本发明专利技术属于医药领域，具体涉及一种高纯度20(S)
【技术实现步骤摘要】
AB-8。
[0013]②
梯度洗脱以富集并纯化20(S)-PPD：上样结束后，依次用50％乙醇淋洗5～7个柱体积、用60％乙醇洗脱3～10个柱体积、用70％乙醇洗脱5～10个柱体积。收集富含 20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位，并对大孔树脂层析柱进行再生。
[0014]③
持续维持过饱和状态以增大结晶收率：将富含20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位减压脱醇至乳白色，静置，有20(S)-PPD粗晶析出。
[0015]每当母液澄清时，即加水至母液稍显乳白，以降低母液中乙醇浓度，从而降低了20(S)-PPD 的溶解度，使20(S)-PPD在母液中持续保持过饱和状态以增大晶体收率。重复该操作至母液乙醇浓度至特定值，并当母液重新澄清后，继续室温静置24小时，过滤收集结晶，并以适当浓度的乙醇溶液洗涤滤饼，干燥，即得纯度大于95％的20(S)-PPD。
[0016]母液乙醇终浓度为20～50％，优选为30～40％；
[0017]洗涤滤饼的乙醇溶液浓度为20～50％，优选为30～40％。
[0018]20(S)-PPD粗提物中20(S)-PPD含量为35-45％，市售20(S)-PPD粗提物中20(S)-PPD含量为42％。
[0019]20(S)-PPD粗提物乳浊液配制为3-6mg/ml,即每ml溶液中含有粗提物3-6mg，优选4mg/ml.
[0020]本专利技术的有益之处在于：
[0021]①
批处理能力大：20(S)-PPD用乙醇溶解时，需要较高的乙醇浓度，在此乙醇浓度下，大孔吸附树脂对20(S)-PPD的吸附载量较低，而采用低醇浓度下的乳浊液上样，大孔吸附树脂对20(S)-PPD的负载量大大增加，从而增大了工艺的批处理能力。
[0022]②
结晶收率高：20(S)-PPD在浓度为60％以上的乙醇溶液中有较高在溶解度，乙醇浓度低于60％时，20(S)-PPD的溶解度即出现断崖式下降。为防止结晶过快造成杂质混杂到结晶中，同时又尽可以增大20(S)-PPD结晶的收率，本专利技术在对20(S)-PPD进行结晶时，起始乙醇浓度高，但一旦结晶开始，即通过向母液中加水的方式逐步降低母液中乙醇浓度，维持母液中20(S)-PPD的过饱和状态，从而增大了20(S)-PPD的晶体收率。当母液中乙醇浓度降低至终浓度为30～40％时，随着20(S)-PPD溶解度的下降，母液中杂质的溶解度也开始降低，因此为保证晶体纯度，母液中乙醇的终浓度定为30～40％。本专利技术所涉及的20(S)-PPD制备工艺，以晶体状态获取的20(S)-PPD 的回收率可达90％左右。
[0023]③
结晶纯度高：按本专利技术所介绍的方法制备的20(S)-PPD，纯度达95％以上。其重要原因之一是在结晶母液乙醇终浓度(30～40％)条件下，20(S)-PPD溶解度低而杂质仍能保持较高的溶解度，在结晶-溶解的动态平衡中，固体中的杂质可与母液中的 20(S)-PPD进行置换。
[0024]④
环境友好：本工艺所用材料主要为大孔吸附树脂和乙醇，均为制药行业常用试剂材料，成本低，污染少，利于产业化。
附图说明
[0025]图1是20(S)-PPD在不同浓度乙醇溶液中的溶解度趋势图。
[0026]图2是35％乙醇作结晶母液的液相色谱图。
[0027]图3是65％乙醇作结晶母液的液相色谱图
[0028]图4是按本专利技术所提供的方法制备的20(S)-PPD的液相色谱图。
具体实施方式
[0029]下面的实施例用以解释本专利技术，但是并非对本专利技术实质内容的限制。
[0030]实施例1.高纯度20(S)-PPD的制备
[0031]①
上样：含20(S)-PPD粗提物用浓度为50％的乙醇为溶剂，制成乳浊液，按35mg 20(S)-PPD/mL大孔吸附树脂的负载量上AB-8型大孔吸附树脂层析柱。
[0032]②
洗脱：上样结束后，依次用50％乙醇淋洗5个柱体积、用60％乙醇洗脱3个柱体积、用70％乙醇洗脱10个柱体积，收集富含20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位。
[0033]③
结晶：将富含20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位减压脱醇至乳白色，静置至有20(S)-PPD 粗晶析出。每当母液澄清时，即加水至母液稍显乳白。重复该操作至母液乙醇浓度至35％时止。当母液重新澄清后，继续室温静置24小时，过滤收集结晶，并用35％的乙醇溶液洗涤滤饼，干燥，即得纯度大于95％的20(S)-PPD，且20(S)-PPD回收率为93％。
[0034]实施例2.高纯度20(S)-PPD的制备
[0035]①
上样：含20(S)-PPD粗提物用浓度为45％的乙醇为溶剂，制成乳浊液，按25mg/mL 大孔吸附树脂的负载量上D-101型大孔吸附树脂层析柱。
[0036]②
洗脱：上样结束后，依次用45％乙醇淋洗5个柱体积、用60％乙醇洗脱3个柱体积、用70％乙醇洗脱10个柱体积，收集富含20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位。
[0037]③
结晶：将富含20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位减压脱醇至乳白色，静置至有20(S)-PPD 析出。每当母液澄清时，即加水至母液稍显乳白。重复该操作至母液乙醇浓度至40％时止。当母液重新澄清后，继续室温静置24小时，过滤收集结晶，并用40％的乙醇溶液洗涤滤饼，干燥，即得纯度大于95％的20(S)-PPD，且20(S)-PPD回收率为87％。
[0038]实验例1. 20(S)-PPD在不同浓度乙醇溶液中的溶解趋势
[0039]仪器与试剂：Ultimate 3000型高效液相色谱仪(美国赛默飞科技)；20(S)-PPD粗提物(供应商：大连弘毅生物技术有限公司)；无水乙醇(天津北晨方正试剂厂)。实验用水为去离子水。
[0040]实验方法：精确称取20(S)-PPD粗提物，以不同浓度的乙醇配制成4mg/mL的溶液(低醇时为乳浊液)，微孔滤膜过滤，精密吸取滤液20μL，注入液相色谱仪，记录20(S)-PPD峰面积。以乙醇浓度为横坐标，以20(S)-PPD峰面积为纵坐标，绘制20(S)-PPD在不同乙醇溶液中的溶解度趋势图。
[0041]检测方法：同实验例4。
[0042]实验结果与结论：见附图1。当乙醇浓度低于55％时，随着乙醇浓度的下降，20(S)-PPD 的溶解度断崖式下降，当乙醇浓度低至35％时，20(S)-PPD的溶解度降至最低。
[0043]该结果提示，在进行20(S)-PPD结晶时，可先在高于55％的乙醇浓度时溶解样品，然后通过逐步降低母液中的乙醇浓度，维持母液中20(S)-PPD的过饱和状态，以最大限度地获取 20(S)-PPD结晶。
[0044]实验例2.大孔吸附树脂对溶于50％和60％乙醇中的20(S)-PPD的负载量比较
[0045]仪器与试剂：Ultimate 3000型高效本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高纯度20(S)-原人参二醇，其特征为：所述高纯度20(S)-原人参二醇由下述制备方法制备，包括以下步骤：
①
上样：20(S)-原人参二醇粗提物以乙醇溶液为溶剂，制成乳浊液，按一定的20(S)-原人参二醇：树脂体积比例上大孔吸附树脂层析柱；
②
层析：上样结束后，依次用50％乙醇淋洗5～7个柱体积、用60％乙醇洗脱3～10个柱体积、用70％乙醇洗脱5～10个柱体积，收集该富含20(S)-原人参二醇的洗脱部位并浓缩至溶液刚出现乳浊，静置，有20(S)-原人参二醇粗晶析出；
③
结晶：每当母液因晶体析出而澄清时，即加水至母液稍显乳浊，使20(S)-原人参二醇在母液中持续保持过饱和状态以增大晶体收率。重复该操作至母液乙醇终浓度至特定值，继续静置24小时，过滤收集结晶，并以一定浓度的乙醇溶液洗涤滤饼，干燥，即得纯度大于95％的20(S)-原人参二醇。2.根据权利要求1所述的高纯度20(S)-原人参二醇，其特征为：所述制备方法中采用乳浊液上样且制备20(S)-PPD粗提物乳浊液的乙醇浓度为40～60％。3.根据权利要求2所述的高纯度20(S)-原人参二醇，其特征为：所述制备方法中采用乳浊液上样且制备20(S)-PPD粗提物乳浊液的乙醇浓度为45～55％。...
【专利技术属性】
技术研发人员：曲桂武，刘珂，
申请(专利权)人：山东铂源生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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