一种HPLC检测恶拉戈利中有关物质的方法技术

本发明专利技术属于药物分析化学技术领域，公开了一种HPLC检测恶拉戈利中有关物质的方法。包括配制恶拉戈利及有关物质的系统适用性溶液和供试品溶液，高效液相色谱使用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，流动相A为甲醇与乙腈的混合溶液，流动相B为醋酸盐溶液进行梯度洗脱，得到色谱图，利用面积归一化法确定有关物质的含量。本发明专利技术的一些实例，通过筛选合适的流速和柱温，优化流动相中各组分比例，可以实现恶拉戈利及其有关物质的分离，主峰拖尾因子小且理论塔板数高。该方法专属性强、精密度和准确度均较好，检测结果准确、可靠，能有效对恶拉戈利及其有关物质进行质量控制。拉戈利及其有关物质进行质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种HPLC检测恶拉戈利中有关物质的方法


[0001]本专利技术属于药物分析化学
，具体涉及一种高效液相色谱检测恶拉戈利中有关物质的方法。

技术介绍

[0002]恶拉戈利钠(Elagolix Sodium)是一种新型GnRHR拮抗剂，是目前唯一一款口服促性腺激素释放激素拮抗剂。通过改变垂体的GnRHR抑制水平来影响雌激素的分泌。对于子宫肌瘤和内膜异位症等病症的疗效显著，能有效避免骨质流失等副作用的产生。恶拉戈利钠是十年来首个获FDA批准用于治疗子宫内膜异位症相关的中度至重度疼痛的药物，临床试验数据显示，该药物能有效减小三种最常见的子宫内膜异位症疼痛：每日经期骨盆疼痛、非经期骨盆疼痛和性交疼痛。
[0003]恶拉戈利化学名为：4
‑
[[(1R)
‑2‑
[5
‑
(2
‑
氟
‑3‑
甲氧基苯基)
‑3‑
[[2
‑
氟
‑6‑
(三氟甲基)苯基]甲基]‑
3 ,6
‑
二氢
‑4‑
甲基
‑
2 ,6
‑
二氧杂
‑
1(2H)
‑
嘧啶基]‑1‑
苯乙基]氨基]丁酸，其结构式如下：。
[0004]恶拉戈利主要有关物质有杂质A、杂质B
和杂质C。杂质A、杂质B和杂质C的主体结构与恶拉戈利较为接近，三者的结构更为接近。虽然目前已有恶拉戈利成品的检测方法，但该方法无法有效分离恶拉戈利与杂质C。
[0005]为保证恶拉戈利的纯度与用药安全，需对其有关物质进行检测和监控，为了有效分离恶拉戈利及其杂质，需要开发一种恶拉戈利中有关物质的检测方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于克服现有技术的到少一个不足，提供一种HPLC检测恶拉戈利有关物质的方法。
[0007]本专利技术所采取的技术方案是：一种HPLC检测恶拉戈利中有关物质的方法，所述有关物质为杂质A、杂质B和杂质C
，包括如下步骤：配制恶拉戈利及有关物质的系统适用性溶液；配制恶拉戈利供试品溶液；使用高效液相色谱测定系统适用性溶液及供试品溶液的色谱图，所述高效液相色谱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，流动相A为甲醇与乙腈的混合溶液，其中甲醇与乙腈的体积比为2∶8～4∶6；流动相B为0.01～0.03mol/L的醋酸盐溶液，洗脱程序为梯度洗脱；根据恶拉戈利供试品溶液的高效液相色谱图，利用面积归一化法确定有关物质的含量。
[0008]在一些实例中，所述梯度洗脱时间及流动相A的体积比顺序为：以体积分数计，0min～20min，30%～76%运行；20min～21min，76%～30%运行；21min～30min，30%运行。
[0009]在一些实例中，所述高效液相色谱的流速为0.5～1.3mL/min。
[0010]在一些实例中，所述高效液相色谱的柱温为25～45℃。
[0011]在一些实例中，所述醋酸盐溶液为醋酸钠或醋酸铵的水溶液。
[0012]在一些实例中，所述醋酸盐溶液用冰醋酸调节pH为3～4。
[0013]在一些实例中，所述高效液相色谱的进样量为5～10μL。
[0014]在一些实例中，所述高效液相色谱的紫外检测器波长为270～280nm。
[0015]在一些实例中，所述系统适用性溶液和供试品溶液均采用体积分数为60%～80%的乙腈水溶液进行配制。
[0016]在一些实例中，所述恶拉戈利供试品溶液的浓度为0.8～1.5mg/mL。
[0017]本专利技术的有益效果是：本专利技术的一些实例，通过筛选合适的流速和柱温，优化流动相中各组分比例，可以实现恶拉戈利及其有关物质的分离，主峰拖尾因子小且理论塔板数高。该方法专属性强、精密度和准确度均较好，检测结果准确、可靠，能有效对恶拉戈利及其有关物质进行质量控制。
附图说明
[0018]下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步的说明，其中：图1为本专利技术实施例1中系统适用性溶液的液相色谱图；
图2为本专利技术对比例1中系统适用性溶液的液相色谱图；图3为本专利技术对比例2中杂质C定位溶液的液相色谱图；图4为本专利技术对比例3中系统适用性溶液的液相色谱图；图5为本专利技术对比例4中系统适用性溶液的液相色谱图。
具体实施方式
[0019]一种HPLC检测恶拉戈利中有关物质的方法，所述有关物质为杂质A、杂质B和杂质C，包括如下步骤：配制恶拉戈利及有关物质的系统适用性溶液；配制恶拉戈利供试品溶液；使用高效液相色谱测定系统适用性溶液及供试品溶液的色谱图，所述高效液相色谱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，流动相A为甲醇与乙腈的混合溶液，其中甲醇与乙腈的体积比为2∶8～4∶6；流动相B为0.01～0.03mol/L的醋酸盐溶液，洗脱程序为梯度洗脱；根据恶拉戈利供试品溶液的高效液相色谱图，利用面积归一化法确定有关物质的含量。
[0020]在一些实例中，所述梯度洗脱时间及流动相A的体积比顺序为：以体积分数计，0min～20min，30%～76%运行；20min～21min，76%～30%运行；21min～30min，30%运行。实验
数据表明，在这种梯度洗脱程序下，可以更好地分离恶拉戈利中有关物质。
[0021]在一些实例中，所述高效液相色谱的流速为0.5～1.3mL/min。这一流速下，更有利于恶拉戈利有关物质的分离。
[0022]在一些实例中，所述高效液相色谱的柱温为25～45℃。在这一温度范围下样品溶液稳定，各组分含量均无明显变化。
[0023]在一些实例中，所述醋酸盐溶液为醋酸钠或醋酸铵的水溶液。
[0024]在一些实例中，所述醋酸盐溶液用冰醋酸调节pH为3～4，此pH范围下恶拉戈利样品中各组分均能获得良好的峰形。
[0025]进样量只要可以满足检测需要即可。在一些实例中，所述高效液相色谱的进样量为5～10μL。
[0026]在一些实例中，所述高效液相色谱的紫外检测器波长为270～280nm。
[0027]在一些实例中，所述系统适用性溶液和供试品溶液均采用体积分数为60%～80%的乙腈水溶液进行配制。
[0028]在一些实例中，所述恶拉戈利供试品溶液的浓度为0.8～1.5mg/mL。
[0029]以下将结合实施例对本专利技术的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本专利技术的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本专利技术的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本专利技术的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本专利技术保护的范围。
[0030]方便比较起见，以下实施例和对比例中，如无特别说明，溶解待测样品所采用的溶剂均为体积分数为70%乙腈水溶液。有关物质为杂质A、杂质B、杂质C。
[0031]实施例1：系统适用性试验S1：系统适用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种HPLC检测恶拉戈利中有关物质的方法，所述有关物质为杂质A、杂质B和杂质C，包括如下步骤：配制恶拉戈利及有关物质的系统适用性溶液；配制恶拉戈利供试品溶液；使用高效液相色谱测定系统适用性溶液及供试品溶液的色谱图，所述高效液相色谱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，流动相A为甲醇与乙腈的混合溶液，其中甲醇与乙腈的体积比为2∶8～4∶6；流动相B为0.01～0.03mol/L的醋酸盐溶液，洗脱程序为梯度洗脱；根据恶拉戈利供试品溶液的高效液相色谱图，利用面积归一化法确定有关物质的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述梯度洗脱时间及流动相A的体积比顺序为：以体积分数计，0min～20min，30%～76%运行；20min～21min，76%～30%运行；21min～30min，30%运行。3.根据权利要求1所述的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢倩玲，王标，姜桥，温军贤，陈果，
申请(专利权)人：丽珠集团新北江制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：