一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法及其系统技术方案

本发明专利技术涉及化学测量领域，具体涉及一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法及其系统，包括：取低分子量肝素钙溶液100ul加抗凝血酶溶液100ul混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第一混合液；在第一混合液中加FXa溶液200ul,混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第二混合液；在第二混合液中加发色底物溶液500ul，混合，37℃平衡4分钟，得到测试液；用紫外分光光度计，以水为空白，在405nm的波长处，连续测定测试液的吸光度，每隔1分钟记录当前吸光度，共5分钟，计算吸光度变化率；取三羟甲基氨基甲烷

【技术实现步骤摘要】
一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法及其系统


[0001]本专利技术涉及化学测量领域，尤其涉及一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法及其系统。

技术介绍

[0002]低分子量肝素钙是一种新型的抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)依赖性抗血栓形成药，主要用于预防和治疗深部静脉血栓形成，也可用于血液透析时预防血凝块形成。
[0003]低分子量肝素钙注射液是低分子量肝素钙的灭菌水溶液，在临床上用于血液透析时预防血凝块形成，预防深部静脉血栓，疗效确切，应用广泛。虽然低分子量肝素钙注射液具有很好的临床疗效，但由于本品的药代动力学由其血浆抗Xa因子活性确定，注射剂中抗Xa因子效价测定偏差，极大影响了制剂的安全性，影响了疗效。
[0004]英国药典和我国国家药品标准收载的方法均为半微量测定法，反应在16支EP小管中完成，按生物检定统计法中的量反应平行线原理4
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4法实验设计，计算效价及试验误差。
[0005]专利技术人发现，在实际检验过程中存在如下不足：反应在16支试管中进行，操作繁琐，很难保证各小管的反应时间一致，容易造成实验误差较大，且操作繁琐。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法及其系统，旨在运用动态生色底物法，配制1份标准溶液和样品溶液，采用酶动力软件自动测定吸光度，大大降低了检验人员繁琐的加样操作，提高了实验的效率。
[0007]为实现上述目的，第一方面，本专利技术提供了一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法，包括：
[0008]S101取低分子量肝素钙溶液100ul加抗凝血酶溶液100ul混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第一混合液；
[0009]S102在第一混合液中加FXa溶液200ul,混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第二混合液；
[0010]S103在第二混合液中加发色底物溶液500ul，混合，37℃平衡4分钟，得到测试液；
[0011]S104用紫外分光光度计，以水为空白，在405nm的波长处，连续测定测试液的吸光度，每隔1分钟记录当前吸光度，共5分钟，计算吸光度变化率；
[0012]S105取三羟甲基氨基甲烷
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氯化钠缓冲液与供试品溶液各100ul,代替低分子量肝素钙溶液按步骤S101～S104操作，分别求出吸光度变化率。
[0013]其中，所述取低分子量肝素钙溶液100ul加抗凝血酶溶液100ul混匀的过程中不能产生气泡。
[0014]其中，所述发色底物为S
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2765。
[0015]其中，所述计算吸光度变化率的具体方式是以反应时间为横坐标，吸光度为纵坐标作图，求出每1分钟的吸光度变化率。
[0016]第二方面，本专利技术还提供一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定系统，包括：支撑组件、上料组件、温控组件、移动器和紫外分光光度计，所述支撑组件包括底座、转动台和驱动器，所述转动台具有多个放置槽，多个所述放置槽分布在所述转动台四周，所述转动台与所述底座转动连接，并位于所述底座的一侧，所述驱动器设置在所述转动台的一侧，所述上料组件包括支架和多个移液枪，所述支架与所述底座固定连接，并位于所述转动台的一侧，多个所述移液枪滑动设置在所述支架上，并对应多个所述放置槽设置，所述温控组件设置在所述转动台的一侧，所述紫外分光光度计设置在所述底座上，所述移动器设置在所述紫外分光光度计和所述转动台之间。
[0017]其中，所述底座包括底座本体、多个滑块和多个支撑弹簧，多个所述滑块与所述底座本体滑动连接，并分布在所述底座本体四周，多个所述支撑弹簧分别设置在所述底座本体和所述滑块之间，所述转动台具有多个斜块，多个所述斜块分别对应多个所述滑块设置。
[0018]其中，所述驱动器包括驱动电机和驱动轮，所述驱动轮与所述转动台接触，并位于所述转动台的一侧，所述驱动电机的输出端与所述驱动轮固定连接。
[0019]本专利技术的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法及其系统，包括：取低分子量肝素钙溶液100ul加抗凝血酶溶液100ul混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第一混合液；在第一混合液中加FXa溶液200ul,混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第二混合液；在第二混合液中加发色底物溶液500ul，混合，37℃平衡4分钟，得到测试液；用紫外分光光度计，以水为空白，在405nm的波长处，连续测定测试液的吸光度，每隔1分钟记录当前吸光度，共5分钟，计算吸光度变化率；取三羟甲基氨基甲烷
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氯化钠缓冲液与供试品溶液各100ul,代替低分子量肝素钙溶液按上述步骤操作，分别求出吸光度变化率，使得操作更加方便提高工作效率。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0021]图1是本专利技术的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定系统的结构图。
[0022]图2是本专利技术的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定系统的左侧结构图。
[0023]图3是本专利技术的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定系统的剖面示意图。
[0024]图4是图3细节A的局部放大图。
[0025]图5是本专利技术的移液枪和搅拌器的局部结构图。
[0026]图6是本专利技术的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法的结构图。
[0027]1‑
支撑组件、2
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上料组件、3
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温控组件、4
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移动器、5
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紫外分光光度计、11
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底座、12
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转动台、13
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驱动器、14
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计时器、21
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支架、22
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移液枪、23
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搅拌器、24
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导风管、25
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气泵、31
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移动气缸、32
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安装板、33
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加热板、34
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温度传感器、41
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支撑架、42
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升降气缸、43
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水平气缸、44
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抓块、45
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夹块、46
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第二弹簧、111
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底座本体、112
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滑块、113
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支撑弹簧、121
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放置槽、
122
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斜块、131
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驱动电机、132
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驱动轮、231
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法，其特征在于，包括：S101取低分子量肝素钙溶液100ul加抗凝血酶溶液100ul混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第一混合液；S102在第一混合液中加FXa溶液200ul,混匀，在37℃的温度条件下平衡1分钟，得到第二混合液；S103在第二混合液中加发色底物溶液500ul，混合，37℃平衡4分钟，得到测试液；S104用紫外分光光度计，以水为空白，在405nm的波长处，连续测定测试液的吸光度，每隔1分钟记录当前吸光度，共5分钟，计算吸光度变化率；S105取三羟甲基氨基甲烷
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氯化钠缓冲液与供试品溶液各100ul,代替低分子量肝素钙溶液按步骤S101～S104操作，分别求出吸光度变化率。2.如权利要求1所述的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法，其特征在于，所述取低分子量肝素钙溶液100ul加抗凝血酶溶液100ul混匀的过程中不能产生气泡。3.如权利要求2所述的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法，其特征在于，所述发色底物为S
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2765。4.如权利要求3所述的一种低分子量肝素钙注射液抗Xa因子效价测定方法，其特征在于，所述计算吸光度变化率的具体方式是以反应时间为横坐标，吸光度为纵坐标作图，求...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛晓进，李继杰，聂利芳，
申请(专利权)人：江苏大同盟制药有限公司，
类型：发明
国别省市：