生物活性交联剂、生物交联物、试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术公开了生物活性交联剂、生物交联物、试剂盒及应用，交联剂其结构通式为SCN

【技术实现步骤摘要】
生物活性交联剂、生物交联物、试剂盒及应用


[0001]本专利技术是关于生物检测技术，特别是关于一种生物活性交联剂、生物交联物、试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]交联剂是指一类分子两端各有一个相同或者不同的活性基团，它们可与其他分子上的氨基、巯基、羟基等发生共价结合而产生交联作用的试剂，交联剂可分为三种类型:同型双功能试剂、异型双功能试剂和可被光活化试剂。目前，免疫类技术标记用的偶联方法包括共价交联方法和物理吸附法两种。其中，共价交联方法最多。共价交联方法又分为同型共价交联剂和异型共价交联剂。同型共价交联剂主要有戊二醛、戊二酸、己二胺、乙酸酐、二缩水甘油基乙醚、辛二亚氨酸甲酯等，此类交联剂容易形成分子内或者分子间的自身交联，没有方向选择性。异型交联剂使单个分子上两个末端的不同的活性基团分别与两个不同的分子交联，不会形成分子内或分子间的自身交联。现有的交联剂受限于支链结构、空间构象、空间位阻等方面的限定，标记放大能力受到了较大的限制。
[0003]公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种生物活性交联剂、制备方法、组合物、试剂盒及应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术的实施例提供了生物活性交联剂，其结构通式为SCN
‑
Ph
‑
N
‑
(U
‑
(W
‑
(D
‑
COOH)
2n或3n
)
a
)
b
(该通式指 SCN
‑
Ph
‑
N
‑
(U
‑
(W
‑
(D
‑
COOH)
2n
)
a
)
b
或SCN
‑
Ph
‑
N
‑
(U
‑
(W
‑
(D
‑
COOH)
3n
)
a
)
b
)，其中 n、a、b均为正整数，且a为1或2，b为2或3，Ph为烷基或含有环结构的烷基，N的基团主体选自：己二胺、乙二胺、丙二胺、丁二胺、赖氨酸、精氨酸、环己二胺、苯二胺、苯三胺、苯三酸，U选自乙酸基、丙酸基、丁酸基、乙烷基、丙烷基、丁烷基，W为多元基团，D的结构通式为
‑
(CH2)
m
‑
，m 为正整数，1≤m≤5。
[0006]在本专利技术的一个或多个实施方式中，交联剂其结构通式如下为 SCN
‑
Ph
‑
N
‑
(E
‑
U
‑
(W
‑
(D
‑
COOH)
2n或3n
)
a
)
b
，其中n、a、b均为正整数，且a为1 或2，b为2或3，Ph为烷基或含有环结构的烷基，N的基团主体选自：己二胺、乙二胺、丙二胺、丁二胺、赖氨酸、精氨酸、环己二胺、苯二胺、苯三胺、苯三酸，U选自乙酸基、丙酸基、丁酸基、乙烷基、丙烷基、丁烷基， W为多元基团，D的结构通式为
‑
(CH2)
m
‑
，m为正整数，1≤m≤5，E为碳链基团或杂链基团。W可以为叔胺等。
[0007]在本专利技术的一个或多个实施方式中，基团E代表的碳链基团还具有亲水性侧链或杂链基团还具有亲水性侧链。
[0008]在本专利技术的一个或多个实施方式中，交联剂中异硫氰基与羧基的比例为 1：c，其中c为2或3的正整数倍。优选的，交联剂中异硫氰基与羧基的比例为不小于1：10。
[0009]在本专利技术的一个或多个实施方式中，交联剂其结构式如下：
[0010][0011]这里是对交联剂的一种可能的举例，而非对上述通式的限定，各部分可替代基团，均可以进行灵活性替代。
[0012]在本专利技术的一个或多个实施方式中，生物交联物，包括如前述的生物活性交联剂形成的主链以及链接到异硫氰基的抗原或抗体，和/或链接到羧基的小分子物质。
[0013]在本专利技术的一个或多个实施方式中，小分子物质包括荧光小分子化合物和/或化学发光物质和/或电化学发光物质和/或放射性同位素和/或胶体金。
[0014]在本专利技术的一个或多个实施方式中，小分子物质包括荧光素类、吖啶酯类、胶体金类、三联吡啶钌类、铕Eu类衍生物、放射性同位素中的至少一种。
[0015]在本专利技术的一个或多个实施方式中，标记试剂盒，包括如前述的生物活性交联剂或如前述的生物交联物。
[0016]在本专利技术的一个或多个实施方式中，如前述的生物活性交联剂或如前述的生物交联物或如前述的标记试剂盒在标记含活性氨基物质中的应用。
[0017]针对现有技术，本专利技术提出一种新型的交联剂，具有异型特异性交联的优点，同时
又能增加标记物信号强度，实现1：n的优势。通过这种新型交联剂的桥接作用，促使，一个抗体或者抗原等或其他的分子可以交联一个或多个交联剂分子，而一个交联剂分子可以交联n个标记物分子。从而，实现信号增强作用。
具体实施方式
[0018]下面结合具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。
[0019]除非另有其它明确表示，否则在整个说明书和权利要求书中，术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分，而并未排除其它元件或其它组成部分。
[0020]在以下实施例中以如下式所示的交联剂为例，对本专利技术的创新之处进行说明，但不作为对本专利技术保护范围的限定。
[0021][0022]交联剂(记为J，或者SCN
‑
J
‑
(COOH)
n
)
[0023]该交联剂合成路线如下，同理本专利技术的其它可能交联剂也可以参照本路线或者其它路线进行合成：
[0024][0025][0026][0027][0028]实施例1：抗原(包括半抗原，完全抗原)或抗体，记为P
‑
NH2，与化学发光类物质，如吖啶酯修饰物(AE)的交联；交联剂记为SCN
‑
J
‑
(COOH)
n
。
[0029][0030]吖啶酯己二胺修饰物(记为AE)
[0031]生物交联物的反应路线如下:
[0032][0033]取1.0mg抗体或抗原，用pH7.4的PBS溶解，振荡混匀。加入小分子交联物10.0mg，振荡混匀，4℃振荡反应过夜。取出反应液后，用透析袋透析， 4℃过夜。
[0034]取出透析液后，加入吖啶酯修饰物(AE，如式)10本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物活性交联剂，其结构通式为SCN
‑
Ph
‑
N
‑
(U
‑
(W
‑
(D
‑
COOH)
2n或3n
)
a
)
b
，其中n、a、b均为正整数，且a为1或2，b为2或3，Ph为烷基或含有环结构的烷基，N的基团主体选自：己二胺、乙二胺、丙二胺、丁二胺、赖氨酸、精氨酸、环己二胺、苯二胺、苯三胺、苯三酸，U选自乙酸基、丙酸基、丁酸基、乙烷基、丙烷基、丁烷基，W为多元基团，D的结构通式为
‑
(CH2)
m
‑
，m为正整数，1≤m≤5。2.如权利要求1所述的生物活性交联剂，其特征在于，其结构通式如下为SCN
‑
Ph
‑
N
‑
(E
‑
U
‑
(W
‑
(D
‑
COOH)
2n或3n
)
a
)
b
，其中n、a、b均为正整数，且a为1或2，b为2或3，Ph为烷基或含有环结构的烷基，N的基团主体选自：己二胺、乙二胺、丙二胺、丁二胺、赖氨酸、精氨酸、环己二胺、苯二胺、苯三胺、苯三酸，U选自乙酸基、丙酸基、丁酸基、乙烷基、...

【专利技术属性】
技术研发人员：李松羊，李强，
申请(专利权)人：安源基因科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：