用于制造病毒载体的方法和系统技术方案

本文公开了使用与制造过程串联的静态光散射装置来制造病毒载体(例如慢病毒载体)的方法和系统。方法和系统。方法和系统。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于制造病毒载体的方法和系统
[0001]相关申请
[0002]本申请要求2019年1月22日提交的美国临时申请号62/795,513的权益，所述临时申请的内容以引用的方式整体并入本文。

技术介绍

[0003]使用病毒载体的基因疗法是一个已引起显著关注的领域。然而，有效制造大量病毒载体的能力仍然是一个问题。目前不存在用于在制造过程期间检测或定量病毒载体的串联过程分析技术(PAT)解决方案。也不存在用于在制造过程期间控制非感染性颗粒与感染性颗粒的分离的串联过程。病毒载体的定量和鉴定通常需要冗长的测定，这使得不能在制造过程期间做出实时决策。此外，目前不存在控制完整病毒载体颗粒与其过程指定杂质(诸如外泌体)的分离的串联解决方案。需要一种允许实时检测感染性病毒颗粒并能够将这些颗粒与杂质分离的过程。

技术实现思路

[0004]本文公开了用于制造病毒载体的方法。所述方法包括使用与制造过程串联的静态光散射装置(例如，多角度光散射(MALS)装置)以控制制造过程中的单元操作和/或使所述单元操作自动化。
[0005]在一些实施方案中，MALS装置用于控制制造过程中的一个或多个单元操作(例如，两个、三个、四个、五个或六个单元操作)和/或使所述单元操作自动化。在一些实施方案中，MALS装置用于控制制造过程中的每个单元操作。
[0006]在一些实施方案中，单元是分离单元(例如，层析单元、切向流过滤单元、正向流过滤单元和/或超滤单元)。在一些实施方案中，单元是过滤、澄清、纯化、浓缩、配制和/或填充单元。
[0007]本文还公开了用于检测病毒颗粒的方法。所述方法包括使用与制造过程串联的静态光散射装置(例如，MALS装置)以检测在制造过程期间产生的病毒颗粒。
[0008]在一些实施方案中，MALS装置在制造过程期间与层析和/或过滤(例如切向流过滤、正向流过滤和/或超滤)串联使用以检测病毒颗粒。在一些实施方案中，第一MALS装置与层析串联使用并且第二MALS装置与过滤串联使用。
[0009]在一些实施方案中，用于检测病毒颗粒的方法还包括纯化病毒颗粒。在一些实施方案中，MALS装置使病毒颗粒基于粒径与杂质的分离自动化。粒径可测量为颗粒的半径或直径。
[0010]本文公开了病毒载体制造过程。所述方法包括澄清从宿主细胞收获的病毒颗粒、将病毒颗粒与杂质分离、过滤病毒颗粒和浓缩病毒颗粒，其中所述制造过程与一个或多个静态光散射装置(例如，MALS装置)串联执行。
[0011]在一些实施方案中，使用与MALS装置的层析和/或过滤串联将病毒颗粒分离。在一些实施方案中，将病毒颗粒基于粒径与杂质分离。粒径可使用MALS装置测量。在一些实施方
案中，使用与MALS装置串联的切向流过滤来过滤和浓缩病毒颗粒。在某些实施方案中，MALS装置测定溶液中病毒颗粒的实时浓度(例如，病毒颗粒/mL)。在一些实施方案中，一个或多个MALS装置与分离、过滤、浓缩、澄清、纯化和/或配制过程串联使用。
[0012]本文还公开了用于制造病毒载体的方法。所述方法包括启动病毒载体制造过程，使用与制造过程串联的静态光散射装置(例如，MALS装置)来检测病毒颗粒的存在，以及纯化病毒颗粒。
[0013]在一些实施方案中，MALS装置在制造过程期间与层析和/或过滤(例如切向流过滤、正向流过滤和/或超滤)串联使用以检测病毒颗粒。在一些实施方案中，第一MALS装置与层析串联使用并且第二MALS装置与过滤串联使用。
[0014]在一些实施方案中，MALS装置与过滤串联使用以控制一个或多个单元操作将病毒颗粒基于粒径从杂质中纯化。粒径可通过MALS装置测量为颗粒的半径或直径。在一些实施方案中，过滤单元是正向流过滤单元。在一些实施方案中，第二过滤单元与MALS装置串联使用，并且其中所述第二过滤单元是超滤单元。
[0015]在一些实施方案中，第一MALS装置用于检测病毒颗粒的存在并且第二MALS装置用于控制一个或多个单元操作以纯化病毒颗粒。在一些实施方案中，用于制造病毒载体的方法还包括浓缩病毒颗粒。
[0016]本文还公开了用于去除病毒载体制造过程中的杂质的方法。所述方法包括使用与静态光散射装置(例如，MALS装置)串联的层析和/或过滤来分离含有病毒颗粒和杂质的溶液，其中所述静态光散射装置将病毒颗粒基于粒径与杂质分离。在特定实施方案中，MALS装置检测病毒颗粒与杂质之间基于粒径的差异，并由此控制分离装置(例如，从MALS至层析橇的信号控制病毒颗粒收集并将杂质送至废料)。
[0017]在一些实施方案中，MALS装置与层析单元串联使用。在一些实施方案中，MALS装置与切向流过滤单元、正向流过滤单元和/或超滤单元串联使用。在一些实施方案中，第一MALS装置与层析单元串联使用并且第二MALS装置与过滤单元串联使用。
[0018]在一些实施方案中，用于去除病毒载体制造过程中的杂质的方法还包括纯化病毒颗粒。在一些实施方案中，MALS装置与过滤单元(例如，正向流过滤单元)串联使用以控制病毒颗粒基于粒径从杂质中的纯化。在一些实施方案中，第二过滤单元(例如，超滤单元)与MALS装置串联使用。在一些实施方案中，第一MALS装置用于使得病毒颗粒与杂质的分离，并且第二MALS装置用于控制病毒颗粒的纯化。在一些实施方案中，用于去除病毒载体制造过程中的杂质的方法还包括浓缩病毒颗粒。在一些实施方案中，粒径测量为颗粒的半径或直径。
[0019]本文公开了用于增加病毒载体制造过程中的感染性病毒颗粒的回收率的方法。所述方法包括使用与静态光散射装置(例如，MALS装置)串联的层析和/或过滤将溶液中的感染性病毒颗粒与杂质分离，其中所述静态光散射装置将感染性病毒颗粒基于粒径与杂质分离。
[0020]在一些实施方案中，MALS装置与层析串联使用。在一些实施方案中，MALS装置与切向流过滤、正向流过滤和/或超滤串联使用。在一些实施方案中，第一MALS装置与层析串联使用并且第二MALS装置与过滤串联使用。
[0021]在一些实施方案中，用于增加病毒载体制造过程中的感染性病毒颗粒的回收率的
方法还包括浓缩感染性病毒颗粒。在一些实施方案中，用于增加病毒载体制造过程中的感染性病毒颗粒的回收率的方法还包括纯化感染性病毒颗粒。在一些实施方案中，MALS装置与过滤(例如，正向流过滤单元)串联使用以控制感染性病毒颗粒基于粒径从杂质中的纯化。在一些方案中，第二过滤(例如，超滤)与MALS装置串联使用。
[0022]在一些实施方案中，第一MALS装置用于分离感染性病毒颗粒与杂质并且第二MALS装置检测和控制与制造过程的各个方面相关的单元操作以纯化感染性病毒颗粒。在一些实施方案中，粒径测量为颗粒的半径或直径。
[0023]本文还公开了用于浓缩病毒载体制造过程中的病毒颗粒的方法。所述方法包括使用与静态光散射装置(例如，MALS装置)串联的切向流过滤以过滤包含病毒颗粒的溶液；其中所述静态光散射装置测定溶液中病毒颗粒的实时浓度并使溶液的过滤自动化，直到本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于制造病毒载体的方法，其包括使用与制造过程串联的多角度光散射(MALS)装置以控制所述制造过程中的单元操作。2.如权利要求1所述的方法，其中所述MALS装置用于控制所述制造过程中的多于一个单元操作。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述MALS装置用于控制所述制造过程中的两个、三个、四个、五个或六个单元操作。4.如权利要求2或3所述的方法，其中MALS装置用于控制所述制造过程中的每个单元操作。5.如权利要求1
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4中任一项所述的方法，其中所述单元是分离单元。6.如权利要求1
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5中任一项所述的方法，其中所述分离单元是层析单元、切向流过滤单元、正向流过滤单元和/或超滤单元。7.如权利要求1
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6中任一项所述的方法，其中所述单元是过滤、澄清、纯化和/或浓缩单元。8.如权利要求1
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4中任一项所述的方法，其中所述单元是配制或填充单元。9.如权利要求1
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8中任一项所述的方法，其中所述病毒载体选自腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒和痘苗病毒载体。10.如权利要求1
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9中任一项所述的方法，其中所述病毒载体是慢病毒载体。11.一种用于检测病毒颗粒的方法，其包括使用与制造过程串联的多角度光散射(MALS)装置以检测在所述制造过程期间产生的所述病毒颗粒。12.如权利要求11所述的方法，其中所述MALS装置在所述制造过程期间与层析和/或过滤串联使用以检测所述病毒颗粒。13.如权利要求12所述的方法，其中所述MALS装置与层析串联使用。14.如权利要求12所述的方法，其中所述MALS装置与切向流过滤、正向流过滤和/或超滤串联使用。15.如权利要求12所述的方法，其中第一MALS装置与层析串联使用并且第二MALS装置与过滤串联使用。16.如权利要求11
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15中任一项所述的方法，所述方法还包括纯化所述病毒颗粒。17.如权利要求16所述的方法，其中所述MALS装置使所述病毒颗粒基于粒径与杂质的分离自动化。18.如权利要求17所述的方法，其中所述粒径测量为所述颗粒的半径或直径。19.如权利要求11
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18中任一项所述的方法，其中所述病毒载体选自腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒和痘苗病毒载体。20.如权利要求11
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10中任一项所述的方法，其中所述病毒载体是慢病毒载体。21.一种病毒载体制造过程，其包括澄清从宿主细胞收获的病毒颗粒、将所述病毒颗粒与杂质分离、过滤所述病毒颗粒和浓缩所述病毒颗粒，其中所述制造过程与一个或多个MALS装置串联执行。22.如权利要求21所述的过程，其中所述病毒颗粒使用与MALS装置串联的层析和/或过滤来分离。23.如权利要求21或22所述的过程，其中所述病毒颗粒基于粒径与杂质分离。
24.如权利要求23所述的过程，其中粒径使用所述MALS装置测量。25.如权利要求21
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24中任一项所述的过程，其中所述病毒颗粒使用与MALS装置串联的切向流过滤来过滤和浓缩。26.如权利要求25所述的过程，其中所述MALS装置测定溶液中所述病毒颗粒的实时浓度。27.如权利要求21所述的过程，其中所述一个或多个MALS装置与分离、过滤、浓缩、澄清、纯化和/或配制过程串联使用。28.如权利要求21
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27中任一项所述的过程，其中所述病毒颗粒选自腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒和痘苗病毒颗粒。29.如权利要求21
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28中任一项所述的过程，其中所述病毒颗粒是慢病毒颗粒。30.一种用于制造病毒载体的方法，其包括启动病毒载体制造过程，使用与所述制造过程串联的多角度光散射(MALS)装置来检测病毒颗粒的存在，以及纯化所述病毒颗粒。31.如权利要求30所述的方法，其中所述MALS装置在所述制造过程期间与层析和/或过滤串联使用以检测所述病毒颗粒。32.如权利要求31所述的方法，其中所述MALS装置与层析串联使用。33.如权利要求31所述的方法，其中所述MALS装置与切向流过滤、正向流过滤和/或超滤串联使用。34.如权利要求31所述的方法，其中第一MALS装置与层析串联使用并且第二MALS装置与过滤串联使用。35.如权利要求30所述的方法，其中所述MALS装置与过滤串联使用以控制所述病毒颗粒基于粒径从杂质中的纯化。36.如权利要求35所述的方法，其中所述粒径测量为所述颗粒的半径或直径。37.如权利要求35或36所述的方法，其中所述粒径通过所述MALS装置测量。38.如权利要求35
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37中任一项所述的方法，其中所述过滤单元是正向流过滤单元。39.如权利要求35
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38中任一项所述的方法，其中第二过滤单元与所述MALS装置串联使用，并且其中所述第二过滤单元是超滤单元。40.如权利要求30所述的方法，其中第一MALS装置用于检测病毒颗粒的存在并且第二MALS装置用于控制所述病毒颗粒的纯化。41.如权利要求30
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40中任一项所述的方法，所述方法还包括浓缩所述病毒颗粒。42.如权利要求30
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41中任一项所述的方法，其中所述病毒颗粒选自腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒和痘苗病毒颗粒。43.如权利要求30
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42中任一项所述的方法，其中所述病毒颗粒是慢病毒颗粒。44.一种用于去除病毒载体制造过程中的杂质的方法，其包括使用与MALS装置串联的层析和/或过滤来分离含有病毒颗粒和杂质的溶液，其中所述MALS装置控制所述病毒颗粒基于粒径与所述杂质的分离。45.如权利要求44所述的方法，其中所述MALS装置与层析单元串联使用。46.如权利要求44或45所述的方法，其中所述MALS装置与切向流过滤单元、正向流过滤单元和/或超滤单元串联使用。47.如权利要求44所述的方法，其中第一MALS装置与层析单元串联使用并且第二MALS
装置与过滤单元串联使用。48.如权利要求44
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47中任一项所述的方法，所述方法还包括纯化所述病毒颗粒。49.如权利要求48所述的方法，其中所述MALS装置与过滤单元串联使用以控制所述病毒颗粒基于粒径从杂质中的纯化。50.如权利要求49所述的方法，其中所述过滤单元是正向流过滤单元。51.如权利要求49或50所述的方法，其中第二过滤单元与所述MALS装置串联使用，并且其中所述第二过滤单元是超滤单元。52.如权利要求48
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51中任一项所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯蒂芬，
申请(专利权)人：蓝鸟生物公司，
类型：发明
国别省市：