LincR-0003及其作为辐射损伤早期诊断的分子标志物的用途制造技术

技术编号:32772018 阅读:33 留言:0更新日期:2022-03-23 19:27
本发明专利技术属于生物检测技术领域,涉及LincR

【技术实现步骤摘要】
LincR

0003及其作为辐射损伤早期诊断的分子标志物的用途


[0001]本专利技术属于生物检测
,涉及LincR

0003及其作为辐射损伤早期诊断的分子标志物的用途。

技术介绍

[0002]目前放射工作人员的健康监护主要是健康体检、健康风险评估和疾病防治等。日常健康体检主要采用常规的临床检查,特殊健康体检包括染色体畸变和微核分析。但它们涉及的指标不能有效地对辐射所致疾病的发生做到早发现。
[0003]利用分子生物学相关技术获得的分子指标可补充并完善体检手段,对疾病做到早诊断、早治疗。因此,为完善现有健康监护体系,避免或减少辐射危害的潜在风险,亟需建立放射工作人员的早期健康监护技术,从而为放射工作人员的岗位适应性判断提供技术支撑与管理依据。
[0004]LincRNA参与了细胞增殖分化以及凋亡的调控,在辐射诱导的机体损伤中起着重要的作用。
[0005]LincR

0003位于人类5号染色体上,参与前额皮质的发育,但LincR

0003与电离辐射暴露之间的相关研究,在国内外未见报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的首要目的是提供一种RNA,以能够针对其便捷、准确、定量的进行辐射暴露诊断。
[0007]为实现此目的,在基础的实施方案中,本专利技术提供一种RNA,所述的RNA为LincR

0003,其序列如SEQ ID NO.1所示。
[0008]本专利技术的第二个目的是提供LincR

0003作为辐射损伤早期诊断的分子标志物的用途,以能够便捷、准确、定量的进行辐射暴露诊断。
[0009]为实现此目的,在基础的实施方案中,本专利技术提供LincR

0003作为辐射损伤早期诊断的分子标志物的用途(即LincR

0003作为分子标志物用于制备辐射损伤早期诊断的试剂盒的用途)。
[0010]在一种优选的实施方案中,本专利技术提供LincR

0003作为辐射损伤早期诊断的分子标志物的用途,其中所述的辐射损伤为局部或全身的组织器官不良反应(如恶心、呕吐、食欲减退、白细胞下降和/或皮肤发红变痒等)。
[0011]本专利技术的有益效果在于,利用本专利技术的LincR

0003作为辐射损伤早期诊断的分子标志物的用途,能够便捷、准确、定量的进行辐射暴露诊断。
具体实施方式
[0012]通过如下的实施例对本专利技术的实施作进一步说明,但本专利技术的实施方式并不局限于如下的实施例。
[0013]实施例1:
[0014]1、利用lincRNA芯片技术初步筛选辐射敏感的分子标志物
[0015]1)细胞总RNA的提取、定量及质检
[0016]将人外周静脉血经0.2Gyγ射线照射(同时设有未照射的对照组),照射后6h,采用外周血RNA提取试剂盒(天根生化科技有限公司)提取RNA,RNA样品经Nanodrop进行质检定量(OD260/280:1.80

1.88,总量:2181.80

3558.80ng)。
[0017]2)芯片检测
[0018]从总RNA中移除rRNA后,使用随机引物方法将每个样品放大并转录成带荧光的cRNA;使用RNeasy试剂盒(德国Qiagen公司)纯化标记的cRNAs,并检测其浓度;芯片杂交、洗涤、固定并扫描杂交芯片读值,得到原始数据。
[0019]3)数据分析
[0020]使用GeneSpring GX v12.1软件对原始数据进行Quantile标准化和随后的数据处理。两组样品间具有统计学意义的差异表达LincRNA通过P

value/FDR筛选。设定阈值为1.5倍差异,p值≤0.05来筛选差异表达的LincRNA,差异倍数正值表示上调,负值表示下调。
[0021]通过分析可见,与对照组相比,0.2Gyγ射线照射后,LincR

0003分子表达上调2.988倍,p值为0.018。
[0022]2、PCR验证确认LincR

0003作为分子标志物用于辐射损伤早期诊断的可行性
[0023]外周血RNA提取试剂盒(天根生化科技有限公司)提取RNA。按逆转录试剂盒(天根生化科技有限公司)说明书反转录cDNA,取适量辐射照射组和对照组样本cDNA,对LincR

0003差异表达进行PCR验证。其引物序列及PCR扩增条件见表1。对其进行进一步PCR验证发现:验证结果与测序结果一致,见表2。
[0024]表1 RT

PCR扩增LincRNA的引物序列及扩增反应条件
[0025][0026]表2 RT

PCR扩增的相对定量结果
[0027][0028]上述实验结果表明,经电离辐射作用后,人外周血中LincR

0003的表达水平较对照组显著上调。因此,筛选LincR

0003作为电离辐射暴露早期损伤诊断的分子标志物,作为受照人员健康监护的一项指标。
[0029]显然,本领域的技术人员可以对本专利技术进行各种改动和变型而不脱离本专利技术的精神和范围。这样,倘若对本专利技术的这些修改和变型属于本专利技术权利要求及其同等技术的范围之内,则本专利技术也意图包含这些改动和变型在内。上述实施例或实施方式只是对本专利技术
的举例说明,本专利技术也可以以其它的特定方式或其它的特定形式实施,而不偏离本专利技术的要旨或本质特征。因此,描述的实施方式从任何方面来看均应视为说明性而非限定性的。本专利技术的范围应由附加的权利要求说明,任何与权利要求的意图和范围等效的变化也应包含在本专利技术的范围内。
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...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种RNA,其特征在于:所述的RNA为LincR

0003,其序列如SEQ ID NO.1所示。2.LincR
‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员:董娟聪原雅艺杨彪党旭红程娇孟倩倩王超张忠新柴栋良任越左雅慧
申请(专利权)人:中国辐射防护研究院
类型:发明
国别省市:

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