。
[0051]洗脱梯度如下：
[0052][0053]本专利技术所述加校正因子的自身对照法计算供试品中对三氟甲氧基苯胺及相关杂质的含量，计算式如下：
[0054][0055]总杂质＝Σ单个杂质含量；
[0056]式中：A
T
—供试品溶液中各杂质的峰面积；
[0057]式中：A
r
—自身对照溶液中主成分的峰面积；
[0058]式中：f—已知杂质的校正因子。
[0059]在一个实施例中，精密称取供试品适量，加稀释剂配制成1.0mg/ml的供试品溶液，精密移取供试品溶液100μl，置10ml容量瓶中，加稀释剂配制成0.01mg/ml自身对照溶液，稀释倍数为100倍，分别移取供试品溶液及自身对照溶液10μl进样，记录色谱图，按加校正本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种对三氟甲氧基苯胺及其相关杂质的检测方法，其特征在于，配制待测样品溶液，分别注入高效液相色谱仪，采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以水和乙腈-甲醇的混合溶液为流动相，采用紫外吸收检测器进行检测。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙腈-甲醇混合溶液中乙腈和甲醇的体积比为60～70％:40～30％。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，乙腈和甲醇的体积比为64～66％:36～34％。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法采用水和乙腈-甲醇混合溶液梯度洗脱，所述洗脱梯度0...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，闫丽，刘思光，刘忠，
申请(专利权)人：鲁南制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：