一种细胞蜡块的制备方法及其产品和应用技术

本发明专利技术提供一种细胞蜡块的制备方法及其产品和应用。所述制备方法包括以下步骤：(1)将脱落细胞样本进行离心，得到第一沉淀物；(2)将步骤(1)得到的第一沉淀物与Nacl蛋清溶液混合均匀，得到悬浮液，随后将乙醇溶液与悬浮液混合，静置，离心，得到第二沉淀物；(3)将步骤(2)得到的第二沉淀物用福尔马林处理，静置，随后取出第二沉淀物，进行脱水、包埋，得到所述细胞蜡块。采用所述制备方法得到的细胞蜡块具有足够量的细胞，且细胞形态完好，聚集性高，成团性好，可连续切片，阅片背景清晰，能够满足后续检测的需求。另外，所述细胞蜡块可用于制备疾病诊断装置。诊断装置。诊断装置。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞蜡块的制备方法及其产品和应用


[0001]本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种细胞蜡块的制备方法及其产品和应用。

技术介绍

[0002]脱落细胞学是通过采集人体各部位，特别是管腔器官表面的脱落细胞，经染色后用显微镜观察这些细胞的形态，并做出诊断的一门临床检验学科，又名诊断细胞学或临床细胞学，具有快速、准确、方便以及患者痛苦少等优点，已成为临床诊断的重要手段之一。
[0003]目前，液基细胞学技术，一种将脱落细胞保存在液体中，并通过特殊设备将细胞均匀分散贴附在载玻片上制成涂片的技术，广泛应用于妇科宫颈细胞学检查技术，近年来该项技术也被应用于非妇科领域。常规的液基细胞片因细胞量少、细胞发生退变，样本性状不好等因素，导致细胞学诊断的阳性率较低。尤其是浆膜腔积液、尿液及脑脊液等体液，依靠液基细胞学检查技术，仅能初步筛选出异型的核异质细胞，对于其来源的鉴定存在困难，对于一些早期转移性肿瘤原发灶的寻找是十分困难的，往往需要进行一些后续的检测手段，如免疫组化及基因检测等。
[0004]近些年来，细胞蜡块技术，即将样品离心，使其中的细胞和微小组织块浓缩固定，石蜡包埋后切片染色观察的技术，可以避免细胞间拥挤重叠排列、背景中存在多量淋巴细胞的缺点，能够很好的观察细胞形态、组织结构，从而提高诊断敏感度及确诊率。另外，细胞蜡块便于免疫表型标记，进一步推测肿瘤细胞的来源，可作为非妇科液基、涂片诊断后的补充试验，提高检查的精确性。将临床上最常见的脱落细胞学检查标本
‑
浆膜腔积液制作成细胞蜡块，可明显提高细胞病理诊断的敏感性和特异性，而且对于部分获取病理组织困难者意义较大。
[0005]细胞蜡块的制作方法多种多样，例如传统酒精固定法、琼脂法或商品试剂盒制备等。CN107831058A公开了一种基于血性细胞样本的细胞蜡块的制备方法及细胞蜡块，制备方法包括：将血性细胞样本经第一固定液液清洗后，第一次离心，收集第一沉淀样本，加入第二固定液，混合均匀后，第二次离心，得第二沉淀，将第二沉淀脱水、透明、浸蜡以及包埋。其中，第一固定液为乙醇乙酸液，其制备效率高，操作简便，制得的细胞蜡块，可永久保存，细胞成分多，能有效提高诊断的准确率。但采用该方法得到的细胞的成团效果不佳。
[0006]CN108168969A公开了一种琼脂细胞蜡块及其制备方法，制备方法包括：将细胞样本离心，收集第一沉淀样本。将第一沉淀样本与融化的琼脂混合，得到的混合液冷藏，得细胞块初始样本。将细胞块初始样本经拭镜纸包裹后，固定、脱水、透明、浸蜡以及包埋。其制备效率高，操作简便，制得的琼脂细胞蜡块含有的细胞结构清晰，染色对比度佳，高倍背景清晰，可有效提高诊断的准确率。但采用该方法得到的细胞的聚集性不高，成团效果不佳。
[0007]CN106769278A公开了一种细胞蜡块制备试剂盒及其制备方法。所述细胞蜡块制备试剂盒包括试剂A和试剂B，所述试剂A为聚阴离子纤维素、聚阴离子纤维素钠、聚阴离子纤维素钾、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和羧甲基纤维素钾中任意一种配成的水溶液，所述试剂B为有机溶剂。采用试剂A和B进行细胞蜡块的制作，需要的组织液等样品少，可提高检
测的准确性，对于临床上用于细胞穿刺物、切割针活检、体液的细胞蜡块的制备具有巨大的应用价值。但该方法中含有的试剂较多，配制步骤繁琐，效率低。
[0008]基于以上研究，可以看出采用传统细胞蜡块的制备方法存在着试剂配制繁琐、操作繁杂、效率低及细胞成团效果不佳的问题。因此，找到一种细胞蜡块的制备方法，有效克服上述缺陷，对于病理学诊断具有重要的现实意义。

技术实现思路

[0009]针对现有技术的不足和现实实际的需求，本专利技术的目的在于提供一种细胞蜡块的制备方法及其产品和应用。所述细胞蜡块的制备方法简便易行，不需要繁琐的试剂配制，成本低，经济实用，制备的细胞蜡块具有足够的细胞量，可连续切片，能够满足后续检测的需求。
[0010]为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0011]第一方面，本专利技术提供一种细胞蜡块的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0012](1)将脱落细胞样本进行离心，得到第一沉淀物；
[0013](2)将步骤(1)得到的第一沉淀物与Nacl蛋清溶液混合均匀，得到悬浮液，随后将乙醇溶液与悬浮液混合，静置，离心，得到第二沉淀物；
[0014](3)将步骤(2)得到的第二沉淀物用福尔马林处理，静置，随后取出第二沉淀物，进行脱水、包埋，得到所述细胞蜡块。
[0015]本专利技术将Nacl蛋清溶液加入至第一沉淀物中，并通过加入乙醇溶液，将Nacl蛋清溶液中的蛋白质变性沉淀，通过离心使得变性沉淀的蛋白质裹挟着细胞成分一起沉淀在容器底部，并通过加入福尔马林，使得蛋白质近一步凝固，维持细胞团块的形状，且有助于细胞团块从容器底部脱离，随后通过脱水和包埋等步骤得到细胞蜡块。
[0016]需要说明的是，本专利技术所涉及的细胞蜡块的制备方法，简便易行，不需要繁琐的试剂配制操作，成本低，经济实用。制备得到的细胞蜡块具有足够量的细胞，且细胞形态完好，聚集性高，成团性好，可连续切片，观察背景清晰，能够满足后续检测的需求。
[0017]本专利技术中，所述Nacl蛋清溶液通过Nacl溶液与蛋清混合而制备得到，所述Nacl溶液中氯化钠的质量分数为0.85
‑
0.90％。
[0018]所述0.85
‑
0.90％，可以是0.85％、0.86％、0.87％、0.88％、0.89％或0.90％等。
[0019]优选地，所述蛋清包括蛋清粉。
[0020]上述数值范围内的其他点值均可选择，在此便不再一一赘述。
[0021]本专利技术中，所述蛋清的质量与Nacl溶液的体积的比例为1:(8
‑
32)g/mL，优选为1:(12
‑
24)g/mL。
[0022]本专利技术优选蛋清的质量与Nacl溶液的体积的比例为1:(8
‑
32)g/mL，可以保证细胞成团效果好，有利于制成细胞蜡块且所做蜡块切片背景干净，当蛋清的质量与Nacl溶液的体积的比例为1:(12
‑
24)g/mL，得到的效果更好。
[0023]所述1:(8
‑
32)g/mL，可以是1:8g/mL、1:10g/mL、1:12g/mL、1:14g/mL、1:16g/mL、1:18g/mL、1:20g/mL、1:22g/mL、1:24g/mL、1:26g/mL、1:28g/mL、1:30g/mL L或1:32g/mL等。
[0024]本专利技术中，所述第一沉淀物的质量与Nacl蛋清溶液的体积的比例为1:(1.5
‑
2.3)g/mL，优选为1:(1.5
‑
2)g/mL。
[0025]本专利技术优选第一沉淀物的质量与Nacl蛋清溶液的体积的比例为1:(1.5
‑
2.3)g/mL，能够保证细胞成团效果本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种细胞蜡块的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)将脱落细胞样本进行离心，得到第一沉淀物；(2)将步骤(1)得到的第一沉淀物与Nacl蛋清溶液混合均匀，得到悬浮液，随后将乙醇溶液与悬浮液混合，静置，离心，得到第二沉淀物；(3)将步骤(2)得到的第二沉淀物用福尔马林处理，静置，随后取出第二沉淀物，进行脱水、包埋，得到所述细胞蜡块。2.根据权利要求1所述的细胞蜡块的制备方法，其特征在于，所述Nacl蛋清溶液通过Nacl溶液与蛋清混合而制备得到；优选地，所述蛋清包括蛋清粉；优选地，所述蛋清的质量与Nacl溶液的体积的比例为1:(8
‑
32)g/mL，优选为1:(12
‑
24)g/mL；优选地，所述Nacl溶液中氯化钠的质量分数为0.85
‑
0.90％。3.根据权利要求1或2所述的细胞蜡块的制备方法，其特征在于，所述第一沉淀物的质量与Nacl蛋清溶液的体积的比例为1:(1.5
‑
2.3)g/mL，优选为1:(1.5
‑
2)g/mL。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的细胞蜡块的制备方法，其特征在于，所述乙醇溶液中乙醇的质量分数为60
‑
85％，优选为60
‑
80％。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丹宇，宁贤霜，
申请(专利权)人：广州安必平医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：