一种蠲痹汤组合物指纹图谱的构建方法及检测方法和应用技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种蠲痹汤组合物指纹图谱的构建方法及检测方法和应用。本发明专利技术指纹图谱的构建方法包括以下步骤：取蠲痹汤组合物，加入提取溶剂，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液；取马钱苷酸、桑皮苷A、绿原酸、龙胆苦苷等11种对照品，制成对照品参照物溶液；分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液1～2μL，注入液相色谱仪进行色谱分析，测定，记录色谱图，分别得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定蠲痹汤组合物的标准指纹图谱。本发明专利技术指纹图谱可全面反映出蠲痹汤的质量信息，从而能够达到更加全面、有效地控制蠲痹汤制剂产品质量的目的。有效地控制蠲痹汤制剂产品质量的目的。有效地控制蠲痹汤制剂产品质量的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种蠲痹汤组合物指纹图谱的构建方法及检测方法和应用


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种蠲痹汤组合物指纹图谱的构建方法及检测方法和应用。

技术介绍

[0002]蠲痹汤出自清代程国彭所撰综合性医书《医学心悟》卷三“痹(鹤膝风)”篇。“通治风寒湿三气，合而成痹”。组成为羌活、独活各一钱，桂心五分，秦艽一钱，当归三钱，川芎七分，甘草五分(炙)，海风藤二钱，桑枝三钱，乳香、木香各八分。主治中风身体烦痛，项背拘急，手足冷痹，腰膝沉重，举动艰难。方中羌活、独活、秦艽、肉桂祛风散寒胜湿；当归、川芎、乳香理气养血、活血止痛；桑枝、海风藤通经活络止痛。现代药理研究证明：羌活水溶性成分能抑制迟发型变态反应及炎症反应；独活水提物具有抗炎镇痛作用；当归和川芎中的阿魏酸具有增强心肌的血液供应、缓解心肌缺血的作用；秦艽具有抗炎、镇痛、解热作用，通过神经体液系统间接影响脑垂体，促使肾上腺皮质功能加强，皮质激素分泌增加；全方具有抗炎、镇痛、调节免疫、改善微循环作用，从而增加神经组织供血供氧，促进周围神经损伤的修复，是临床上治疗风寒湿痹的常用方剂，具有疏风散寒、祛湿宣痹之功效。
[0003]蠲痹汤属于2018年国家中医药管理局会同国家药品监督管理局制订《古代经典名方目录(第一批)》中的100首经典名方第79首。经典名方是指以古代医籍记载的古代经典名方制备方法为依据制备而得的中药药用物质的标准，除成型工艺外，其余制备方法应当与古代医籍记载基本一致。成型工艺一般采用冷冻干燥、喷雾干燥等不破坏物质组成的方式。经典名方临床疗效确切，运用现代科学技术将经典名方开发承携带方便、便于服用的中药制剂，不仅是对中医药的传承，也能更好的促进经典名方的临床应用。颗粒剂制备工艺相对简单、易赋形，服用、携带方便，在服用形式上与传统汤剂最为一致，能较大限度的保留传统汤剂的优点，因此以汤剂形式服用的经典名方选择颗粒剂最为适宜。
[0004]中药指纹图谱是控制中药质量的重要分析手段，可确保其内在质量均一和稳定。经过十几年的研究和运用，该项技术已日趋成熟，在中药质量标准控制中得到更广泛应用。中药指纹图谱的制作和应用常包括：(1)采集具有代表性的中药样品，采取适当的方法制备供试品溶液，根据确定的分析方法，对一定批次的中药样品进行分析，将所得的多批次数据进行处理，得到标准指纹图谱；(2)将样品按照与标准指纹图谱制作相同的方法进行样品处理、分离分析后，将所得的指纹图谱与标准指纹图谱进行相似度比较，一般相以度大于0.9即可视为该样品为合格。目前关于蠲痹汤的指纹图谱文献甚少，关于该方的成分分析以及质量控制方面也尚无报道。因此，该方具有较大的开发价值。为了更全面、更有效地控制蠲痹汤制剂临床用药的质量，使其安全性和疗效更加有所保障，需要对蠲痹汤组合物采用更为先进的质量检测手段，达到有效地控制蠲痹汤制剂产品质量的目的。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种蠲痹汤组合物指纹图谱的构建方法
及检测方法，旨在解决现有技术中没有关于蠲痹汤组合物的指纹图谱文献报道的缺陷，有效的控制了蠲痹汤制剂的质量。
[0006]本专利技术的技术方案是：
[0007]一种蠲痹汤组合物UPLC指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：
[0008]S1供试品溶液的制备：取蠲痹汤组合物，加入提取溶剂，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液；
[0009]S2参照物溶液的制备：取马钱苷酸、桑皮苷A、绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸、紫花前胡苷、桂皮醛、甘草酸铵、藁本内酯、蛇床子素、11
‑
羰基
‑
β
‑
乙酰乳香酸对照品，精密称定，分别加入体积分数为50％～80％的甲醇水溶液，制成参照物溶液；
[0010]S3检测：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液1～2μL，注入液相色谱仪进行色谱分析，测定，记录色谱图，分别得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定蠲痹汤组合物的标准指纹图谱。
[0011]进一步地，所述步骤S1所述提取溶剂为体积分数为50％～80％的甲醇水溶液。
[0012]进一步地，所述步骤S3所述色谱分析条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温：20℃～30℃；以乙腈
‑
体积分数为0.1％的磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速0.2mL/mL～0.5mL/mL，检测仪器采用紫外检测器，指纹图谱的检测波长220nm～330nm；理论板数按龙胆苦苷峰计算≥10000。
[0013]进一步地，所述指纹图谱的检测波长254nm。
[0014]进一步地，所述梯度洗脱具体操作为：
[0015]0～8分钟，乙腈8％
→
11％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液92％
→
89％；
[0016]8～15分钟，乙腈11％
→
17％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液89％
→
83％；
[0017]15～20分钟，乙腈17％
→
22.5％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液83％
→
77.5％；
[0018]20～30分钟，乙腈22.5％
→
42.5％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液77.5％
→
57.5％；
[0019]30～36分钟，乙腈42.5％
→
61％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液57.5％
→
39％；
[0020]36～40分钟，乙腈61％
→
100％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液39％
→
0％。
[0021]进一步地，所述步骤S3所述蠲痹汤组合物的标准指纹图谱包括11个特征峰，以4号峰龙胆苦苷色谱峰为S峰，各特征峰的相对保留时间分别为：1号峰相对保留时间RRT为0.504，2号峰相对保留时间RRT为0.642，3号峰相对保留时间RRT为0.703，4号(S)峰相对保留时间RRT为1.000，5号峰相对保留时间RRT为1.334，6号峰相对保留时间RRT为1.528，7号峰相对保留时间RRT为2.008，8号峰相对保留时间RRT为2.138，9号峰相对保留时间RRT为2.670，10号峰相对保留时间RRT为2.691，11号峰相对保留时间RRT为2.951。
[0022]进一步地，所述步骤S3所述蠲痹汤组合物的标准指纹图谱中1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11号色谱峰依次与马钱苷酸、桑皮苷A、绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸、紫花前胡苷、桂皮醛、甘草酸铵、藁本内酯、蛇床子素、11
‑
羰基
‑
β
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乙酰乳香酸对照品色谱峰保留时间相对应。
[0023]本专利技术的另一目的在于所述的蠲痹汤组合物UPLC指纹图谱的构建方法得到的标准指纹图谱在蠲痹汤组合物的质量检测和质量控制中的应本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蠲痹汤组合物UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1供试品溶液的制备：取蠲痹汤组合物，加入提取溶剂，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液；S2参照物溶液的制备：取马钱苷酸、桑皮苷A、绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸、紫花前胡苷、桂皮醛、甘草酸铵、藁本内酯、蛇床子素、11
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羰基
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β
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乙酰乳香酸对照品，精密称定，分别加入体积分数为50％～80％的甲醇水溶液，制成对照品参照物溶液；S3检测：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液1～2μL，注入液相色谱仪进行色谱分析，测定，记录色谱图，分别得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定蠲痹汤组合物的标准指纹图谱。2.根据权利要求1所述的蠲痹汤组合物UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S1所述提取溶剂为体积分数为50％～80％的甲醇水溶液。3.根据权利要求1所述的蠲痹汤组合物UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S3所述色谱分析条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温：20℃～30℃；以乙腈
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体积分数为0.1％的磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速0.2mL/mL～0.5mL/mL，检测仪器采用紫外检测器，指纹图谱的检测波长220nm～330nm；理论板数按龙胆苦苷峰计算≥10000。4.根据权利要求3所述的蠲痹汤组合物UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体操作为：0～8分钟，乙腈8％
→
11％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液92％
→
89％；8～15分钟，乙腈11％
→
17％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液89％
→
83％；15～20分钟，乙腈17％
→
22.5％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液83％
→
77.5％；20～30分钟，乙腈22.5％
→
42.5％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液77.5％
→
57.5％；30～36分钟，乙腈42.5％
→
61％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液57.5％
→
39％；36～40分钟，乙腈61％
→
100％，体积分数为0.1％的磷酸水溶液39％
→
0％。5.根据权利要求1所述的蠲痹汤组合物UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤S3所述蠲痹汤组合物的标准指纹图谱包括11个特征峰，以4号峰龙胆苦苷色谱峰为S峰，各特征峰的相对保留时间分别为：1号峰相对保留时间RRT为0.504，2号峰相对保留时间RRT为0.642，3号峰相对保留时间RRT为0.703，4号(S)峰相对保留时间RRT为1.000，5号峰相对保留时间RRT为1.334，6号峰相对保留时间RRT为1.528，7号峰相对保留时间RRT为2.008，8号峰相对保留时间RRT为2.138，9号峰相对保留时间RRT为2.670，10号峰相对保留时间RRT为...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾杉，陈锦霞，林碧珊，高永坚，陈伟钢，张汝莹，刘勇，汤春花，
申请(专利权)人：国药集团广东环球制药有限公司，
类型：发明
国别省市：