克伦特罗含量的量子点免疫分析试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了克伦特罗含量的量子点免疫分析试剂盒及检测方法，属于快速检测免疫分析领域，克伦特罗含量的量子点免疫分析试剂盒，包括ID芯片卡和装配在铝箔袋中的检测卡、干燥剂，所述检测卡由试纸条和塑料夹片组成，所述试纸条包括试纸条支持物、硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜、DNP

【技术实现步骤摘要】
区，所述克伦特罗抗原为原检测线包被抗原，所述克伦特罗抗原固定在硝酸纤维素膜上的“检测线”区，所述量子点荧光标记的克伦特罗单克隆抗体、量子点荧光标记的兔抗DNP多克隆抗体均固定在玻璃纤维素膜上，所述试纸条支持物为PVC板。
[0010]优选的，所述检测卡的制备包括以下步骤：
[0011]一、硝酸纤维素膜的包被：将质控线包被抗原和检测线包被抗原包被到硝酸纤维素膜上，干燥后装入有硅胶干燥剂的铝箔袋内密封，待用；
[0012]二、样品垫的处理：
[0013]S1、样品垫处理液加样：将一整张样品垫放入托盘内，均匀将50mL样品垫处理液加到干净的托盘内，完全浸泡1min；
[0014]S2、转移和干燥：用镊子将加完样的样品垫转移到洁净平坦的纱网上，放入鼓风干燥箱内，将温度控制在37℃，干燥过夜；
[0015]S3、裁切：将滚刀式裁切器裁切用干擦拭布进行擦拭，将样品垫30cm宽的两边边缘切除，边缘切除范围0.5cm
‑
1.0cm，将样品垫裁切成每条宽20mm，长300mm。
[0016]S4、封装：在操作间内相对湿度30％以下的条件下，将处理好的样品垫装入有干燥剂的铝箔袋内密封，待用；
[0017]三、量子点荧光标记探针的喷制：
[0018](1)量子点荧光标记探针偶联；
[0019](2)量子点荧光标记探针的包被：将配好的量子点荧光标记探针溶液均匀喷到处理好的样品垫的指定位置。
[0020](3)干燥：调试好操作间的真空干燥箱，温度25℃，真空度≤
‑/>0.09MPa，干燥过夜。
[0021](4)封装：在操作间内(相对湿度30％以下)，将包被好的量子点荧光标记探针垫装入有干燥剂的铝箔袋内密封；
[0022]四、组板：按生产工艺要求将量子点荧光标记探针垫、吸水纸粘贴在试纸条支持物上；
[0023]五、切条：用切条机将贴好的大板切成3.5
±
0.1mm宽的半成品试纸条；
[0024]六、装配、置袋：将半成品试纸条装配在塑料夹片内，用压壳机压紧得到检测卡，将装配好的检测卡、干燥剂装入铝箔袋，热封机封口，每袋一人份。
[0025]优选的，所述硝酸纤维素膜的包被具备操作步骤如下：
[0026]Ⅰ、将硝酸纤维素膜裁切成300mm长，25mm宽，粘贴到特定型号的试纸条支持物的特定位置上；
[0027]Ⅱ、用质控线缓冲液将质控线包被抗原配制成0.4mg/mL的质控线包被液，用检测线缓冲液将检测线包被抗原配制成0.7mg/mL的检测线包被液；
[0028]Ⅲ、包被：在操作间环境温度为18℃
‑
28℃、相对湿度为45％
‑
65％的条件下，将质控线包被液、检测线包被液分别划到硝酸纤维素膜上；
[0029]Ⅳ、干燥：将包被后的硝酸纤维素膜转入干烤箱干燥，55℃干燥过夜后用铝箔袋包封硝酸纤维素膜，再55℃干燥2天；
[0030]Ⅴ
、封装：在操作间相对湿度30％以下的条件下，将干燥好的硝酸纤维素膜装入有硅胶干燥剂的铝箔袋内密封，待用。
[0031]优选的，所述量子点荧光标记探针偶联具体操作步骤如下：
[0032]a、活化：在离心管上做好标识，用移液枪准确量取生产指令要求的量子点溶液的体积加入离心管中，再加入活化液，活化液的体积(ml)＝5
×
量子点溶液的体积，混匀；放置在超声波清洗机中超声5min；44912g/min 4℃离心15min，弃上清；
[0033]b、偶联：将已活化好的量子点溶液中加入偶联液，加入体积(ml)＝2.66
×
量子点溶液的体积，混匀，放置在超声波清洗机中超声至完全均匀分散；加入标记单抗，标记单抗的体积(ml)＝(0.3483
×
抗体比例
×
量子点溶液的体积)/标记单抗的浓度；加入完毕后，混匀，放置在旋转培养器上4℃反应过夜；
[0034]c、封闭：反应结束后取下离心管加入乙醇胺，加入的体积(ml)＝0.016
×
量子点溶液的体积，混匀，放置在旋转培养器上30℃反应30min；
[0035]d、冲洗：反应结束后，往离心管中补充冲洗液至约量子点溶液体积的10倍，混匀；离心15min，弃上清。
[0036]e、保存：将已冲洗并弃上清的量子点溶液中加少量保存液，然后定容，定容的体积(ml)＝1/3
×
量子点溶液的体积。
[0037]优选的，所述活化液为5mM BS(ph7.2)+0.01％Tween20；所述偶联液为5mM BS(ph8.0)+0.01％Tween20；所述保存液为2.5mM BS(ph8.0)+0.1％BSA。
[0038]本专利技术要解决的另一技术问题是提供克伦特罗含量的量子点免疫分析检测方法，包括以下步骤：
[0039]S1.将试剂盒及待检样本取出，平衡至室温，确认干式荧光免疫分析仪接通电源，开关开启；
[0040]S2.在所述干式荧光免疫分析仪上插入ID芯片卡；
[0041]S3.检查装有检测卡的铝箔袋包装是否完好，若有破损或漏气请勿使用；
[0042]S4.从铝箔袋中取出检测卡，打开后应在30分钟内使用；
[0043]S5.样本准备，所述样本包括需要前处理的样本和直接使用的样本，所述需要前处理的样本包括蛋、饲料、组织、牛奶、奶粉；
[0044]S6.用移液器取60μL的样本加入检测卡的加样孔并在干式荧光免疫分析仪中选择相应样本类型，将检测卡插入干式荧光免疫分析仪，仪器自动扫描检测卡上的二维码信息；
[0045]S7.干式荧光免疫分析仪根据检测卡上的二维码读取产品信息，从而读取检测卡的测试结果；
[0046]S8.测试结束后的检测卡、移液器枪头、废弃检测卡及剩余样本按传染性物品进行处理。
[0047]优选的，所述蛋的处理操作如下：
[0048](1)取1mL样品，加入3mL无水甲醇，混匀；
[0049](2)室温4000g离心3分钟；
[0050](3)取0.1mL上层液，加入0.15mL 0.5X样品稀释液，混匀；
[0051](4)每孔取60μL样品进行检测；
[0052]稀释倍数：10。
[0053]优选的，所述饲料的处理操作如下：
[0054](1)取1g样品，加入5mL无水甲醇，混匀；
[0055](2)室温4000g离心3分钟；
[0056](3)取0.05ml上层液，加入0.95ml 1X样品稀释液，混匀；
[0057](4)每孔取60μL样品进行检测；
[0058]稀释倍数：100。
[0059]优选的，所述组织包括肌肉、肝脏，所述组织的处理操作如下：
[0060](1)取1g样品，加入3mL无水甲醇，混匀；
[0061](2)室温4000g离心3分钟；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.克伦特罗含量的量子点免疫分析试剂盒，其特征在于：包括ID芯片卡和装配在铝箔袋中的检测卡、干燥剂；所述检测卡由试纸条和塑料夹片组成，所述试纸条包括试纸条支持物、硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜、DNP
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BSA 0.4mg/mL、克伦特罗抗原0.7mg/mL、量子点荧光标记的克伦特罗单克隆抗体0.05μg/人份、量子点荧光标记的兔抗DNP多克隆抗体0.01μg/人份；所述DNP
‑
BSA为质控线包被抗原，所述DNP
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BSA固定在硝酸纤维素膜上的“质控线”区，所述克伦特罗抗原为原检测线包被抗原，所述克伦特罗抗原固定在硝酸纤维素膜上的“检测线”区，所述量子点荧光标记的克伦特罗单克隆抗体、量子点荧光标记的兔抗DNP多克隆抗体均固定在玻璃纤维素膜上，所述试纸条支持物为PVC板。2.根据权利要求1所述的克伦特罗含量的量子点免疫分析试剂盒，其特征在于：所述检测卡的制备包括以下步骤：一、硝酸纤维素膜的包被：将质控线包被抗原和检测线包被抗原包被到硝酸纤维素膜上，干燥后装入有硅胶干燥剂的铝箔袋内密封，待用；二、样品垫的处理：S1、样品垫处理液加样：将一整张样品垫放入托盘内，均匀将50mL样品垫处理液加到干净的托盘内，完全浸泡1min；S2、转移和干燥：用镊子将加完样的样品垫转移到洁净平坦的纱网上，放入鼓风干燥箱内，将温度控制在37℃，干燥过夜；S3、裁切：将滚刀式裁切器裁切用干擦拭布进行擦拭，将样品垫30cm宽的两边边缘切除，边缘切除范围0.5cm
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1.0cm，将样品垫裁切成每条宽20mm，长300mm；S4、封装：在操作间内相对湿度30％以下的条件下，将处理好的样品垫装入有干燥剂的铝箔袋内密封，待用；三、量子点荧光标记探针的喷制：(1)量子点荧光标记探针偶联；(2)量子点荧光标记探针的包被：将配好的量子点荧光标记探针溶液均匀喷到处理好的样品垫的指定位置。(3)干燥：调试好操作间的真空干燥箱，温度25℃，真空度≤
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0.09MPa，干燥过夜；(4)封装：在操作间内(相对湿度30％以下)，将包被好的量子点荧光标记探针垫装入有干燥剂的铝箔袋内密封；四、组板：按生产工艺要求将量子点荧光标记探针垫、吸水纸粘贴在试纸条支持物上；五、切条：用切条机将贴好的大板切成3.5
±
0.1mm宽的半成品试纸条；六、装配、置袋：将半成品试纸条装配在塑料夹片内，用压壳机压紧得到检测卡，将装配好的检测卡、干燥剂装入铝箔袋，热封机封口，每袋一人份。3.根据权利要求2所述的克伦特罗含量的量子点免疫分析试剂盒，其特征在于：所述硝酸纤维素膜的包被具备操作步骤如下：Ⅰ、将硝酸纤维素膜裁切成300mm长，25mm宽，粘贴到特定型号的试纸条支持物的特定位置上；Ⅱ、用质控线缓冲液将质控线包被抗原配制成0.4mg/mL的质控线包被液，用检测线缓冲液将检测线包被抗原配制成0.7mg/mL的检测线包被液；
Ⅲ
、包被：在操作间环境温度为18℃
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28℃、相对湿度为45％
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65％的条件下，将质控线包被液、检测线包被液分别划到硝酸纤维素膜上；Ⅳ、干燥：将包被后的硝酸纤维素膜转入干烤箱干燥，55℃干燥过夜后用铝箔袋包封硝酸纤维素膜，再55℃干燥2天；
Ⅴ
、封装：在操作间相对湿度30％以下的条件下，将干燥好的硝酸纤维素膜装入有硅胶干燥剂的铝箔袋内密封，待用。4.根据权利要求2所述的克伦特罗含量的量子点免疫分析试剂盒，其特征在于：所述量子点荧光标记探针偶联具体操作步骤如下：a、活化：在离心管上做好标识，用移液枪准确量取生产指令要求的量子点溶液的体积加入离心管中，再加入活化液，活化液的体积(ml)＝5
×
量子点溶液的体积，混匀；放置在超声波清洗机中超声5min；44912g/min 4℃离心15min，弃上清；b、偶联：将已活化好的量子点溶液中加入偶联液...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓兴朝，陈欢，甘筱静，周海彬，冯瑜盈，
申请(专利权)人：深圳容金科技有限公司，
类型：发明
国别省市：