本发明专利技术公开了一种基于COFs材料结合薄层色谱增强DART
【技术实现步骤摘要】
基于COFs材料结合薄层色谱增强DART
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LTQ MS检测中药成分灵敏度的方法
[0001]本专利技术涉及一种基于COFs材料结合薄层色谱增强DART
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LTQ MS检测中药成分灵敏度的方法，属于分析化学检测领域。
技术介绍
[0002]几个世纪以来，中药材在发展传统和现代药物疗法方面发挥了重要作用。从天然来源中分离出的化学物质已经成为新化学物质的来源，并引导了一些非常著名的药物产生。对于中药材中可产生一定功效的有效成份的定性，定量检测，已经进入了相当深入的研究。液相色谱
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质谱(LC
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MS)和气相色谱
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质谱(GC
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MS)由于强大的分离效率和灵敏的检测，成为了中草药研究领域中流行且有效的分析工具，但它们的检测方法涉及多个样品的制备步骤(提取、衍生、过滤等)，每次分析需要十几分钟，甚至几个小时。在本专利技术中将用DART
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LTQ MS来对中药材有效成分进行实时检测。DART
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MS分析技术只需要较少时间的样品制备，允许在大气压条件下取样，并在样品引入后几秒内便可提供分析数据，具有原位，快速，简便的优点。
[0003]本专利技术使用的LTQ线性离子阱质谱仪是属于分析仪器中的基础有机质谱仪，为大多分析实验室所有，但其与DART离子源联用时，因其分辨率及灵敏度较低，会影响分析样品的出峰结果，同时DART
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LTQ MS对于中药材提取物的检测，其提取物中非有效成分会对试验具有一定干扰性，影响检测结果。
[0004]薄层色谱法(TLC)是检测天然产物质量标记物的一种简单而经典的方法，它可以通过不同的展开剂将中药材中的有效成分进行分离，有助于中药材提取物中非有效成分对于DART
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LTQ MS的干扰。
[0005]共价有机框架(COFs)是一类具有周期性明确结构的多孔结晶聚合物，由有机建筑单元的共价键合形成。COFs具有孔隙有序、化学稳定性好、易改性、比表面积高、p
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p共轭堆积丰富等优点，COF既能作吸附剂又是能量传递介质。本专利技术中的COFs材料，具有独特N＝N和C＝O双活性位点的共价有机骨架，其具有丰富的活性位点、大的共轭结构、高的比表面积，以及较高的结构稳定性和良好的能量传递性能，对于结合薄层色谱辅助DART
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LTQ MS检测中药材有效成分，可起到增强灵敏度，抗其它化学成分以及背景干扰的作用。
技术实现思路
[0006]本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种基于COFs材料结合薄层色谱增强DART
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LTQ MS检测中药材有效成分灵敏度的方法。
[0007]技术方案是：一种基于COFs材料结合薄层色谱增强DART
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LTQ MS检测中药材有效成分灵敏度的方法，包括如下步骤：
[0008](1)COFs材料的合成：四硫富瓦烯(8.0mmoL，1.64g)、4
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溴苯甲醛(40.0mmoL，7.4g)、Pd(OAc)2(2.0mmoL，0.45g)、PtBu3HBF4(4.4mmoL，1.74g)和CsCO3(14.7mmoL，9.6g)的
四氢呋喃(80.0mL)混合物经冷冻泵
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解冻循环脱气，氩气净化，回流48小时。混合物用氯仿提取，结合的有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥，在减压下浓缩。以二氯甲烷为洗脱剂，硅胶层析纯化残渣，得到TFP
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TTF(2.2g，40％)为红黑固体。将4,4'
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偶氮二苯胺(0.04mmoL，8.5mg)和TFP
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TTF(0.02mmoL，14.7mg)重量放入耐热玻璃管中(体积约20.0mL，体长18.0cm，颈长9.0cm)。然后加入1,4
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二恶烷1mL和乙酸水溶液(6.0mol/L，0.1mL)的混合物。耐热玻璃管在液氮浴中被迅速冷冻，并被疏散到约19.0mbar的内部压力，然后火焰密封，总长度减少约10.0cm。加热到室温后，将试管放入120℃的烤箱中5天。经离心分离得到淡棕色粉末，用丙酮(3
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5.0mL)洗涤，得率约为81％。
[0009](2)中药材有效成分的超声提取：将中药材饮片粉粹，过40目筛后，按每毫升甲醇，50mg药材粉末的比例，在室温下超声提取10min。最后提取液在10000rpm离心2min，取上清液。
[0010](3)中药材有效成分薄层色谱分离：将中药材提取物干燥品配置为1.0mg/mL甲醇溶液，同时配置中药材有效成分标准品为1.0mg/mL甲醇溶液。吸取上述溶液各2μL，分别点于同一TLC Silica gel 60F254薄层板上，以相应的展开剂进行展开。
[0011](4)取COFs材料10mg溶于1mL丙酮中，吸取2μL滴加在TLC板与标准品展开斑点相应的薄层斑点上，用TLC板用刀片切成1.5cm长，以备DART
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LTQ MS检测。
[0012](5)DART
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LTQ MS/MS检测：采用DART源与LTQ线性离子阱质谱仪在正离子模式或负离子模式下进行检测，输入气压调节为0.5MPa，载气为氦气或氮气，气体温度为250
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550℃，DART的栅电极设置为3kV，毛细管电压为42V(正离子模式)或32V(负离子模式)，毛细管温度为320℃，管透镜电压为240V(正离子模式)或
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100V(负离子模式)，一级质谱扫描质量数范围为50
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2000amu，二级质谱子离子扫描质量数范围为50
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1500amu，碰撞能量设置为10
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60eV。
[0013]所述载气优选为氮气。
[0014]所述气体温度优选为400℃
[0015]本专利技术有效性的验证采用DART离子源与LTQ线性离子阱质谱仪在正离子模式或负离子模式下对中药材提取物溶液以及滴加COFs材料的薄层色谱有效成分斑点进行检测，对所获得的有效成分特征峰强弱，及其它非有效成分化合物的离子峰数量进行比较。
[0016]所述为防止中药材有效成分一级谱图特征峰出现假阳性结果，采用有效成分标准品进行对照。
[0017]有益效果：本专利技术采用DART
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LTQ MS技术手段，对中药材有效成分进行定性检测，减少了样品前处理时间，可原位，快速检测，同时使用COFs材料结合薄层色谱辅助检测，增强了DART
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LTQ MS的检测灵敏度，对于中药材非有效成分起到了抗干扰的效果。
附图说明
[0018]图1为COFs材料的整体构型。
[0019]图2为COFs材料的电镜图。
[0020]图3为中药材何首乌有效成分大黄素的二级谱图。
[0021]图4为中药材本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于COFs材料结合薄层色谱增强DART
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LTQ MS检测中药材有效成分灵敏度的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)COFs材料的合成：8.0mmoL的四硫富瓦烯、40.0mmoL的4
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溴苯甲醛、2.0mmoL的Pd(OAc)2、4.4mmoL的PtBu3HBF4和14.7mmoL的CsCO3的四氢呋喃(80.0mL)混合物经冷冻泵
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解冻循环脱气，氩气净化，回流48小时，混合物用氯仿提取，结合的有机层用盐水洗涤，在无水Na2SO4上干燥，在减压下浓缩，以二氯甲烷为洗脱剂，硅胶层析纯化残渣，得到TFP
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TTF为红黑固体，将4,4'
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偶氮二苯胺8.5mg和TFP
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TTF 14.7mg放入耐热玻璃管中，然后加入1，4
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二恶烷1mL和乙酸水溶液0.1mL，耐热玻璃管在液氮浴中被迅速冷冻，并被疏散到约19.0mbar的内部压力，然后火焰密封，总长度减少约10.0cm，加热到室温后，将试管放入120℃的烤箱中5天，经离心分离得到淡棕色粉末，用丙酮洗涤，得率约为81％；(2)中药材有效成分的超声提取：将中药材饮片粉粹，过40目筛后，按每毫升甲醇，50mg药材粉末的比例，在室温下超声提取10min，最后提取液在10000rpm离心2min，取上清液；(3)中药材有效成分薄层色谱分离：将中药材提取物干燥品配置为1.0mg/mL甲醇溶液，同时配置中药材有效成分标准品为1.0mg/mL甲醇溶液，吸取上述溶液各2μL，分别点于同一TLC Silica gel 60F254薄层板上，以相应的展开剂进行展开；(4)取COFs材料10mg溶于1mL丙酮中，吸取2μL滴加在TLC板与标准品展开斑点相应的薄层斑点上，用TLC板用刀片切成1.5cm长，以备DART
【专利技术属性】
技术研发人员：苏蕊，刘淑莹，刘鑫，
申请(专利权)人：长春中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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