一种荧光探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种荧光探针及其制备方法和应用，涉及环境分析、生物分析检测技术领域，荧光探针化合物具有如式(

【技术实现步骤摘要】
一种荧光探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及环境分析、生物分析检测
，尤其涉及一种荧光探针 及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]白三烯A4水解酶(简称LTA4H)是具有环氧化水解酶和氨肽酶活性的含 锌的双功能金属蛋白酶。作为一种氨基肽酶，LTA4H能降解多肽的N
‑
末端， 而作为一种环氧化物水解酶，它也能将不稳定的等位基因环氧化物白三烯 A4(LTA4)转化为白三烯B4(LTB4)介导单核细胞上调TNF
‑
β、IL
‑
1β和IL
‑
6， 以及诱导p27的泛素化。
[0003]现有研究证明，LTA4H广泛参与诸多炎症的发生，例如LTA4H被发现 在急性肺损伤、特发性肺纤维化、肝炎、肺炎等疾病中高表达，因此，近年 来LTA4H也被视为炎症标志物。此外，LTA4H还被发现在甲状腺、皮肤癌、 食管癌和喉癌等多种癌症中高表达，其与多种肿瘤的发生密切相关，因此 LTA4H也是研发抗肿瘤药物的新靶点。
[0004]因此，提高体外和活体的生物样本中白三烯A4水解酶的检测灵敏度对 白三烯A4水解酶的基础发展和临床研究具有重要的意义。

技术实现思路

[0005]针对现有技术所存在的技术问题，本专利技术提供一种荧光探针，用以解决 现有技术中白三烯A4水解酶的检测灵敏度不够高的缺陷，提高对体外和活 体的生物样本中白三烯A4水解酶检测的灵敏度。
[0006]为解决上述问题，本专利技术提供一种荧光探针，所述荧光探针的结构式如 式(
Ⅶ
)所示：
[0007][0008]本专利技术还提供了一种荧光探针的制备方法，用于制备如上所述的荧光探 针，包括如下步骤：
[0009]步骤S1、合成2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈；
[0010]步骤S2、所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈和对乙酰氨基苯甲醛 反应，合成2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈；
[0011]步骤S3、所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈和 4
‑
(苄氧基)
‑2‑
((叔丁氧基羰基)氨基)
‑4‑
氧代丁酸反应，合成所述荧光探针。
[0012]根据本专利技术提供的一种荧光探针的制备方法，所述步骤S1中合成所述 2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈采用如下方法：以异佛尔酮和丙二腈为 反应原料，乙醇为溶剂，在哌啶催化下进行反应，得到所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基 环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈。
[0013]根据本专利技术提供的一种荧光探针的制备方法，所述异佛尔酮和丙二腈的 摩尔比在1:1至1:3范围内，所述反应的温度在80至100℃范围内，所述反 应的时间在6至12h范围内。
[0014]根据本专利技术提供的一种荧光探针的制备方法，所述步骤S2中合成所述 2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈采用如下方法：在惰性 气体保护下，以乙酸和哌啶为催化剂，所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙 二腈和所述对乙酰氨基苯甲醛在甲苯中进行反应，得到所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯 乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈，且所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑ꢀ
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈的构型为E构型。
[0015]根据本专利技术提供的一种荧光探针的制备方法，所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
ꢀ‑2‑
烯基)
‑
丙二腈和所述对乙酰氨基苯甲醛的摩尔比在1:1至1:3范围内，所 述反应温度在100至130℃范围内，所述反应的时间在6至12h范围内。
[0016]根据本专利技术提供的一种荧光探针的制备方法，所述步骤S3中合成所述 荧光探针采用如下方法：将所述4
‑
(苄氧基)
‑2‑
((叔丁氧基羰基)氨基)
‑4‑
氧代 丁酸、N,N
‑
二异丙基乙胺和2
‑
(7
‑
氮杂苯并三氮唑)
‑
N,N,N',N'
‑
四甲基脲六氟磷 酸酯在二氯甲烷中反应第一预设时长后，加入所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯 基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈，并反应第二预设时长，得到粗产物，将 所述粗产物经过分离和纯化后，得到所述荧光探针。
[0017]根据本专利技术提供的一种荧光探针的制备方法，所述4
‑
(苄氧基)
‑2‑
((叔丁 氧基羰基)氨基)
‑4‑
氧代丁酸、所述N,N
‑
二异丙基乙胺和所述2
‑
(7
‑
氮杂苯并 三氮唑)
‑
N,N,N',N'
‑
四甲基脲六氟磷酸酯的摩尔比在1:1:1至1:2:2范围内，且 所述4
‑
(苄氧基)
‑2‑
((叔丁氧基羰基)氨基)
‑4‑
氧代丁酸的构型为S构型，所述 反应的温度为常温，所述第一预设时长在6至12h范围内。
[0018]根据本专利技术提供的一种荧光探针的制备方法，所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯 基)
‑
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种荧光探针，其特征在于，所述荧光探针的结构式如式(
Ⅶ
)所示：2.一种荧光探针的制备方法，其特征在于，用于制备如权利要求1所述的荧光探针，包括如下步骤：步骤S1、合成2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈；步骤S2、所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈和对乙酰氨基苯甲醛反应，合成2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈；步骤S3、所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈和4
‑
(苄氧基)
‑2‑
((叔丁氧基羰基)氨基)
‑4‑
氧代丁酸反应，合成所述荧光探针。3.根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中合成所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈采用如下方法：以异佛尔酮和丙二腈为反应原料，乙醇为溶剂，在哌啶催化下进行反应，得到所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈。4.根据权利要求3所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述异佛尔酮和丙二腈的摩尔比在1:1至1:3范围内，所述反应的温度在80至100℃范围内，所述反应的时间在6至12h范围内。5.根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中合成所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈采用如下方法：在惰性气体保护下，以乙酸和哌啶为催化剂，所述2
‑
(3,5,5
‑
三甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈和所述对乙酰氨基苯甲醛在甲苯中进行反应，得到所述2
‑
(3
‑
(4
‑
氨基苯乙烯基)
‑
5,5
‑
二甲基环己
‑2‑
烯基)
‑
丙二腈，且所述2
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：万星霞，刘诗宇，汪献旺，龚权，
申请(专利权)人：万星霞，
类型：发明
国别省市：