炎症性肠病诊断方法、诊断探针和诊断试剂盒技术

本申请提供了一种针对炎症性肠病的新型确定方法、诊断探针和诊断试剂盒。用于确定是否具有炎症性肠病的方法包括测量从受试者收集的样品中的抗内皮细胞蛋白C受体抗体(抗EPCR抗体)。EPCR抗体)。EPCR抗体)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】炎症性肠病诊断方法、诊断探针和诊断试剂盒


[0001]本申请涉及炎症性肠病的诊断方法、诊断探针和诊断试剂盒。

技术介绍

[0002]炎症性肠病(IBD)，例如溃疡性结肠炎和克罗恩病，是一种引起肠炎症的医学病况。虽然在西方国家IBD已经是一种常见病，在日本该病也已呈上升趋势。患有溃疡性结肠炎的日本患者为17万，每年溃疡性结肠炎新发病例的人数超过1万例，且在日本溃疡性结肠炎发病率以与在西方国家的发病率相当的速度增长。克罗恩病患者的人数超过40,000人，虽然没有溃疡性结肠炎患者多，但比以往任何时候都增加更多。溃疡性结肠炎和克罗恩病都是肠道的慢性炎症，其在相对年轻年龄的人群中发生，是伴有反复复发和缓解的难治性疾病。
[0003]溃疡性结肠炎是存在于大肠中的主要影响粘膜并导致糜烂和溃疡的弥漫性的和非特异性的炎症。已知免疫机制会影响病理状况。临床环境中溃疡性结肠炎的血清标志物是非特异性炎症证据。研究还报告说，在溃疡性结肠炎(NPL 1)中发现了抗中性粒细胞胞浆抗体和抗平滑肌细胞抗体等自身抗体，并且已经积极鉴定了与这些抗体相对应的抗原。然而，每种抗体的阳性率低至50％或更低。
[0004]引文清单
[0005]非专利文献
[0006]NPL 1:Zhou G等人,消化疾病(Digestive Diseases)2016；34(1
‑
2):90
‑7
技术实现思路

[0007]技术问题
[0008]需要能够特异性检测或诊断炎症性肠病的标记物，以及使用这些标记物检测炎症性肠病的方法。
[0009]本专利技术的目的在于提供一种能够特异性确定炎症性肠病的确定方法、诊断探针及诊断试剂盒。
[0010]技术方案
[0011]本申请包括以下各项中描述的主题。
[0012]第1项：用于确定炎症性肠病的方法，包括测量从受试者收集的样品中的抗内皮细胞蛋白C受体抗体(抗EPCR抗体)。
[0013]第2项：根据第1项所述的方法，包括
[0014]使从受试者收集的样品与内皮细胞蛋白C受体(EPCR)接触，
[0015]测量样品中抗内皮细胞蛋白C受体抗体(抗EPCR抗体)的量，以及
[0016]当测量值高于参考值时，确定受试者患有炎症性肠病。
[0017]第3项：根据第1项或第2项所述的方法，其中所述判定包括确定以下各项：
[0018]是否患有炎症性肠病，
[0019]发生炎症性肠病的风险，
[0020]炎症性肠病的严重程度，
[0021]对于炎症性肠病有预防作用，
[0022]对患有炎症性肠病患者的治疗效果，
[0023]炎症性肠病是否再发生，
[0024]炎症性肠病再发生的风险，
[0025]炎症性肠病是否复发，或
[0026]炎症性肠病复发的风险。。
[0027]第4项：如第1项至3中任一项所述的方法，其中，所述样品为血液、血清或血浆。
[0028]第5项：如第1项至4中任一项所述的方法，其中，炎症性肠病为溃疡性结肠炎或克罗恩病。
[0029]第6项：用于炎症性肠病的诊断探针，包含内皮细胞蛋白C受体(EPCR)。
[0030]第7项：用于炎性肠病的诊断试剂盒，包含内皮细胞蛋白C受体(EPCR)。
[0031]本专利技术的有益效果
[0032]本申请使得能够特异性地诊断炎症性肠病。
附图说明
[0033]图1显示了抗EPCR抗体的频率和效价。
[0034]Control：对照；UC：溃疡性结肠炎。
具体实施方式
[0035]1、受试者
[0036]受试者不仅包括患有炎症性肠病的患者，还包括疑似患有炎症性肠病的患者。“疑似患有炎症性肠病的受试者”可以是主观怀疑自己患有炎症性肠病的受试者(不仅限于有主观症状的人，还包括单纯希望接受预防性检查的受试者)，或有客观证据(例如，医师因为已知临床检查(例如心率、血压和血液或尿液检验)确定有患有炎症性肠病的合理可能性的人)/或医疗咨询)的受试者。
[0037]炎症性肠病是引起肠炎症的任何疾病，优选为溃疡性结肠炎或克罗恩病，更优选为溃疡性结肠炎。
[0038]2、样品
[0039]从受试者收集的样品可以是任何样品，例如是诸如血液(全血)、血清、血浆和淋巴液的体液。从检测精度的观点来看，优选血液、血清和血浆。
[0040]3、抗原EPCR
[0041]在提交本申请之前，尚未确定炎症性肠病中自身抗体的疾病特异性抗原，并且该疾病的诊断目前依赖于，例如炎症反应的筛查测试。自身抗体及其抗原的鉴定可用于以下各项：(1)将它们用作临床实践中的诊断探针，(2)诊断和分类疾病，(3)阐明病理状况，以及(4)选择干预目标。
[0042]使用已知的蛋白质鉴定方法，例如蛋白质印迹、二维电泳、质谱或表达文库，很难鉴定膜蛋白自身抗原。然而，专利技术人之前构建了膜蛋白自身抗原鉴定系统(使用逆转录病毒
载体和流式细胞术的自身抗原血清学鉴定系统(serological identification system for autoantigens using a retroviral vector and flow cytometry,“SARF,”)Shirai T等人,临床与发育免疫学(Clin Dev Immunol.)2013；2013:453058.doi:10.1155/2013/453058)。
[0043]在本研究中，专利技术人尝试利用SARF鉴定血管内皮细胞自身抗体的抗原，并将内皮细胞蛋白C受体(EPCR)和清道夫受体B类成员I(SCARBI)鉴定为两种新的血管炎症候群的膜蛋白自身抗原。然后，专利技术人使用EPCR和SCARBI作为检测或诊断探针，测量了患有溃疡性结肠炎的受试者和健康受试者的血清中抗EPCR抗体的量和抗SCARBI抗体的量，令人惊讶地发现患有溃疡性结肠炎的受试者与健康受试者相比，表现出显著增强的抗EPCR抗体活性。
[0044]内皮细胞蛋白C受体(EPCR)是蛋白C的特异性受体，蛋白C是凝血因子之一，并且该蛋白C是跨膜蛋白。人源EPCR具有由SEQ ID NO:1(NP#006395.2)所示的氨基酸序列，并且根据本申请的EPCR可以是具有由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的蛋白质或是具有与SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列基本相同的氨基酸序列的蛋白质。“与SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列基本相同的氨基酸序列”是指与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有至少约90％同一性，优选至少约95％同一性，更优选至少约98％同一性的氨基酸序列。优选地，根据本申请的EPCR是具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的蛋白质。
[0045]根据本专利技术的EPCR还可以是具有通过缺失、添加或取代SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中的例如一个或两个或更多个氨基酸(优选1至10个，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于确定炎症性肠病的方法，包括测量从受试者收集的样品中的抗内皮细胞蛋白C受体抗体(抗EPCR抗体)。2.根据权利要求1所述的方法，包括使收集自所述受试者的所述样品与内皮细胞蛋白C受体(EPCR)接触，测量所述样品中所述抗内皮细胞蛋白C受体抗体(抗EPCR抗体)的量，以及当测量值高于参考值时，判定所述受试者患有炎症性肠病。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述判定包括确定以下各项：是否患有炎症性肠病，发生炎症性肠病的风险，炎症性肠病的严重程度，对于...

【专利技术属性】
技术研发人员：白井刚志，藤井博司，石井智德，张替秀郎，角田洋一，正宗淳，武藤智之，
申请(专利权)人：国立大学法人东北大学，
类型：发明
国别省市：