利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤中氨氮的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法，包括以下步骤：在风干土中加入KCl溶液，振荡后静置，取上清液进行过滤，得待测液；用(NH4)2SO4配制成梯度浓度的标准溶液系列，吸光度检测，以吸光度与该标准溶液系列所对应的铵的质量浓度绘制标准曲线；待测液所得的吸光度代入上述标准曲线中，获得待测液中铵的质量浓度p，最终根据公式计算土壤中氨氮含量。本发明专利技术是一种基于土壤氨氮测定前处理技术、利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤中氨氮的方法，该方法具有快速、操作简便、结果准确的优势。结果准确的优势。

【技术实现步骤摘要】
利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤中氨氮的方法


[0001]本专利技术涉及一种利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤中氨氮的检测方法。

技术介绍

[0002]目前国内对土壤中氨氮的测定用蒸馏
‑
滴定法或靛酚蓝比色法测定土壤中NH
4+
浓度。蒸馏
‑
地方法的原理为用2mol/LKCl浸提土壤，将吸附在土壤胶体上的NH
4+
及水溶性NH
4+
浸提出来。取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO蒸馏使溶液成微碱性，蒸出的NH
4+
以H3BO3吸收，用标准酸溶液滴定，可计算土壤中NH
4+
‑
N的含量。蒸馏
‑
滴定法适用于氨氮含量较高时(氨氮含量需≥0.2mg/L)的测定，氨氮测定上限可达1000mg/L，具有较高的准确度和精确度，但蒸馏
‑
滴定法操作繁琐，试剂用量大且蒸馏所需时间长，不适宜快速大批量测定土壤氨氮；靛酚蓝比色法原理为用2mol/LKCl浸提土壤，将吸附在土壤胶体上的NH
4+
及水溶性NH
4+
浸提出来。土壤浸出液中的NH
4+
‑
N在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料，溶液颜色稳定，在含氮0.05
‑
0.5mg/L的范围内，吸光度与NH
4+
‑
N含量成正比。靛酚蓝比色法对氨氮具有特殊的敏感性和相关性，具有较高的准确度、精确度和敏感度，但所需试剂多且毒性大，读数易受土壤中Cu
2+
，Fe
3+
，Zn
2+
等多种金属离子的干扰，需加入掩蔽剂消除相关离子的干扰，且显色时间需要1h。
[0003]专利技术人所在课题组在2014～2016年时与公司合作，完成了淡水水质氨氮快速检测方法的开发，且成功运用到淡水养殖用水的氨氮检测。该检测方法与国标法无显著性差异，加标回收率为96％
‑
106％，抗干扰能力增强且有效缩短了检测时间。所开发的氨氮水杨酸检测试剂盒已成为市售产品。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是提供一种基于土壤氨氮测定前处理技术的、利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤中氨氮的方法，该方法具有快速、操作简便、结果准确的优势。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法，包括以下步骤：
[0006]1)、土壤前处理技术：
[0007]称取5.00g风干土(含水率≤5％)作为待测样品，加入0.9～1.1mol/LKCl溶液25mL，放入振荡机中230
±
30r/min，振荡1
±
0.1h；取出静置，待土壤
‑
KCl悬浊液澄清后(静置时间约为10min)，取上清液进行过滤，得待测液；
[0008]说明：KCl溶液作为土壤氨氮浸提液；
[0009]2)、标准曲线：
[0010]依次进行以下步骤：
[0011]2.1)、配制标准溶液系列：用(NH4)2SO4配制成梯度浓度的标准溶液系列；
[0012]2.2)、吸光度检测：
[0013]取4mL标准溶液系列，加入6mL氨氮试剂Ⅰ，摇匀，然后加1包氨氮试剂Ⅱ，摇匀溶解，静置反应18～22分钟后在650nm处比色测得相应的吸光度；
[0014]所述氨氮试剂Ⅰ、氨氮试剂Ⅱ均来自氨氮水杨酸检测试剂盒，氨氮试剂Ⅱ(B检测试剂)的重量为0.45
±
0.05g；
[0015]氨氮水杨酸检测试剂盒为杭州陆恒生物科技有限公司的氨氮水杨酸检测试剂盒；
[0016]2.3)、制备标准曲线：以吸光度与该标准溶液系列所对应的铵的质量浓度绘制标准曲线；
[0017]3)、试剂盒法步骤：
[0018]依次进行以下步骤：
[0019]3.1)、取步骤1)所得的4mL待测液替代4mL标准溶液系列，按照上述步骤2.2)的吸光度检测，得到待测液吸光度；
[0020]3.2)、将3.2)所得的待测液吸光度代入2.2)所得的标准曲线中，获得待测液中铵的质量浓度p；
[0021]3.3)、根据公式计算土壤中氨氮含量(mg/kg)＝p*V/m；
[0022]其中p为标准曲线上读得浓度，mg/L；V为加入KCl溶液体积，L；m为风干土质量，kg。
[0023]本方法中，V＝0.025L；m＝0.005kg。
[0024]作为本专利技术的利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法的改进：
[0025]步骤2.1)：用(NH4)2SO4配制2mg/L铵中间使用液，稀释得到质量浓度分别为0.40，0.80，1.20，1.60，2.00mg/L的标准溶液系列；并设置水作为浓度为0.00的标准溶液；
[0026]将上述每个浓度的标准溶液分别进行后续的步骤2.2)；
[0027]步骤2.3)所得的标准曲线方程为y＝3.5292x
‑
0.6487；
[0028]y代表氨氮浓度，数据单位为mg/L；x代表显色溶液在650nm处的吸光度值。
[0029]作为本专利技术的利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法的进一步改进：
[0030]所述步骤1)中，KCl溶液的浓度为1mol/L。
[0031]作为本专利技术的利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法的进一步改进：
[0032]所述步骤2.2)中的反应时间为20分钟。
[0033]作为本专利技术的利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法的进一步改进：
[0034]所述步骤1)中，过滤所用滤网的滤径为1
‑
3μm；过滤的目的是便于保存，消除土壤杂质对比色的影响；所述待测液于4℃保存待用。
[0035]作为本专利技术的利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法的进一步改进：
[0036]每个待测样品设置三个重复，最终所得的土壤中氨氮含量取三个重复的平均值，三个重复测定值用于计算相对标准偏差验证精确度，相对标准偏差计算公式为:
[0037][0038]其中n表示重复次数，即为3；x
i
为测定值；为平均值。
[0039]本专利技术的方法特点是建立测定土壤氨氮测定前处理技术，利用优选浓度为1mol/L氯化钾浸提土壤中的氨氮，然后利用氨氮水杨酸试剂盒来测定氨氮含量，将测定水质氨氮
的氨氮水杨酸试剂盒应用于土壤氨氮的测定。本专利技术方法简便、快速、测试结果准确、应用土壤类型广泛、适宜小批量样品测定，具有广阔的应用前景。
[0040]综上，本专利技术为缩短土壤氨氮检测时间，简化操作步骤，提供一种土壤氨氮前处理技术，并将氨氮水杨酸试剂盒应用于土壤氨氮的测定。
具体实施方式
[0041]下面结合具体实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.利用水质氨氮快速检测试剂盒测定土壤氨氮的方法，其特征在于包括以下步骤：1)、土壤前处理技术：称取5.00g风干土作为待测样品，加入0.9～1.1mol/LKCl溶液25mL，放入振荡机中230
±
30r/min，振荡1
±
0.1h；取出静置，待土壤
‑
KCl悬浊液澄清后，取上清液进行过滤，得待测液；2)、标准曲线：依次进行以下步骤：2.1)、配制标准溶液系列：用(NH4)2SO4配制成梯度浓度的标准溶液系列；2.2)、吸光度检测：取4mL标准溶液系列，加入6mL氨氮试剂Ⅰ，摇匀，然后加1包氨氮试剂Ⅱ，摇匀溶解，静置反应18～22分钟后在650nm处比色测得相应的吸光度；所述氨氮试剂Ⅰ、氨氮试剂Ⅱ均来自氨氮水杨酸检测试剂盒，氨氮试剂Ⅱ的重量为0.45
±
0.05g；2.3)、制备标准曲线：以吸光度与该标准溶液系列所对应的铵的质量浓度绘制标准曲线；3)、试剂盒法步骤：依次进行以下步骤：3.1)、取步骤1)所得的4mL待测液替代4mL标准溶液系列，按照上述步骤2.2)的吸光度检测，得到待测液吸光度；3.2)、将3.2)所得的待测液吸光度代入2.2)所得的标准曲线中，获得待测液中铵的质量浓度p；3.3)、根据公式计算土壤中氨氮含量(mg/kg)＝p*V/m；其中p为标准曲线上读得浓度，mg/L；V为加入KCl溶液体积，L；m...

【专利技术属性】
技术研发人员：张奇春，刘小婷，吴丹，刘英，杨文叶，王京文，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：