异功散HPLC特征图谱的构建方法及其HPLC标准指纹图谱和应用技术

本发明专利技术提出一种异功散HPLC特征图谱的构建方法及其HPLC标准指纹图谱和应用，属于药物检测技术领域，特征图谱的构建方法，其特征在于，包括下列步骤：步骤S1：供试品溶液、参照物溶液的制备；步骤S2：分别对供试品溶液和参照物溶液进行高效液相色谱检测，获得异功散HPLC特征图谱，所述高效液相色谱检测中的检测波长为201~205nm范围内，该构建方法能够同时检出异功散中全部药材成分，通过该构建方法获得异功散HPLC标准指纹图谱，具有色谱峰分布均匀、稳定性良好等特点。稳定性良好等特点。稳定性良好等特点。

【技术实现步骤摘要】
异功散HPLC特征图谱的构建方法及其HPLC标准指纹图谱和应用


[0001]本专利技术涉及药物检测技术，尤其涉及一种异功散HPLC特征图谱的构建方法及其HPLC标准指纹图谱和应用。

技术介绍

[0002]异功散是临床常用方剂，别名五味异功散，异功散配方出自宋代钱乙的《小儿药证直诀》，由人参、茯苓、白术、陈皮和甘草各等分含量组成，功效有健脾、益气、和胃，主治脾胃虚弱，不思饮食或呕吐等症状，目前临床上还用于治疗慢性贫血病，例如慢性感染性疾病、慢性炎症性疾病、肺感染性疾病及衰老引起的贫血，非感染性疾病包括肿瘤、慢性肾病、心脑血管、心衰等症状，由此可见异功散临床应用范围较广。
[0003]中药材多为植物的干燥器官，由于复杂的自然环境等原因，造成了中药材在应用方面的复杂性，同一名称的中药材可能来自不同基源的植物，而中药材由于产地不同、采收季节和生长年限不同而存在差别，市场上一些名贵药材经常见到伪品与正品相混淆，由于各种因素的存在，最终必然会影响中医的临床疗效和中药的研究数据，进而影响其应用和进一步的加工生产。现有技术中，仅对异功散的临床应用等发面进行分析，如公布号为CN108066458的专利技术专利，公开异功散在治疗慢性病贫血、感染或炎症性疾病引起的脾肿大及线粒体损伤药物中的应用，并未对异功散的品质检测进行研究开发，因此有必要对异功散中药材进行特征图谱分析，建立异功散中药高效液相特征图谱，并研究出较佳的特征图谱构建方法，以符合现代中医学所要求的科学性和全面性。

技术实现思路

[0004]针对上述问题，本专利技术提出一种异功散HPLC特征图谱的构建方法及其HPLC标准指纹图谱和应用。
[0005]本专利技术提出一种异功散HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括下列步骤：
[0006]步骤S1：供试品溶液的制备：
[0007]取异功散药品，研细，以70％甲醇提取，制备供试品溶液；
[0008]参照物溶液的制备：
[0009]取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成参照物溶液；
[0010]步骤S2：分别对供试品溶液和参照物溶液进行高效液相色谱检测，获得异功散HPLC特征图谱，所述高效液相色谱检测中的检测波长为201nm～205nm。
[0011]进一步的，高效液相色谱检测是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以磷酸水溶液为流动相B。
[0012]进一步的，磷酸水溶液浓度为0.04wt％～0.06wt％。
[0013]进一步的，高效液相色谱检测的洗脱方式为梯度洗脱；
[0014]梯度洗脱的洗脱条件为：
[0015]0～10min，17％
→
30％流动相A，83％
→
70％流动相B；
[0016]10～26min，30％
→
36％流动相A，70％
→
64％流动相B；
[0017]26～45min，36％
→
39％流动相A，64％
→
61％流动相B；
[0018]45～46min，39％
→
80％流动相A，61％
→
20％流动相B；
[0019]46～49min，80％流动相A，20％流动相B；
[0020]49～50min，80％
→
17％流动相A，20％
→
83％流动相B；
[0021]50～60min，17％流动相A，83％流动相B。
[0022]进一步的，步骤S1中供试品溶液是取异功散药品，研细后精密称定，加入70％甲醇，然后进行超声处理15min，放冷后用70％甲醇定容制得。
[0023]进一步的，超声处理的功率为250W、频率为40kHz。
[0024]进一步的，步骤S1中，异功散药品与供试品溶液的重量体积比为1mg：10mL；参照物溶液中橙皮苷的含量为40μg
·
mL
‑1。
[0025]本专利技术还提出利用上述构建方法获得的异功散的HPLC标准指纹图谱，所得HPLC标准指纹图谱包括8个特征峰，以5号峰为参照峰，其共有特征峰的相对保留时间分别为：
[0026]1号峰：0.560～0.619，2号峰：0.779～0.861，3号峰：0.826～0.913，4号峰：0.874～0.966，5号峰：0.950～1.050，6号峰：1.197～1.323，7号峰：1.548～1.711，8号峰：2.935～3.244；3号峰为甘草苷，5号峰为橙皮苷，8号峰为甘草酸。
[0027]本专利技术还提出上述HPLC标准指纹图谱在异功散的研究/开发/生产/临床应用全过程质量评价或控制中的应用。
[0028]本专利技术的异功散HPLC特征图谱的构建方法及其HPLC标准指纹图谱和应用的有益效果为：
[0029]1.本专利技术的异功散HPLC特征图谱的构建方法，能够同时检出异功散中全部药材成分。
[0030]2.本专利技术中异功散HPLC特征图谱的构建方法检测波长为201～205nm，经过对波长范围为190～400nm范围内不同波长的检测结果比对分析可知，该波长范围内获得的特征图谱各色谱峰的响应值适中，峰信息量大，基线平稳，优于其他检测波长。
[0031]3.通过本专利技术的洗脱体系和流动相获得的特征图谱，各色谱峰分离度较好，且色谱峰分布较均匀；另外，若以甲醇为提取溶媒时，甘草酸等色谱峰峰型较差，以50％甲醇为溶媒时，50％甲醇过滤困难，而以70％甲醇作为提取溶媒时，各色谱峰的峰型均较好。
[0032]4.本专利技术的异功散HPLC特征图谱的构建方法所获得的色谱图，各同一共有峰之间相对保留时间的相对标准偏差均小于2.0％，通过选择合适的色谱柱、流速等工艺条件，有效优化了分离条件，提高了异功散颗粒高效液相特征图谱的出峰稳定性，由此可见本专利技术特征图谱稳定性良好。
[0033]5.本专利技术的异功散HPLC特征图谱的构建方法还具有专属性，且其精密度、重复性等均符合规定，可用于异功散颗粒特征图谱的定性鉴别。
[0034]6.利用本专利技术所获得的异功散的HPLC标准指纹图谱中共有特征峰的有无及特征，可以全面监控异功散药品的质量，通过特征图谱相似程度的比较，评价异功散散的优劣、考察稳定性和一致性，填补了现行质量控制方法的空白，同时还帮助监控异功散生产工艺的稳定性，保证其质量的稳定、均一、可控。
附图说明
[0035]下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。
[0036]图1是本专利技术实施例1中在203nm波长条件下异功散供试品溶液的特征图谱。
[0037]图2是本专利技术实施例2中在191nm波长条件下异功散的特征图谱。
[0038]图3是本专利技术实施例3中在220nm波长条件下异功散的特征图谱。
[0039]图4是本专利技术实施例4中在240nm波长条件下异功散的特征图谱。
[0040]图5是本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种异功散HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括下列步骤：步骤S1：供试品溶液的制备：取异功散药品，研细，以70％甲醇提取，制备供试品溶液；参照物溶液的制备：取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成参照物溶液；步骤S2：分别对供试品溶液和参照物溶液进行高效液相色谱检测，获得异功散HPLC特征图谱，所述高效液相色谱检测中的检测波长为201nm～205nm。2.根据权利要求1所述的异功散HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以磷酸水溶液为流动相B。3.根据权利要求2所述的异功散HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述磷酸水溶液浓度为0.04wt％～0.06wt％。4.根据权利要求2所述的异功散HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的洗脱方式为梯度洗脱；所述梯度洗脱的洗脱条件为：0～10min，17％
→
30％流动相A，83％
→
70％流动相B；10～26min，30％
→
36％流动相A，70％
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64％流动相B；26～45min，36％
→
39％流动相A，64％
→
61％流动相B；45～46min，39％
→
80％流动相A，61％
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20％流动相B；46～49min，80％流动相A，20％流动相B；49～50min，80％
→
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【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓阳，刘博男，郭勇，李寅庆，李丹，邹妍，赵淑欣，宗梁，侯金才，
申请(专利权)人：京津冀联创药物研究北京有限公司河北神威药业有限公司，
类型：发明
国别省市：