中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法及其应用，该检测方法采用高效液相色谱法建立，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；检测器采用DAD检测器；流动相A为乙腈或甲醇，流动相B为甲酸水溶液、乙酸水溶液或磷酸水溶液，按照特定程序进行梯度洗脱，从而实现快速、简便、全面、准确可靠的对中药复方苍霍平颗粒各化学成分的个数、特征性成分所在位置和含量分布等相关信息进行检测，从而提升了该制剂的质量评价体系，客观反应了该制剂的质量概貌，从而有助于指导生产、质量检测，确保该药临床的有效性和安全性；同时，为开展该复方制剂的质量标志物、药效物质基础和作用机制的研究提供科学依据。用机制的研究提供科学依据。用机制的研究提供科学依据。

【技术实现步骤摘要】
中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法及其应用


[0001]本专利技术属于中药分析
，具体涉及中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法及其应用。

技术介绍

[0002]苍藿平胃颗粒为中药创新药，处方来源于安徽省名老中医张琼林教授从医60多年的临床经验方
‑“
加味平胃散”，宋《太平惠民和剂局方》的“平胃散”应用脾胃病900多年，由苍术、厚朴、陈皮、甘草组成，张教授在60多年临床实践中在“平胃散”处方基础上经过加减、化裁，反复提炼和筛选，确定了苍藿平胃颗粒的处方，治疗各种胃病疗效显著。该处方为：炒苍术、藿香叶、蒲公英、姜厚朴、广陈皮、赤芍、茯苓、姜半夏、甘松、海螵蛸、白及、甘草、北沙参、麦门冬14味药材。药理研究：采用大鼠脚肿胀、肉芽肿试验；小鼠扭体、热板法试验；小鼠胃排空试验；建立大鼠急性胃炎模型；大鼠慢性胃炎模型；胆汁返流性胃炎模型等试验，验证苍藿平胃颗粒具有抗炎镇痛作用；对急性胃炎、慢性胃炎、胆汁返流性胃炎具有保护作用。目前苍藿平胃颗粒已在临床上推广用于治疗慢性浅表性胃炎，且效果显著，不良反应少，适用人群广，越来越受患者的重视，市场潜力大。
[0003]苍藿平胃颗粒原质量标准主要包括：浸出物检查；薄层鉴别：涉及苍术、藿香、芍药苷(赤芍)、厚朴酚与和厚朴酚(厚朴)、橙皮苷(陈皮)、白及、甘草、北沙参、麦门冬等9味药材定性鉴别；含量测定：采用HPLC法测定厚朴酚、和厚朴酚(厚朴)、芍药苷(赤芍)等2味药材在制剂中的含量。原质量标准不能从整体上反映该复方制剂的药效成分，也不能从整体上体现中医用药的整体疗效，其起效的物质基础和作用机制仍不明确，该复方制剂质量体系的评价和药效药理研究的深入程度严重制约其临床应用和学术推广。
[0004]中国药典2020年版一部收载了涉及该复方制剂处方中14味药材的定量指标成分：苍术素(苍术)、百秋李醇(藿香)、咖啡酸(2015版)/菊苣酸(2020版)(蒲公英)、厚朴酚、和厚朴酚(厚朴)、橙皮苷(陈皮)、芍药苷(赤芍)、甘松新酮(甘松)、碳酸钙(海螵蛸)、1，4
‑
二[4
‑
(葡萄糖氧)苄基]‑2‑
异丁基苹果酸酯(白及)、甘草苷、甘草酸(甘草)、鲁斯可皂苷元(麦门冬)；其中，茯苓、姜半夏、北沙参未收载含量测定项。
[0005]中药指纹图谱借用DNA指纹图谱发展而来，最早发展起来的是中药化学成分色谱指纹图谱，特别是高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。HPLC具有高的分辨率，可将不同的化学成分进行分离而形成高低不同的色谱峰组成一张色谱图，这些色谱峰的高度和峰面积分别代表了各种不同化学成分和其含量；整个色谱图表征了该样品所含化学成分的多少和量的大小。其不仅可以进行个体、某物种的“唯一性”的鉴定，还可以将其“量”的特征和其他体系挂钩，例如和药效研究结果挂钩。银杏提取物的指纹图谱体现了其所含33个银杏黄酮(化学成分)和各自含量。德国经30多年的化学成分和药效相关研究，发现约24％银杏黄酮和约6％银杏内酯组成的银杏提取物(有相应的指纹图谱控制其成分和相对含量)具有最好的疗效就是一个典型示例(中成药，2000，22(6)：395
‑
397)。因此，中药指纹图谱不仅是一种中药质量控制模式和技术，更可以发展成为一种采用各种指纹图谱来进行中药理论(复杂系统)和
新药开发的研究体系和研究模式。
[0006]实际生产、检验中，要控制苍藿平胃颗粒的质量，需要对处方中物质群整体予以控制，包括处方中各成分的种类和含量的信息、中药药效成分，确保制剂的生产、质量稳定可控、临床有效安全等。关于苍藿平胃颗粒的成分分析、质量控制以及药理等方面目前主要有徐菲菲曾报道苍藿平胃颗粒剂的研究(2012年，合肥工业大学硕士论文)，徐菲菲等曾报道苍藿平胃颗粒对大鼠慢性胃炎及胆汁反流性胃炎的治疗作用研究(中药材，2012，35(07)：1123
‑
1125)，也就是说目前关于该苍霍平胃颗粒中药复方及相似组合物的指纹图谱研究尚未见文献报道，现有技术也没有快速、简便、精确的分析方法适合用于苍藿平胃颗粒中各化学成分的分析、检测，包括特征性成分鉴别和含量分布等相关信息。为了更全面、更有效地控制苍藿平胃颗粒临床用药的质量，使其安全性和疗效更加有所保障，需要对本中药复方采用更为先进的质量控制和检测手段，因此，开发研究该复方制剂的指纹图谱具有较大的应用价值。

技术实现思路

[0007]有鉴于此，本专利技术有必要提供中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，从而快速、简便、全面、准确可靠地对苍藿平胃颗粒各化学成分的个数、特征性成分所在位置和含量分布等相关信息进行检测。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0009]本专利技术首先提供了一种中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，采用高效液相色谱法建立，色谱条件为：
[0010]色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；
[0011]检测器采用DAD检测器，检测波长200
‑
210nm；流速为0.5
‑
1.5mL/min，柱温为20
‑
40℃；
[0012]流动相A为乙腈或甲醇，流动相B为甲酸水溶液、乙酸水溶液或磷酸水溶液，按照如下程序进行梯度洗脱：
[0013][0014]进一步方案，所述色谱柱的规格为250mm
×
4.6mm，硅胶粒径为2
‑
10μm，优选的，所述色谱柱的硅胶粒径为5μm。
[0015]进一步方案，所述流动相B为体积分数0.01
‑
1.5％的甲酸水溶液、乙酸水溶液或磷酸水溶液，在本专利技术的一个或多个实施例中，优选的，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为体积分数0.2％的磷酸水溶液。
[0016]进一步方案，所述色谱条件中，进样量为5
‑
20μL；在本专利技术的一个或多个实施例中，优选的，流速为1.0mL/min，柱温为35℃，检测波长为203nm，进样量为10μL。
[0017]进一步方案，混合参照物溶液按如下方法制备：
[0018]取芍药苷、和厚朴酚、厚朴酚、橙皮苷、苍术素、咖啡酸对照品，精密称定，加甲醇制成含各成分浓度分别为20
‑
50μg
·
mL
‑1的混合参照物溶液；
[0019]供试品溶液按如下方法制备：
[0020]取供试品，精密加入甲醇，摇匀、超声处理、冷却，配制成0.1g
·
mL
‑1的溶液，滤过，取续滤液获得供试品溶液。
[0021]本专利技术进一步提供了如前述任一项所述的苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法在苍藿平胃颗粒的质量控制中的应用，具体的，将所述的样品色谱图导入中药指纹图谱相似度评价委员会系统软件(国家药典，2012A)中，采用平均数法，时间窗为0.1min，进行多点校正，色谱峰匹配及相似度分析，分析苍藿平胃颗粒的指纹图谱。
[0022]进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法建立，色谱条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；检测器采用DAD检测器，检测波长200
‑
210nm；流速为0.5
‑
1.5mL/min，柱温为20
‑
40℃；流动相A为乙腈或甲醇，流动相B为甲酸水溶液、乙酸水溶液或磷酸水溶液，按照如下程序进行梯度洗脱：2.如权利要求1所述的中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为250mm
×
4.6mm，硅胶粒径为2
‑
10μm。3.如权利要求2所述的中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的硅胶粒径为5μm。4.如权利要求1所述的中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述流动相B为体积分数0.01
‑
1.5％的甲酸水溶液、乙酸水溶液或磷酸水溶液。5.如权利要求4所述的中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述流动相A为乙腈，所述流动相B为体积分数0.2％的磷酸水溶液。6.如权利要求1所述的中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述色谱条件中，进样量为5
‑
20μL。
7.如权利要求1所述的中药复方苍藿平胃颗粒的指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述色谱条件中，流速为1.0mL/min，柱温为35℃，检测波长为203nm，进样量为...

【专利技术属性】
技术研发人员：董宠，叶立仁，许龙，黄美容，杨转转，曹阳，黄顺旺，曹明成，
申请(专利权)人：合肥创新医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：