一种凝胶交联度的检测方法技术

本发明专利技术公开一种凝胶交联度的检测方法，属于化学分析技术领域。本发明专利技术所述的检测方法，是根据凝胶酸解后的丙三醇浓度来计算凝胶的交联度，包括绘制丙三醇标准工作曲线、测定样品中丙三醇浓度以及计算样品的交联度等三个步骤。本发明专利技术的检测方法，操作简单、稳定有效，且对丙三醇含量检测准确度高，适合生产过程中对凝胶产品交联度的检测。对凝胶产品交联度的检测。

【技术实现步骤摘要】
一种凝胶交联度的检测方法


[0001]本专利技术属于化学分析
，具体涉及一种凝胶交联度的检测方法。

技术介绍

[0002]交联度是指凝胶被交联剂修饰的程度，作为交联凝胶的重要性质参数，交联度从化学结构基础上直接决定凝胶的多种性质，如吸水膨胀性、粘弹性、体内降解速率等。因此探索可靠的交联度测定方法，为研究交联凝胶的制备工艺和保证其应用安全性有着重要意义。目前上市的交联凝胶产品中，多数以丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)或环氧氯丙烷为交联剂，但与此交联剂相关的交联度的检测方法却甚少。杨彪在其论文《BDDE交联透明质酸凝胶交联度的测定》中提到，可以采用SEC色谱分析法对凝胶中BDDE总交联度进行定量，但前提是需要先确定凝胶的酶解产物，检测过程中用到的精密仪器较多，过程繁琐，因此不适合生产过程中对产品质量的快速把控。杜国辉在论文《交联透明质酸的制备、性质及治疗骨关节炎的疗效研究》中以及陆柳伸在其论文《交联透明质酸水凝胶制备技术的研究》中均指出，可以用气相色谱的方法测试计算凝胶酸解后得到的甘油的含量，最终求出交联度，但是，两者均未给出详细的检测方法和计算公式。因此，需要建立一套过程简单，操作性强，结果准确的交联度检测方法。

技术实现思路

[0003]本专利技术提供了一种凝胶交联度的检测方法，是根据凝胶酸解后的丙三醇浓度来计算凝胶的交联度，具体步骤如下：
[0004](1)绘制丙三醇标准工作曲线
[0005]将丙三醇标准品用无水乙醇逐级稀释成不同浓度的系列标准溶液，进气相色谱测定，以丙三醇的峰面积为Y轴，以丙三醇标准溶液的浓度为X轴，绘制丙三醇标准工作曲线；
[0006](2)测定样品中丙三醇浓度
[0007]将凝胶样品酸解，调节pH值为中性，加入无水乙醇溶解，膜过滤，进气相色谱测定，获得样品中丙三醇的峰面积，将丙三醇峰面积代入到丙三醇标准工作曲线中，获得样品中丙三醇的浓度；
[0008](3)计算样品的交联度
[0009]根据样品中丙三醇的浓度计算样品的交联度，计算公式如下：
[0010][0011]在本专利技术中，凝胶样品的交联剂选自丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)或环氧氯丙烷。当交联剂为BDDE时，上述交联度的计算公式中，x＝2；当交联剂为环氧氯丙烷时，上述交联度的计算公式中，x＝1。
[0012]在本专利技术中，凝胶样品选自透明质酸钠凝胶或琼脂糖凝胶。在透明质酸钠凝胶中，
凝胶主成分为透明质酸钠(HA)；在琼脂糖凝胶中，凝胶主成分为琼脂糖。
[0013]当凝胶主成分为透明质酸钠时，
[0014][0015]其中，
[0016]S
HA
：HA凝胶样品中的HA含量，mg/mL；
[0017]m
HA凝胶
：HA凝胶样品的质量，g；
[0018]ρ
HA凝胶
：1.01g/mL；
[0019]当凝胶主成分为琼脂糖时，
[0020][0021]其中，
[0022]S
琼脂糖
：琼脂糖凝胶样品中的琼脂糖含量，mg/g；
[0023]m
琼脂糖凝胶
：琼脂糖凝胶样品的质量，g。
[0024]在上述交联度的计算公式中：
[0025][0026]其中，
[0027]V：加入无水乙醇的总体积，mL；
[0028]C
丙三醇
：凝胶样品中丙三醇的浓度，mg/L。
[0029]在本专利技术中，丙三醇系列标准溶液的浓度可以设置为1mg/L～120mg/L中的系列浓度；例如，可以设置为10mg/L、20mg/L、30mg/L、50mg/L、100mg/L等系列浓度。
[0030]在本专利技术中，气相色谱条件如下：
[0031]色谱柱：毛细管色谱柱；检测器：氢火焰离子化检测器(FID检测器)；检测器温度：250～290℃；柱温：起始温度70～100℃，以每分钟10～30℃升到200～230℃保持5min；进样口：250～270℃；检测器：250～290℃；流速：1～3mL/min；进样量：2μL；尾吹气流速：30mL/min；空气流速：400mL/min；氢气流速：40mL/min；分流比：不分流。
[0032]在上述气相色谱条件中，毛细管色谱柱可以选自DB
‑
FFAP或DB
‑
WAX，其规格选自15～60m
×
0.2～0.32mm
×
0.25～1μm，例如，可以是30m
×
0.32mm
×
0.5μm，即毛细管色谱柱的柱长为30m，内径为0.32mm，固定相涂层液膜厚度为0.5μm。
[0033]在本专利技术中，酸解过程为：在凝胶样品中加入氢溴酸或硫酸，水解12～20h。氢溴酸或硫酸的添加量，以充分酸解凝胶样品为宜。优选地，氢溴酸为40％氢溴酸，硫酸为0.5M硫酸。
[0034]在一个具体的实施方案中，酸解过程为：将1～2g凝胶样品中加入2.5～7mL 40％氢溴酸或0.5M硫酸，水解2～20h，水解温度为室温～100℃。
[0035]在一个具体的实施方案中，凝胶样品中丙三醇浓度的测定过程，具体如下：将1～2g凝胶样品中加入2.5～7mL 40％氢溴酸或0.5M硫酸，水解2～20h，水解温度为室温～100℃；然后用氢氧化钠溶液调节pH至中性，50～60℃加热蒸干，冷却至室温；加入3～6mL无水
乙醇溶解，超声5～15min，在转速5000～10000r/min条件下离心5
‑
15min，过膜后进气相色谱测定，获得样品中丙三醇的峰面积，将丙三醇峰面积代入到丙三醇标准工作曲线中，获得样品中丙三醇的浓度。
[0036]本专利技术的有益效果为：
[0037]本专利技术的检测方法，操作简单、稳定有效，且对丙三醇含量检测准确度高，适合生产过程中对凝胶产品交联度的检测。
具体实施方式
[0038]本专利技术的供试品为交联透明质酸钠凝胶和交联琼脂糖凝胶，其中，交联透明质酸钠凝胶购自爱美客技术发展股份有限公司，1.0mL/支，HA含量为21.41mg/mL，交联剂为BDDE；交联琼脂糖凝胶为青岛琛蓝海洋生物工程有限公司自研产品，琼脂糖含量为2.1mg/g，交联剂为环氧氯丙烷。本专利技术其它所用试剂均可从市售获得。
[0039]本专利技术中所使用的其它术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本专利技术。以下实施例只是为了举例说明本专利技术，而非以任何方式限制本专利技术的范围。
[0040]实施例1
[0041]交联透明质酸钠凝胶交联度的检测，步骤如下：
[0042](1)绘制丙三醇标准工作曲线
[0043]将0.0115g丙三醇标准品置于10mL容量瓶中，用无水乙醇定容，配制成浓度为1150mg/L的标准品储备液。取适量标准品储备液加入无水乙醇，分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种凝胶交联度的检测方法，其特征在于，根据交联凝胶酸解后的丙三醇浓度来计算凝胶的交联度，具体步骤如下：(1)绘制丙三醇标准工作曲线将丙三醇标准品用无水乙醇逐级稀释成不同浓度的系列标准溶液，进气相色谱测定，以丙三醇的峰面积为Y轴，以丙三醇标准溶液的浓度为X轴，绘制丙三醇标准工作曲线；(2)测定样品中丙三醇浓度将凝胶样品酸解，调节pH值为中性，加入无水乙醇溶解，膜过滤，进气相色谱测定，获得样品中丙三醇的峰面积，将丙三醇峰面积代入到丙三醇标准工作曲线中，获得样品中丙三醇的浓度；(3)计算样品的交联度根据样品中丙三醇的浓度计算样品的交联度，计算公式如下：2.根据权利要求1所述的凝胶交联度的检测方法，其特征在于，凝胶样品的交联剂选自丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)或环氧氯丙烷。3.根据权利要求2所述的凝胶交联度的检测方法，其特征在于，当交联剂为BDDE时，上述交联度的计算公式中，x＝2；当交联剂为环氧氯丙烷时，上述交联度的计算公式中，x＝1。4.根据权利要求1所述的凝胶交联度的检测方法，其特征在于，凝胶样品选自透明质酸钠凝胶或琼脂糖凝胶；其中，在透明质酸钠凝胶中，凝胶主成分为透明质酸钠；在琼脂糖凝胶中，凝胶主成分为琼脂糖。5.根据权利要求4所述的凝胶交联度的检测方法，其特征在于：当凝胶主成分为透明质酸钠时，其中，S
HA
：HA凝胶样品中的HA含量，mg/mL；m
HA凝胶
：...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹圣灿，李亚利，王宝群，林莎莎，
申请(专利权)人：青岛琛蓝海洋生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：