一种左金方中吴茱萸指纹图谱的建立方法技术

本发明专利技术公开了一种左金方中吴茱萸指纹图谱的建立方法。该方法采用高效液相色谱法建立，该高效液相色谱条件为，色谱柱为C18色谱柱，规格为2.1

【技术实现步骤摘要】
一种左金方中吴茱萸指纹图谱的建立方法


[0001]本专利技术涉及中药分析检测
，具体涉及一种左金方中吴茱萸指纹图谱的建立方法，采用该方法可对不同产地吴茱萸药材质量进行全面评价。

技术介绍

[0002]左金方出自《丹溪心法》，由黄连、吴茱萸两味药材组成，以疏肝清肝、苦寒的黄连为君药，使肝气畅达且不上冲犯胃，佐以少量性味辛热的吴茱萸，辛开苦降、相反相成。其中，吴茱萸为芸香科植物吴茱萸、石虎或疏毛吴茱萸的干燥近成熟果实，众所周知，吴茱萸药材成分复杂，主要包括生物碱、苦味素、苯并色原酮类、萜类、黄酮、香豆精、木质素、甾类化合物、挥发油和有机酸类。吴茱萸主产于贵州、湖南、重庆、江西、浙江等地，吴茱萸为贵州省著名道地药材和常用苗药，占全国总产量的30％以上。
[0003]中药指纹图谱具有整体、宏观、模糊分析等特点，可通过对中药整体特征描述，采用适当模糊处理方式，达到整体质量控制的目的，因此成为中药质量控制的有效手段，其中色谱指纹图谱分析可以使中药所含多种化学组分的整体特征可视化，从而披露出常规检验难以发现的质量问题。中药色谱指纹图谱作为中草药及其提取物质量控制方法，目前已成为国际共识，为了有效控制不同产地的吴茱萸药材的质量，使其质量控制技术更加完善、科学，申请人对吴茱萸进行了全面系统的指纹图谱研究，建立了吴茱萸的指纹图谱的分析方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于：提供一种左金方中吴茱萸指纹图谱的建立方法，该建立的方法可对不同产地吴茱萸药材质量进行全面评价，从而为控制左金方中吴茱萸药材质量提供依据。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0006]根据本专利技术的一个方面，提供一种左金方中吴茱萸指纹图谱的建立方法，所述方法采用高效液相色谱法建立，该高效液相色谱条件为，
[0007]色谱柱：C18色谱柱，规格为2.1
×
100mm,1.8μm；
[0008]流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.01％三氟乙酸水溶液，采用梯度洗脱，其中流动相比例均为体积百分比：
[0009]0-25min，流动相A为5％-11％，流动相B为95％-89％；
[0010]25-50min，流动相A为11％，流动相B为89％；
[0011]50-60min，流动相A为13％-20％，流动相B为87％-80％；
[0012]60-70min，流动相A为20％-55％，流动相B为80％-45％；
[0013]70-75min，流动相A为55％-90％，流动相B为45％-10％；
[0014]75-80min，流动相A为90％，流动相B为10％；
[0015]流速：0.4ml/min；
[0016]检测波长：300nm；
[0017]进样量：1μl。
[0018]可选地，所述建立方法的具体步骤包括：
[0019]S1，供试品溶液的制备：精密称取各批次的吴茱萸供试品，加入甲醇和盐酸的混合溶液，经超声、放冷、摇匀、滤过处理，取续滤液，得各批次的吴茱萸供试品溶液；
[0020]S2，对照品溶液的制备：精密称取各对照品样品，加入甲醇，得各对照品溶液；
[0021]S3，测定：按所述高效液相色谱条件对各对照品溶液和各批次的吴茱萸供试品溶液进行测定，记录各对照品溶液和各批次吴茱萸供试品溶液的色谱图，将各批次吴茱萸供试品溶液的色谱图导入中药色谱指纹图谱软件进行分析，得到含有共有特征峰的吴茱萸指纹图谱；
[0022]S4，计算出吴茱萸指纹图谱中各共有特征峰的相对保留时间，并指认出各共有特征峰。
[0023]可选地，所述对照品样品包括：去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱。
[0024]可选地，所述吴茱萸指纹图谱的共有特征峰为14个，其中，
[0025]采用各对照品溶液色谱峰比对方法，从14个共有特征峰中指认出，9号峰为去氢吴茱萸碱，10号峰为吴茱萸碱，11号峰为吴茱萸次碱；
[0026]采用质谱分析方法，从14个共有特征峰中指认出，1号峰为3-咖啡酰奎尼酸甲酯、5号峰为4-咖啡酰奎尼酸甲酯，6号峰为绿原酸，7号峰为5-咖啡酰奎尼酸甲酯，12号峰为吴茱萸卡品碱，13号峰为1-甲基-2-[(6Z,9Z)-6,9-十五碳二烯]-二氢卡品碱，14号峰为二氢卡品碱。
[0027]可选地，所述14个共有特征峰的保留时间分别为：1号峰的保留时间为8.534min，2号峰的保留时间为9.975min，3号峰的保留时间为16.617min，4号峰的保留时间为17.733min，5号峰的保留时间为18.259min，6号峰的保留时间为22.833min，7号峰的保留时间为23.965min，8号峰的保留时间为28.277min，9号峰的保留时间为33.170min，10号峰的保留时间为70.221min，11号峰的保留时间为70.635min，12号峰的保留时间为75.497min，13号峰的保留时间为75.900min，14号峰的保留时间为76.517min。
[0028]可选地，所述建立方法的具体步骤进一步包括：采用中药色谱指纹图谱软件，将各批次供试品溶液的色谱图与吴茱萸指纹图谱进行相似度计算，计算出相似度大于0.80。
[0029]可选地，所述中药色谱指纹图谱软件为《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》。
[0030]本专利技术的技术方案是，采用高效液相色谱法建立一种左金方中吴茱萸指纹图谱的分析方法，该分析方法可以客观、全面、准确地对不同产地吴茱萸药材质量进行检测，对控制其质量和保证疗效具有重要意义。
附图说明
[0031]图1为本专利技术的实施例中提供的17批次吴茱萸供试品溶液的色谱图；
[0032]图2为本专利技术的实施例中提供的左金方中吴茱萸的指纹图谱。
具体实施方式
[0033]下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0034]本专利技术的实施例
[0035]实施例中选用的吴茱萸供试品：吴茱萸经鉴定均为芸香科植物吴茱萸的干燥近成熟果实，实施例选用17批吴茱萸供试品，编号为S1～S17，来源信息见表1。
[0036]表1：
[0037]编号产地外观颜色基原编号标号外观颜色基原S1湖南益阳暗黄绿色吴茱萸S10江西吉安褐色吴茱萸S2湖南益阳暗黄绿色吴茱萸S11江西樟树暗黄绿色至褐色吴茱萸S3湖南益阳褐色吴茱萸S12江西樟树暗黄绿色吴茱萸S4湖南益阳暗黄绿色吴茱萸S13江西樟树褐色吴茱萸S5湖南益阳褐色吴茱萸S14江西樟树暗黄绿色至褐色吴茱萸S6江西吉安暗黄绿色吴茱萸S15江西樟树暗黄绿色吴茱萸S7江西吉安暗黄绿色吴茱萸S16江西樟树暗黄绿色吴茱萸S8江西吉安褐色吴茱萸S17江西樟树褐色吴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种左金方中吴茱萸指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述方法采用高效液相色谱法建立，该高效液相色谱条件为，色谱柱：C18色谱柱，规格为2.1
×
100mm,1.8μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.01％三氟乙酸水溶液，采用梯度洗脱，其中流动相比例均为体积百分比：0-25min，流动相A为5％-11％，流动相B为95％-89％；25-50min，流动相A为11％，流动相B为89％；50-60min，流动相A为13％-20％，流动相B为87％-80％；60-70min，流动相A为20％-55％，流动相B为80％-45％；70-75min，流动相A为55％-90％，流动相B为45％-10％；75-80min，流动相A为90％，流动相B为10％；流速：0.4ml/min；检测波长：300nm；进样量：1μl。2.如权利要求1所述的指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述建立方法的具体步骤包括：S1，供试品溶液的制备：精密称取各批次的吴茱萸供试品，加入甲醇和盐酸的混合溶液，经超声、放冷、摇匀、滤过处理，取续滤液，得各批次的吴茱萸供试品溶液；S2，对照品溶液的制备：精密称取各对照品样品，加入甲醇，得各对照品溶液；S3，测定：按所述高效液相色谱条件对各对照品溶液和各批次的吴茱萸供试品溶液进行测定，记录各对照品溶液和各批次吴茱萸供试品溶液的色谱图，将各批次吴茱萸供试品溶液的色谱图导入中药色谱指纹图谱软件进行分析，得到含有共有特征峰的吴茱萸指纹图谱；S4，计算出吴茱萸指纹图谱中各共有特征峰的相对保留时间，并指认出各共有特征峰。3.如权利要求2所述的指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述对照品样品包括：去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳英，郭敏群，魏宏伟，王洪成，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：