一种谷甘二肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种谷甘二肽的制备方法，与常规二肽合成方法HOSu/DCC相比，本发明专利技术使用HONB，DIC为试剂制备活化酯，杂质少，纯度高的优势，且制备得到的活化酯Fmoc

【技术实现步骤摘要】
一种谷甘二肽的制备方法


[0001]本专利技术涉及一种谷甘二肽的制备方法，属于药物制备


技术介绍

[0002]司美格鲁肽(Semaglutide)用于治疗成人II型糖尿病。此药是高血糖素样肽(GLP
‑
1)受体激动剂，刺激胰岛素分泌，降低高血糖素分泌，与血白蛋白结合半衰期为1周，故用预充笔每周1次给药，辅助饮食和运动，改善成人II型糖尿病患者的血糖控制。
[0003]司美格鲁肽的多肽序列为：
[0004]His
‑
Aib
‑
Glu
‑
Gly
‑
Thr
‑
Phe
‑
Thr
‑
Ser
‑
Asp
‑
Val
‑
Ser
‑
Ser
‑
Tyr
‑
Leu
‑
Glu
‑
Gly
‑
Gln
‑
Ala
‑
Ala
‑
Lys(AEEA
‑
AEE
‑
γ
‑
Glu
‑
Octadecanedioic mono
‑
t
‑
Butyl ester)
‑
Glu
‑
Phe
‑
Ile
‑
Ala
‑<br/>Trp
‑
Leu
‑
Val
‑
Arg
‑
Gly
‑
Arg
‑
Gly
‑
OH
[0005]其中，由Glu
‑
Gly在该序列中出现两次。在制备过程中，Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
Gly
‑
OH可作为引入该序列的片段。但是，文献中尚未有高纯度制备该二肽的方法。我们采用肽合成中常见的HOSu，DCC方法引入OSu活化酯，然后与甘氨酸缩合，但得到的产物，其纯度较低，经过精制纯化，纯度仍然只有98％，并且收率较低。

技术实现思路

[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种高纯度Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
Gly
‑
OH(谷甘二肽)的制备方法。本专利技术使用HONB，DIC为试剂制备活化酯，杂质少，纯度高的优势，且制备得到的活化酯Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB用甲醇低温打浆，能提高中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB的纯度，特别是除HONB的效果很好。
[0007]本专利技术的第一个目的是提供一种谷甘二肽的制备方法，包括如下步骤：
[0008]S1、以Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
OH为原料，和N
‑
羟基
‑5‑
降冰片稀
‑
2,3
‑
二酰亚胺HONB、N,N
‑
二异丙基碳二亚胺DIC在有机溶剂中反应生成中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯；
[0009]S2、将中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯和甘氨酸，在碱性条件下，在溶剂中缩合反应得到Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
Gly
‑
OH粗品；
[0010]S3、将S2步骤得到的Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
Gly
‑
OH粗品用酯类溶剂和烷基类溶剂的混合溶剂进行重结晶，得到所述的谷甘二肽。
[0011]进一步地，在S1步骤中，还包括采用甲醇对反应生成的中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯进行打浆纯化的步骤，具体包括：将反应液除去80～95％的第一有机溶剂，加入甲醇在15
‑
20℃下搅拌至大量固体析出，继续搅拌1～2h后抽滤，抽滤后依次用甲醇、甲基叔丁基醚淋洗，淋洗后干燥得到中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯。
[0012]进一步地，所述的N
‑
羟基
‑5‑
降冰片稀
‑
2,3
‑
二酰亚胺HONB与Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
OH的摩尔比为1.0～1.5:1。
[0013]进一步地，所述的有机溶剂与Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
OH的体积质量比为5～15:1。
[0014]进一步地，所述的有机溶剂为二氯甲烷。
[0015]进一步地，所述的中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯与甘氨酸的摩尔比为1:1.0～1.5。
[0016]进一步地，在S2步骤中，溶剂为乙腈、四氢呋喃、二氧六环、丙酮中的一种或几种与水形成的混合溶剂。
[0017]进一步地，所述的混合溶剂与中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯的体积质量比为5～10:1。
[0018]进一步地，所述的碱性条件是通过滴加N，N
‑
二异丙基乙胺DIPEA实现。
[0019]进一步地，所述的酯类溶剂和烷基类溶剂的体积比为1:0.5～1。
[0020]进一步地，所述的酯类溶剂为乙酸乙酯或乙酸异丙酯，所述的烷基类溶剂为石油醚或正庚烷。
[0021]本专利技术的有益效果是：
[0022]本专利技术提供一种高纯度Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
Gly
‑
OH(谷甘二肽)的制备方法，与常规二肽合成方法HOSu/DCC相比(参考对比例，纯度98％左右)，本专利技术使用HONB，DIC为试剂制备活化酯，杂质少，纯度高的优势，且制备得到的活化酯Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB用甲醇低温打浆，能提高中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB的纯度，特别是除HONB的效果很好。最终获得的产品纯度达到99.5％以上，手性杂质均在0.1％以下，并且收率较高，达到80％以上。本专利技术方法操作都是简单的常规操作，比如打浆，重结晶等，没有过柱，液相纯化等繁琐操作；本专利技术方法适合工业化放大。
附图说明：
[0023]图1为实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种谷甘二肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、以Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
OH为原料，和N
‑
羟基
‑5‑
降冰片稀
‑
2,3
‑
二酰亚胺HONB、N,N
‑
二异丙基碳二亚胺DIC在有机溶剂中反应生成中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯；S2、将中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯和甘氨酸，在碱性条件下，在溶剂中缩合反应得到Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
Gly
‑
OH粗品；S3、将S2步骤得到的Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
Gly
‑
OH粗品用酯类溶剂和烷基类溶剂的混合溶剂进行重结晶，得到所述的谷甘二肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在S1步骤中，还包括采用甲醇对反应生成的中间体Fmoc
‑
Glu(OtBu)
‑
ONB活性酯进行打浆纯化的步骤，具体包括：将反应液除去80～95％的第一有机溶剂，加入甲醇在15
‑
20℃下搅拌至大量固体析出，继续搅拌1～2h后抽滤，抽滤后依次用甲醇、甲基叔丁基醚淋洗，淋洗后干燥得到中间体Fmo...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄莉，董玉军，徐德银，李介林，徐琦，
申请(专利权)人：苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：