一种降解氨气的菌剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种菌剂，特别涉及一种降解氨气的菌剂及其应用。本发明专利技术从新鲜猪粪便中分离获得一株唾液乳杆菌WEI

【技术实现步骤摘要】
一种降解氨气的菌剂及其应用
[0001]
：本专利技术涉及一种菌剂，特别涉及一种降解氨气的菌剂及其应用。
[0002]
技术介绍
：养猪的规模化、专业化和集中化是现代化养猪的必然趋势，而规模化养猪产生的粪尿废水的不及时或不当处理，会对环境产生诸多影响。养殖过程中，猪舍有害气体不但对动物的健康、肉质产生负面影响，而且会增加风机的能耗以及对环境产生污染。
[0003]氨气是生猪养殖过程中主要的臭味来源以及公认的应激源，是动物圈舍内最有害的气体之一。氨的水溶液呈碱性，对黏膜有刺激性，严重时可发生碱灼伤，引起眼睛流泪、灼痛，角膜和结膜发炎，视觉障碍。氨气进入呼吸道可引起咳嗽、气管炎和支气管炎、肺水肿、出血、呼吸困难、窒息等症状，导致呼吸机能紊乱甚至器官坏死。此外，氨溶解到呼吸道黏膜的粘液中，使粘液的pH值向碱性转化，纤毛丧失活动功能，增加经空气传播疾病的发病率。大量研究表明，猪萎缩性鼻炎等流行性的疾病的暴发与猪舍中氨气的浓度呈现正相关。当猪舍中氨气达15 μg/kg时，试验猪只开始出现呼吸道疾病，35 μg/kg时出现萎缩性鼻炎，氨浓度超过50 μg/kg时，可引起呼吸道粘膜受伤。尤其在冬季，由于通风不足，猪舍氨气等大量有害气体的积聚，会加速高热病的发生，保育猪的死亡率大幅升高。
[0004]微生物是降低养殖场中氨气含量的安全、有效的方法，但由于动物粪尿中碳氮比失调，大多微生物难以在其中稳定增殖形成优势菌群，也就难以有效的降低氨氮含量。此外，冬季气温偏低，不利于微生物的生长，会造成微生物分解氨气效率大幅降低，而且养殖场从保温及节能角度考虑，冬季的圈舍通风频次明显减少，更加促使圈舍内氨气浓度的升高，对动物健康造成严重伤害。因此，一种能够在低温条件下能够有效降解氨气的微生物对于降低养殖圈舍氨气含量将起到关键作用。
[0005]
技术实现思路
：（一）专利技术目的：本专利技术的目的是提供一种在低温条件下可以在动物粪尿中正常增殖，同时降低养殖场圈舍内的氨气含量的除臭菌剂及其应用方法。
[0006]（二）技术方案：本专利技术的目的可以通过如下技术方案实现：本专利技术提供一种除臭菌剂，其所用菌株为唾液乳杆菌WEI
‑
181，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏编号CGMCC No.23764。
[0007]本专利技术的除臭菌剂可以通过唾液乳杆菌WEI
‑
181的液体高密度发酵获得，所用斜面、摇瓶种子培养基为商业化MRS培养基，所用发酵培养基成分及比例为：蔗糖 5
‑
15 g，酵母膏 3
‑
8 g，糖蜜4
‑
9g，七水合硫酸镁 0.5
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1 g，三水合磷酸氢二钾0.1
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0.5 g，碳酸钙 0.5
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1.5 g，水 1000 ml，pH 7.0。
[0008]本专利技术的除臭菌剂可以通过唾液乳杆菌WEI
‑
181的液体高密度发酵获得，生产方法为：从新鲜活化的WEI
‑
181斜面上挑取一环菌苔，接种至灭菌的摇瓶种子中，37℃静置培养20 h；
将摇瓶种子按照1:100的比例接种至发酵罐中，37℃ 50 rpm培养24 h。
[0009]所述的降解氨气的菌剂，在10
‑
40 ℃环境温度下，可以在动物粪尿中正常增殖。
[0010]所述的降解氨气的菌剂，在10
‑
25 ℃环境温度下，可以在动物粪尿中正常增殖。
[0011]所述的动物粪尿可以为猪、鸡、牛、羊、毛皮动物粪尿。
[0012]本专利技术还提供了一种降解氨气的菌剂的应用方法，将降解氨气的菌剂加入到动物粪尿中或喷洒到畜禽圈舍地面使用。
[0013]所述动物粪尿中降解氨气的菌剂，按照1
×
106
ꢀ‑1×
107 CFU/g的终浓度添加使用。
[0014]所述喷洒到畜禽圈舍地面的降解氨气的菌剂，按照1
×
105
ꢀ‑1×
106 CFU/m2的终浓度喷洒使用。
[0015]所述畜禽圈舍包括猪、鸡、牛、羊、毛皮动物的养殖圈舍，所述动物粪尿包括猪、鸡、牛、羊、毛皮动物的粪尿。
[0016]（三）意义：通过可在低温环境下增殖的微生物除臭剂降低养殖场圈舍氨气含量，尤其是在冬季低温环境下依然能够保持活性，降低有害气体含量和提高养殖环境质量的同时，还能间接减少能耗。此外，相比化学除臭剂，微生物除臭剂还具有持续投入低，安全无害等优点。
[0017]附图说明:图1为耐低温降氨气乳酸菌的应用一实验结果图2为耐低温降氨气乳酸菌的应用二实验结果图3为耐低温降氨气乳酸菌的应用三实验结果图4为耐低温降氨气乳酸菌的应用四实验结果图5为耐低温降氨气乳酸菌的应用五实验结果图6为耐低温降氨气乳酸菌的应用六实验结果具体实施方式:实施例1、微生物的分离和纯化以收集自7个猪场的31份新鲜粪便为筛选材料，采用系列稀释法从中分离乳酸菌，具体操作如下：取10 g样品，加入90 ml无菌生理盐水，充分震荡混匀后，以无菌生理盐水进行10倍梯度稀释，选取合适的稀释梯度液1 ml加入到无菌培养皿中，向其中倾注50℃事先融化的含有1.5%碳酸钙的商品化MRS培养基( 各稀释度设3个重复) ，袋培养基凝固后置于37℃培养箱培养24 h，选取有水解圈的菌落传代纯化。
[0018]从31份粪便样品中共计分离、纯化获得462株乳酸菌。
[0019]实施例2、降氨气乳酸菌菌的初筛取10 ml 降氨气筛选培养基（蔗糖50.0 g/L，氨水10.0 ml/L，KH2PO
4 2.0 g/L，MgSO4·
7H2O 0.5 g/L， FeSO
4 0.1 g/L，1%ZnSO
4 5.0 ml/L，NaCl 2.0 g/L，121 ℃灭菌15 min。）装于试管中，向其中加入25%氨水10 μl，待测菌株经商品化MRS液体培养基37℃培养24 h后，按5%(V/V)接种量接种上述试管中，37℃培养3天，以培养液的浑浊度（紫外分光光度计检测OD
600
）作为评判指标，若菌液浑浊表明该菌株具有降解氨气的能力。
[0020]从462株乳酸菌中初步获得53株降氨气菌株。实施例3、降氨气乳酸菌菌的复筛
准确称取50 g左右新鲜猪粪加至3 L的烧杯中，根据猪粪干燥程度加入适量水稀释至可被搅拌器正常搅拌的状态，将初选菌株用商品化MRS液体培养基培养活化后，按猪粪质量的5%接种至猪粪表面，烧杯中放入装有20 ml的2%硼酸溶液的50 ml无菌小烧杯，用于吸收氨气，用保鲜膜密封大烧杯口，置于37℃培养箱中。对照组加入等量无菌水，每个处理3个重复，分别于0 d、5 d和10 d用硼酸吸收法测定氨气的释放量。以实验组与对照组氨气释放量的比值计算氨气降解率，进而筛选降氨气菌株。
[0021]硼酸吸收法测定氨气的方法如下：取出硼酸吸收第5d、10 d日氨气后的小烧杯，滴加混合指本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种降解氨气的菌剂，其特征在于，所含菌株包括唾液乳杆菌WEI
‑
181，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏编号CGMCC No.23764。2.根据权利要求1所述的降解氨气的菌剂，其特征在于，所述的降解氨气的菌剂，在10
‑
40 ℃环境温度下，可以在动物粪尿中正常增殖。3.根据权利要求2所述的降解氨气的菌剂，其特征在于，所述的降解氨气的菌剂，在10
‑
25 ℃环境温度下，可以在动物粪尿中正常增殖。4.根据权利要求2或3所述的降解氨气的菌剂，其特征在于，所述的动物粪尿可以为猪、鸡、牛、羊、毛皮动物粪尿。5.一种降解氨气的菌剂的应用方...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚宏明，李向清，岳欣然，黄玉岚，
申请(专利权)人：北京嘉华种猪育种有限公司，
类型：发明
国别省市：