一种甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用。本发明专利技术提供了甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用，能够延长红细胞的寿命，降低溶血率、抑制红细胞脂质过氧化、保护人红细胞氧化应激时红细胞形态、保护红细胞膜表面阴离子转运体Band3功能、减少红细胞氧化应激中Band3蛋白丢失、降低氧化应激的人红细胞凋亡，增加红细胞存活。本发明专利技术对进一步开发与应用具有临床实际意义与价值。应用具有临床实际意义与价值。应用具有临床实际意义与价值。

【技术实现步骤摘要】
一种甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用


[0001]本专利技术属于医药
，尤其涉及一种甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用。

技术介绍

[0002]红细胞(RBC)输血是一种挽救生命的方法，其主要目的是在大量出血或急性贫血时维持组织和器官氧合，这通常与低血容量有关。血液供应在很大程度上取决于血库招募献血者的能力，另一方面，由于红细胞有限的储存时间更加加剧了血液供应的压力。长期的储存由于红细胞无氧呼吸及自身产生的活性氧导致红细胞氧化损伤造成红细胞一系列储存损伤如：钾、乳酸、血红蛋白血氧饱和度的增加，以及pH、2，3
‑
二磷酸甘油酸(2，3
‑
DPG)和红细胞变形能力的降低。经受储存损伤的红细胞氧合能力下降，可能释放活性氧或趋化因子等有害成分的释放，可能通过粘附内皮表面阻碍循环能力促进验证，另外可能使输血受体产生抗红细胞抗原的异源抗体或自身抗体。
[0003]在人类红细胞的120天生命周期中，红细胞不断暴露于血管系统内运输的氧化物质，并不断与红细胞膜相互作用。作为最早暴露于外部刺激的细胞之一，虽然红细胞具有全面的抗氧化防御系统，但红细胞对氧化损伤大分子的活性氧高度敏感，最终导致衰老和细胞死亡。维持氧化还原稳态是细胞生存所必需的，广泛产生的活性氧常引起细胞骨架蛋白构象的改变和红细胞的溶血。已发现氧化损伤会降低人类红细胞的存活率，增加溶血、脂质过氧化、凋亡，影响红细胞膜阴离子转运体功能，这与Band3蛋白功能密切相关。
[0004]甲基丁香酚(ME)是一种烯丙基烷氧基苯的化学物质，可以通过各种不同的食物来源，包括香料、草药、水果进入饮食，以及作为空气和水中环境背景的一部分，具有抗炎及抗氧化的生物学功能，在促进细胞再生、抗衰老和炎症中具有重要研究价值，最近的一项研究也表明ME具有清除自由基的潜力，但其对人体红细胞的延长寿命的作用未见报道。

技术实现思路

[0005]鉴于上述现有技术存在的缺陷，本专利技术的目的是提出一种甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用。
[0006]本专利技术的目的通过如下技术方案得以实现：
[0007]本专利技术的目的在于，甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用。
[0008]进一步的，所述红细胞为人红细胞。
[0009]本专利技术的突出效果为：
[0010]本专利技术提供了甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用，能够延长红细胞的寿命，降低溶血率、抑制红细胞脂质过氧化、保护人红细胞氧化应激时红细胞形态、保护红细胞膜表面阴离子转运体Band3功能、减少红细胞氧化应激中Band3蛋白丢失、降低氧化应激的人红细胞凋亡，增加红细胞存活。本专利技术对进一步开发与应用具有临床实际意义与价值。
附图说明
[0011]图1为本专利技术对照组(control组)、H2O2氧化应激组(H2O2组)、H2O2氧化应激+DMSO溶剂组(H2O2+DMSO组)、H2O2氧化应激+甲基丁香酚组(H2O2+Me组)的溶血率的测定数据图；
[0012]图2为本专利技术H2O2氧化应激+DMSO溶剂组(H2O2+DMSO组)、H2O2氧化应激+甲基丁香酚组(H2O2+Me组)的人红细胞的脂质过氧化的测定数据图；
[0013]图3为本专利技术对照组(control组)、H2O2氧化应激组(H2O2组)、H2O2氧化应激+DMSO溶剂组(H2O2+DMSO组)、H2O2氧化应激+不同浓度甲基丁香酚组(H2O2+Me组)的光镜图；
[0014]图4为本专利技术H2O2氧化应激+DMSO溶剂组(H2O2+DMSO组)、H2O2氧化应激+甲基丁香酚组(H2O2+Me组)的电镜图；
[0015]图5为本专利技术H2O2氧化应激+DMSO溶剂组(H2O2+DMSO组)、H2O2氧化应激+甲基丁香酚组(H2O2+Me组)的人红细胞膜S042
‑
转运效率的测定数据图；
[0016]图6为本专利技术H2O2氧化应激+DMSO溶剂组(H2O2+DMSO组)、H2O2氧化应激+甲基丁香酚组(H2O2+Me组)的人红细胞膜Band3蛋白含量检测图；
[0017]图7为本专利技术流式细胞仪检测红细胞凋亡率的测定数据图。
具体实施方式
[0018]为了对本专利技术的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现对专利技术的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对专利技术的可实施范围的限定。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
[0019]实施例
[0020]一、实验方法
[0021]1、红细胞制备
[0022]将血液收集在肝素锂抗凝采血管中，用等渗溶液(成分：145mM NaCl、5mM葡萄糖、20mM HEPES(4
‑
(2
‑
羟乙基)
‑
1哌嗪乙磺酸)、pH 7.4、渗透压)洗涤300mOsm)并离心三次(Eppendorf，1000g，5分钟，4℃)以去除血浆和血沉棕黄层。然后将红细胞悬浮至等渗溶液中的3％血细胞比容，使用DMSO或ME，并在37℃的恒温振荡器上在黑暗中轻轻摇动24小时。在取自不同供体或不同日期的同一供体的红细胞中发现了一些活力变化。为了避免因使用不同批次的红细胞而可能引入的任何偏差，总是在给定的红细胞批次内进行比较。
[0023]2、人红细胞大剂量H2O2氧化应激损伤模型构建
[0024]为了测定H2O2的影响，红细胞在有或没有ME的情况下孵育24小时后，在25℃下暴露于1200μM H2O
2 24小时并轻轻摇动。在H2O2处理过程中，ME组仍含有相应浓度的ME。
[0025]3、人红细胞溶血率检测
[0026]在用或不用ME以不同浓度轻轻摇动处理24小时后，每个样品取200μL上清液在415nm处测量光密度以确定溶血。分别在PBS缓冲液和1％Triton X
‑
100中测定零溶血(空白，A0)和100％溶血(阳性对照，Apc)。最后，根据每个样品在415nm波长(At)处的吸光度计算溶血率(Z)，基于以下公式计算溶血率：Z＝At/Apc
×
100％。
[0027]4、脂质过氧化(MDA)检测
[0028]根据制造商的说明，通过脂质过氧化MDA检测试剂盒检测丙二醛(MDA)水平。在洗
涤红细胞并将红细胞悬浮在3％血细胞比容后，将红细胞与2μM ME在37℃下孵育24小时，轻轻摇动并在黑暗中。MDA以μmol/L为单位确定红细胞中脂质过氧化的程度，使用酶标仪检测硫代巴比妥酸(TBA)和MDA发生反应而形成的粉红色复合物在532nm的吸光度。
[0029]5、人红细胞血涂片制作及光镜观察
[0030]用ME(0.1μM或1μM或2μM或5μM或10μM或50μM或100μM或500μM或1000μM ME)和H2O2(300μM，30分钟)处理后，10μL红细胞悬液(3％红细胞压积)以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.甲基丁香酚在延长红细胞寿命中的应用。2.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫念樵，张佳思，
申请(专利权)人：宫念樵，
类型：发明
国别省市：