石榴皮鞣质及其有效成分安石榴苷和石榴皮亭在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，公开了一种石榴皮鞣质及其有效成分安石榴苷和石榴皮亭在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。本发明专利技术通过石榴皮鞣质治疗由硫酸葡聚糖钠盐诱导的小鼠溃疡性结肠炎后，从体重、疾病活动指数、结直肠的长度、结直肠黏膜形态和杯状细胞数量上相比于模型组都有一定程度的改善，表明石榴皮鞣质对于溃疡性结肠炎具有一定的治疗作用。石榴皮鞣质中的有效成分安石榴苷和石榴皮亭单独或联合给药，对于溃疡性结肠炎均有非常好的作用，以联合用药为最佳。以联合用药为最佳。

【技术实现步骤摘要】
石榴皮鞣质及其有效成分安石榴苷和石榴皮亭在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用


[0001]本专利技术属于医药
，特别涉及石榴皮鞣质(PPT)及其有效成分安石榴苷和/或石榴皮亭在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。

技术介绍

[0002]炎症性肠病是一种发病原因尚未十分明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病，具有病程长、久不愈、并且容易反复发作，具有终身复发倾向等特点，即便外科手术治疗往往也很难彻底进行根治，寻找治疗炎症性肠病且具有良好预后的药物一直是近年来学者们关注的热点。炎症性肠病包括两种病理类型，即克罗恩病和溃疡性结肠炎，溃疡性结肠炎主要影响直肠粘膜和左侧结肠，临床病程难以预测，以直肠出血和腹泻为特征。
[0003]石榴(Punica granatum L.)属于石榴科。石榴的种植原产于中东，后来在地中海地区为人所知。石榴生长在半干旱、温和至亚热带气候，空气干燥、夏季炎热、冬季凉爽的地区，如阿富汗、伊朗、印度、中国、日本等。近年来人们不断发现石榴具有多种药理活性成分，这些活性成分赋予石榴具有抗菌抗病毒、降血糖、抗肿瘤、调血脂及抗氧化、免疫调节等药理作用。石榴皮，又称石榴壳、酸石榴皮、酸榴皮、西榴皮、安石榴酸实壳等，系石榴科植物石榴的干燥果皮，具有涩肠止泻、止血、驱虫之功效。石榴皮中含有多种化学成分，如黄酮、鞣质、生物碱等，其中鞣质的含量最为丰富。在此前也有相关文献报道，石榴皮鞣质对于抑制膀胱癌细胞增殖分裂、抗金黄色葡萄糖球菌、改善大鼠肾纤维化等方面都能发挥良好的生物活性作用。石榴皮鞣质及其主要成分应用于溃疡性结肠炎治疗的研究仍欠缺。

技术实现思路

[0004]为了克服现有技术的缺点和不足，本专利技术的目的在于提供一种石榴皮鞣质(PPT)及其有效成分安石榴苷和/或石榴皮亭在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
[0005]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0006]一种石榴皮鞣质(PPT)及其有效成分安石榴苷(PU)和石榴皮亭(GN)在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
[0007]所述石榴皮鞣质按照以下方法制备得到：
[0008](1)将石榴皮按照料液比为1g：15mL～1g：25mL投入乙醇水溶液中进行超声辅助萃取，通过过滤操作除去不溶的残渣，滤液浓缩后，得到石榴皮初提物；
[0009](2)将步骤(1)所得石榴皮初提物复溶于等体积水中，加入明胶溶液至无沉淀产生，过滤，除去滤液，收集沉淀；
[0010](3)将步骤(2)所得沉淀按照料液比为1g：20mL加入丙酮水溶液中复溶，除去不溶物，所得溶液减压浓缩至膏状物；
[0011](4)将步骤(3)所得膏状物用蒸馏水复溶，除去不溶物，所得溶液减压浓缩至浓稠液体，浓稠液体冷冻干燥后得到黄褐色粉末，即为石榴皮鞣质。
[0012]步骤(1)所述乙醇水溶液的体积百分数浓度为60％；步骤(2)所述明胶溶液的体积百分数浓度为3％；步骤(3)所述丙酮水溶液的体积百分数浓度为60％。
[0013]本专利技术实验结果表明石榴皮鞣质及其有效成分安石榴苷和/或石榴皮亭可以通过缓解由硫酸葡聚糖钠盐诱导的小鼠溃疡性结肠炎导致的小鼠体重下降，降低模型小鼠的疾病活动指数(DAI)，缓解由硫酸葡聚糖钠盐诱导的小鼠溃疡性结肠炎导致的小鼠结直肠长度减少，减轻由硫酸葡聚糖钠盐诱导的小鼠溃疡性结肠炎导致的小鼠结肠形态的破坏，缓解由硫酸葡聚糖钠盐诱导的小鼠溃疡性结肠炎导致的小鼠结肠杯状细胞的减少。为了验证这个结果，本专利技术进行了下述研究：
[0014](一)、石榴皮鞣质对小鼠结肠炎的治疗作用：
[0015]首先通过前期预实验的筛选工作，验证石榴皮鞣质的不同剂量对于正常小鼠是否会产生副作用，优选地所述石榴皮鞣质的安全剂量为1～1000mg/kg体重，更优选为400mg/kg体重。再通过建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎模型，验证石榴皮鞣质对小鼠结肠炎的治疗作用，主要步骤如下：
[0016]1)建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎模型
[0017]2)用PBS配置石榴皮鞣质溶液，灌胃给药，每天一次，石榴皮鞣质的剂量是400mg/kg体重，持续1周，实验期每天称重记录体重数据，并观察小鼠直肠出血，粪便成型情况，对疾病活动指数(DAI)进行统计。
[0018]3)解剖测量并统计不同处理组别的小鼠的结直肠长度，通过对组织切片进行AB
‑
PAS染色，观察不同处理组别的组织形态，并对隐窝的深度和杯状细胞数量进行统计，评价石榴皮鞣质及其有效成分安石榴苷单体、石榴皮亭单体、安石榴苷和石榴皮亭复合物对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎，在缓解疾病严重程度、改善结直肠形态损伤和缓解杯状细胞损失方面的作用。
[0019]所述作用如下：与DSS组相比，DSS+PPT组小鼠体重下降的趋势得到缓解，同样的，相对体重的下降的趋势也得到缓解；与DSS组相比，DSS+PPT组小鼠的疾病活动指数(DAI)上升的趋势得到明显的抑制，石榴皮鞣质(PPT)能够缓解硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎的严重程度；溃疡性结肠炎会导致小鼠的结直肠长度变短，与DSS组相比，DSS+PPT组小鼠的结肠长度明显增加，与对照组水平接近；DSS能够破坏结直肠的形态结构，破坏隐窝的完整性，使隐窝的深度变浅，同时造成炎症浸润，通过组织切片观察，与DSS组相比，DSS+PPT组小鼠的结直肠形态较为完整，隐窝的深度和杯状细胞数量也得到恢复，与对照组相近，炎症浸润的情况也得到缓解。
[0020](二)石榴皮鞣质的主要成分安石榴苷(PU)和石榴皮亭(GN)对小鼠结肠炎的治疗作用：
[0021]首先对石榴皮鞣质进行成分分析鉴定，得到其主要成分为安石榴苷(PU)以及石榴皮亭(GN)，根据其在石榴皮鞣质中的含量，设定实验中的给药量，安石榴苷为250mg/kg体重，石榴皮亭为50mg/kg体重。再通过建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎模型，验证安石榴苷(PU)和石榴皮亭(GN)对小鼠结肠炎的治疗作用，主要步骤如下：
[0022]1)建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎模型
[0023]2)用PBS配置安石榴苷/石榴皮亭溶液，口服灌胃给药，每天一次，安石榴苷的剂量是250mg/kg体重，石榴皮亭的剂量是50mg/kg体重，均持续1周，实验期每天称重记录体重数
据，并观察小鼠直肠出血，粪便成型情况，对疾病活动指数(DAI)进行统计。
[0024]3)解剖测量并统计不同处理组别的小鼠的结直肠长度，通过对组织切片进行AB
‑
PAS染色，观察不同处理组别的组织形态，并对隐窝的深度和杯状细胞数量进行统计，评价安石榴苷及石榴皮亭对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎在缓解疾病严重程度、改善结直肠形态损伤方面的作用。
[0025]所述作用如下：
[0026]PU组与对照组相比并无显著差异，表明其并无毒副作用影响。与DSS组相比，DSS+PU组小鼠体重本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种石榴皮鞣质及其有效成分安石榴苷和石榴皮亭在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述石榴皮鞣质按照以下方法制备得到：(1)将石榴皮按照料液比为1g：15mL～1g：25mL投入乙醇水溶液中进行超声辅助萃取，通过过滤操作除去不溶的残渣，滤液浓缩后，得到石榴皮初提物；(2)将步骤(1)所得石榴皮初提物复溶于等体积水中，加入明胶溶液至无沉淀产生，过滤，除去滤液，收集沉淀；(3)将步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄子恒，黎相广，张嘉欣，郑俊霞，冼昌秀，赖伟明，郑玉君，
申请(专利权)人：广东工业大学，
类型：发明
国别省市：