抗人PlGF鼠源单克隆抗体及应用制造技术

本发明专利技术公开了抗人PlGF鼠源单克隆抗体，单克隆抗体为Pl

【技术实现步骤摘要】
抗人PlGF鼠源单克隆抗体及应用


[0001]本专利技术属于抗体的制备及序列测定领域，具体涉及抗人PlGF鼠源单克隆抗体及应用。

技术介绍

[0002]子痫前期是一种常见的产科疾病，约影响2%
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8%的妊娠女性，在我国的发病率约为9.4%。是一种多系统进展性疾病，其主要特征是在人生后半期或产后新发高血压和蛋白尿，或者表现为新发高血压和显著的终末器官功能障碍，伴有或不伴有蛋白尿。此疾病的主要病因为胎盘及母体血管功能障碍，分娩后会消退,但消退时间不确定。
[0003]胎盘生长因子(Placental growth factor,PlGF)是妊娠期重要的细胞因子，在胎儿胎盘循环过程中发挥着促进血管生成的重要作用。目前研究表明妊娠期女性血液中PlGF浓度水平的下降发生时间要早于子痫前期临床症状的发生，是较理想的子痫前期发生预测指标。正常情况下，PlGF在胎盘和母体血液中呈现高表达量，且伴随妊娠期浓度水平逐渐上升。妊娠期前三个月PlGF浓度较低，从第11
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12周开始增加，并且在第30周达到峰值，之后快速下降。而在子痫前期患者中，母体血清PlGF水平低于正常妊娠女性；且子痫前期病情发展程度与PlGF水平表现出相关性。Levine等研究表明PlGF浓度的降低比高血压和蛋白尿病症的出现要早9
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11周，同时可溶性类fms酪氨酸激酶
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1（sFLT
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1）浓度水平升高，sFLT
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1/PlGF值可评估子痫前期和妊娠结局。综上，对PlGF浓度水平的监控，有利于子痫前期的临床预防和治疗，可减少不良妊娠结局的发生。
[0004]而对临床血液样本中PlGF浓度水平的检测可基于于免疫学方法，比如在化学发光平台，借助于两株高特异性和亲和力的抗体对PlGF蛋白进行夹心法测定。目前国内外对针对PlGF蛋白的优质单克隆抗体具有较大的需求。

技术实现思路

[0005]为解决市场上对抗体原料的需求问题，本专利技术提供了抗人PlGF鼠源单克隆抗体，可填补相应的原料需求，促进相应检测的完善，有利于子痫前期的预防和治疗，提高生育质量。
[0006]同时提供检测人PlGF检测试剂盒，该试剂盒基于磁微粒化学发光法，结合市场上现有发光检测仪器，可实现操作方便、结果准确。
[0007]本专利技术提供如下技术方案：抗人PlGF鼠源单克隆抗体，所述单克隆抗体为Pl
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Ab1，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或，所述单克隆抗体为Pl
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Ab2，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
[0008]抗人PlGF鼠源单克隆抗体在制备子痫前期辅助检测诊断试剂中的应用。
[0009]抗人PlGF鼠源单克隆抗体用于体外诊断检测试剂盒。
[0010]检测人PlGF的检测试剂盒，为磁微粒化学发光法检测试剂盒，使用Pl
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Ab1和Pl
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Ab2作为包被和检测抗体。
[0011]Pl
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Ab1重链可变区序列：GluValGlnLeuGlnGluSerGlyProGlyLeuValLysProSerGlnSerLeuSerLeuThrCysThrValThrGlyTyrSerIleThrSerAspTyrAlaTrpAsnTrpIleArgGlnLeuProGlyAsnLysLeuGluTrpMetGlyTyrIleSerTyrSerGlySerThrSerTyrAsnProSerLeuLysSerArgIleSerIleThrArgAspThrSerLysAsnGlnPhePheLeuGlnLeuAsnSerValThrThrGluAspThrAlaThrTyrTyrCysAlaArgArgGlyGlyIleTyrTyrTyrPheAspTyrTrpGlyGlnGlyThrProLeuThrValSerSerPl
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Ab1 轻链可变区序列：AspIleGluLeuThrGlnSerProAlaSerLeuAlaValSerLeuGlyGlnArgAlaThrIleSerCysArgAlaSerGluSerValAspSerTyrGlyAsnSerPheMetHisTrpTyrGlnGlnLysProGlyGlnProProLysLeuLeuIleTyrLeuAlaSerAsnLeuGluSerGlyValProAlaArgPheSerGlySerGlySerArgThrAspPheThrLeuThrIleAspProValGluAlaAspAspAlaAlaThrTyrTyrCysGlnGlnAsnAsnGluAspProTyrThrPheGlyGlyGlyThrLysLeuGluIleLysPl
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Ab2 重链可变区序列：GluValGlnLeuValGluSerGlyGlyGlyLeuValGlnProLysGlySerLeuLysLeuSerCysAlaAlaSerGlyPheThrPheAsnThrTyrAlaMetAsnTrpValArgGlnAlaProGlyLysGlyLeuGluTrpValAlaArgIleArgSerLysSerAsnAsnTyrAlaThrTyrTyrAlaAspSerValLysAspArgPheThrIleSerArgAspAspSerGlnSerIleLeuTyrLeuGlnMetAsnAsnLeuLysThrGluAspThrValMetTyrTyrCysValArgHisAspTyrTyrGlySerSerTyrPheAspTyrTrpGlyGlnGlyThrThrLeuThrValSerSerPl
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Ab2 轻链可变区序列：AspIleGlnLeuThrGlnProProSerTyrLeuAlaAlaSerProGlyGluThrIleThrIleAsnCysArgAlaSerLysSerIleSerLysTyrLeuAlaTrpTyrGlnGluLysProGlyLysThrAsnLysLeuLeuIleTyrSerGlySerThrLeuGlnSerGlyIleProSerArgPheSerGlySerGlySerGlyThrAspPheThrLeuThrIleSerSerLeuGluProGluAspPheAlaMetTyrTyrCysGlnGlnHisAsnGluTyrProTyrThrPheGlyGlyGlyThrLysLeuGluIleLys采用重组表达基因工程技术在生物反应器中表达目的蛋白，并将表达产物纯化；使用目标蛋白免疫小鼠，并利用杂交瘤融合技术构建和筛选分泌针对目标蛋白PlGF抗体的细胞株，经多次亚克隆后筛选得到高亲和力和特异性的单克隆抗体配对组合；同时本专利技术基于上述两株单克隆抗体，提供了一种磁珠化学发光法检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗人PlGF鼠源单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体为Pl
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Ab1，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或，所述单克隆抗体为Pl
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Ab2，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。2.权利要求1所述的抗人PlGF鼠源单克隆抗体在制备子痫前期辅助检测诊断试剂中...

【专利技术属性】
技术研发人员：芮兵，
申请(专利权)人：南京佰抗生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：