用氨基乙酰丙酸合酶2(ALAS2)调节剂治疗的方法技术

本文描述的是式I的化合物或其药学上可接受的盐：其中环A、R1、R2、a、b和n如本文所定义。还描述了治疗患有需要治疗的障碍的受试者的方法，包括通过施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐来抑制受试者体内的氨基乙酰丙酸合酶2(ALAS2)。特别感兴趣的障碍是血液障碍，例如卟啉症和贫血。如卟啉症和贫血。如卟啉症和贫血。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用氨基乙酰丙酸合酶2(ALAS2)调节剂治疗的方法
[0001]相关申请的参考
[0002]本申请要求于2019年6月7日提交的美国临时专利申请号62/858,699和2019年8月30日提交的美国临时专利申请号62/893,942的申请日的权益，其各自的全部内容通过引用并入本文。

技术介绍

[0003]血红素是几乎所有生物的必需分子。血红素在多种类型的蛋白质(包括细胞色素、过氧化氢酶、血红蛋白和肌红蛋白)上充当辅基。此外，据报道，血红素还涉及哺乳动物的众多调节系统(J.Bio.Chem.,2016,20516)。血红素和血红素前体的产生受5
‑
氨基乙酰丙酸合酶(例如ALAS2)调节。ALAS2的抑制或ALAS2蛋白水平的降低可能会减少血红素途径的流量并抑制血红素途径中毒素代谢物的产生。

技术实现思路

[0004]ALAS2的抑制可以降低动物模型中血红素生物合成途径的代谢物的水平(参见实施例36)。本专利技术的一方面提供如本文所述的作为ALAS2抑制剂的式(I)化合物(参见实施例38)。基于这些结果，公开了新的ALAS2抑制剂和治疗以血红素途径代谢物积累为特征的障碍的方法。
[0005]本公开涉及式(I)化合物或其药学上可接受的盐：
[0006][0007]其中：
[0008]环A为5元杂芳基；
[0009]R1为氢、C1‑
C6烷基、C1‑
C6卤代烷基、
‑
CO2R3、
‑
C1‑
C6酰基或C3‑<br/>C6环烷基；其中C1‑
C6烷基、C1‑
C6卤代烷基、
‑
C1‑
C6酰基和C3‑
C6环烷基中的每一个独立地被0
‑
3个卤素或羟基取代；
[0010]R2为氢、
‑
CN、羟基、C1‑
C6烷基、C3‑
C8环烷基、3
‑
14元杂环基、8
‑
12元双环杂芳基、5
‑
或6
‑
元单环杂芳基、苯基或萘基；其中C1‑
C6烷基、C3‑
C8环烷基、3
‑
14元杂环基、8
‑
12元双环杂芳基、5
‑
或6
‑
元单环杂芳基、苯基和萘基中的每一个独立地被0
‑
4个卤素、羟基、C1‑
C6烷基、C1‑
C6烷氧基、苯基、N(R
a
)2或
‑
CO2R
b
取代；R3、R
a
和R
b
各自独立地为C1‑
C6烷基；
[0011]n为0、1、2、3、4或5；和
[0012]a和b分别表示环A的连接点。
[0013]本专利技术的另一方面提供治疗需要治疗可通过抑制氨基乙酰丙酸合酶(ALAS2)治疗的障碍的受试者的方法，该方法包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
[0014]本专利技术的另一方面提供了人XLP(X连锁显性原卟啉症)的小鼠模型，其尤其可用于测试候选化合物的功效及其治疗XLP的有效剂量。
附图说明
[0015]图1A和B描述了ALAS2是PPIX积累中的限速步骤。质量同位素分布用于凭经验确定ALAS2是使用
13
C2‑
甘氨酸的EPP细胞模型中PPIX积累的限速步骤(参见实施例36.1)。PPIX是ALA的聚合物(ALAS2的产物)。一个PPIX分子来源于8个ALA分子。因此，当将
13
C2‑
甘氨酸引入细胞时，生成的PPIX池将由包含不同数量的
13
C碳的分子组成，范围从0到8。在较早的时间点，由于
13
C
‑
ALA的％较低，同位素分布趋向于使PPIX分子携带较少数量的标记碳。％
13
C
‑
ALA随着标记时间的增加而增加，导致同位素分布发生变化，使PPIX分子具有更多的标记碳。由于PPIX同位素分布由％
13
C
‑
ALA在数学上定义，通过直接测量
13
C标记的PPIX及其质量分布，可以预测每个时间点的％ALA应该是多少。同时，每个时间点细胞中的实际％ALA也直接通过LC
‑
MS测量。如右侧图所示，这两条曲线在统计上是相同的，表明ALA和PPIX之间没有慢步骤，因此证明ALAS2是EPP细胞中PPIX产生的限速步骤。
[0016]图2描绘了用于ALAS2靶标验证以治疗红系卟啉症(erythroid porphyria)的小鼠模型。具有ALAS2
‑
delAT突变的XLP小鼠模型重现(recapitulates)了人类疾病标志物。为了创建XLP小鼠模型，通过CRISPR/CAS9敲入核苷酸缺失和突变，在小鼠中提供了类似于人类XLP疾病中的ALAS2 C端缺失(SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2)(实施例36.2)。事实上，与通过蛋白质免疫印迹(western blot)观察到的全长ALAS2相比，这些突变导致蛋白质的形式更短。值得注意的是，这些小鼠的血液PPIX和Zn
‑
PPIX水平升高，它们是在人类XLP患者中看到的两种特征性疾病标志物。
[0017]图3描绘了用于ALAS2靶标验证以治疗红系卟啉症的小鼠模型。小鼠中可以通过shRNA敲低(knocked down)ALAS2蛋白水平。rtTA的表达盒和针对小鼠ALAS2的shRNA被引入C57B6(实施例36.3)。对纯合的rtTA
+/+
/shALAS2
+/+
小鼠进行了测试，结果表明，在短至4天的多西环素治疗后，ALAS2可以被显著敲低。对杂合rtTA
+/
‑
/shALAS2
+/
‑
小鼠进行了测试，以确认这些小鼠的多西环素治疗是否具有较小程度的蛋白质敲低，因为这些小鼠仅携带一份shRNA表达盒。事实上，ALAS2蛋白印迹的定量表明，在用含多西环素的食物喂养16天的杂合rtTA
+/
‑
/shALAS2
+/
‑
小鼠中，约50％的ALAS2被敲低。
[0018]图4描绘了ALAS2抑制策略的遗传验证。测试携带一拷贝ALAS2shRNA盒的delAT小鼠以验证治疗XLP的ALAS2抑制策略(实施例36.4)。给这些小鼠喂食多西环素以诱导针对ALAS2的shRNA的表达。与之前的结果(参见图3)一致，具有一拷贝shALAS2基因的小鼠在多西环素处理后，ALAS2
‑
delAT蛋白水平降低了约50％。ALAS2
‑
delAT蛋白水平的这种降低足以将骨髓中的ALA降低到WT水平。值得注意的是，血液PP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.式(I)化合物或其药学上可接受的盐：其中：环A为5元杂芳基；R1为氢、C1‑
C6烷基、C1‑
C6卤代烷基、
‑
CO2R3、C1‑
C6酰基或C3‑
C6环烷基；其中C1‑
C6烷基、C1‑
C6卤代烷基、
‑
C1‑
C6酰基和C3‑
C6环烷基中的每一个独立地被0
‑
3个卤素或羟基取代；R2为氢、
‑
CN、羟基、C1‑
C6烷基、C3‑
C8环烷基、3
‑
14元杂环基、8
‑
12元双环杂芳基、5
‑
或6
‑
元单环杂芳基、苯基或萘基；其中C1‑
C6烷基、C3‑
C8环烷基、3
‑
14元杂环基、8
‑
12元双环杂芳基、5
‑
或6
‑
元单环杂芳基、苯基和萘基中的每一个独立地被0
‑
4个卤素、羟基、C1‑
C6烷基、C1‑
C6烷氧基、苯基、N(R
a
)2或
‑
CO2R
b
取代；R3、R
a
和R
b
各自独立地为C1‑
C6烷基；n为0、1、2、3、4或5；和a和b分别表示环A的连接点。2.权利要求1所述的化合物，其中环A为含有1
‑
4个N的5元杂芳基。3.权利要求1或权利要求2所述的化合物，其中环A为含有1
‑
2个N和1个S或O的5元杂芳基。4.权利要求1
‑
3中任一项所述的化合物，其中环A为1,2,4
‑
噁二唑基、吡唑基、1,2,4
‑
三唑基、四唑基、1,2,3
‑
噻二唑基、噻唑基、1,3,4
‑
噻二唑基、1,2,4
‑
噁二唑基
‑
5(4H)
‑
酮、1,2,3
‑
三唑基、1,2,4
‑
三唑基
‑3‑
酮、1H
‑
咪唑基、1,3,4
‑
噁二唑基或噁唑基。5.权利要求1
‑
4中任一项所述的化合物，其中环A选自以下之一：6.权利要求1
‑
5中任一项所述的化合物，其中R1为氢或C1‑
C6烷基。7.权利要求1
‑
5中任一项所述的化合物，其中R1为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙
基、
‑
C(＝O)CF3或
‑
CH2CH2OH。8.权利要求1
‑
7中任一项所述的化合物，其中R2为氢、
‑
CN、羟基、C1‑
C6烷基、C1‑
C6卤代烷基、
‑
CH2OCH3、
‑
CH2‑
苯基、苯基、邻甲基苯基、对氨基苯基、对甲氧基苯基、对氟苯基、萘基、环丙基、
‑
CO2H或
‑
CO2Et。9.权利要求1
‑
7中任一项所述的化合物，其中R2为5
‑
或6
‑
元单环杂芳基、8
‑
12元双环杂芳基或3
‑
14元杂环基。10.权利要求9所述的化合物，其中R2为吡啶基、呋喃基或吗啉基。11.权利要求1
‑
9中任一项所述的化合物，其中n为0、1或2。12.权利要求1
‑
11中任一项所述的化合物，其中所述化合物是来自表1的化合物或其药学上可接受的盐。13.治疗具有治疗需要的受试者的病症的方法，其包括通过施用式(I)的化合物或其药学上可接受的盐来抑制所述受试者中的氨基乙酰丙酸合酶2(ALAS2)：其中：环A为5元杂芳基；R1为氢、C1‑
C6烷基、C1‑
C6卤代烷基、
‑
CO2R3、
‑
C1‑
C6酰基或C3‑
C6环烷基；其中C1‑
C6烷基、C1‑
C6卤代烷基、
‑
C1‑
C6酰基和C3‑
C6环烷基中的每一个独立地被0
‑
3个卤素或羟基取代；R2为氢、
‑
CN、羟基、C1‑
C6烷基、C3‑
C8环烷基、3
‑
14元杂环基、8
‑
12元双环杂芳基、5
‑
或6
‑
元单环杂芳基、苯基或萘基；其中C1‑
C6烷基、C3‑
C8环烷基、3
‑
14元杂环基、8
‑
12元双环杂芳基、5
‑
或6
‑
元单环杂芳基、苯基和萘基中的每一个独立地被0
‑
4个卤素、羟基、C1‑
C6烷基、C1‑
C6烷氧基、苯基、N(R
a
)2或
‑
CO2R
b
取代；R3、R
a
和R
b
各自独立地为C1‑
C6烷基；n为0、1、2、3、4或5；和a和b分别表示环A的连接点。14.权利要求1所述的方法，其中环A为含有1
‑
4个N的5元杂芳基。15.权利要求13或14所述的方法，其中环A为含有1
‑
2个N和1个S或O的5元杂芳基。16.权利要求13
‑
15中任一项所述的方法，其中环A为1,2...

【专利技术属性】
技术研发人员：G钱凯塔，P刘，S金，BC舒克，隋治华，K卢，
申请(专利权)人：安吉奥斯医药品有限公司，
类型：发明
国别省市：