一种环β-1,2-葡聚糖与姜黄素包合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种环β

【技术实现步骤摘要】
一种环
β
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1,2
‑
葡聚糖与姜黄素包合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种环β
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1,2
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葡聚糖与姜黄素包合物及其制备方法，属于生物


技术介绍

[0002]环β
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1,2
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葡聚糖(Cyclicβ
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1,2
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glucans)是指由葡萄糖单体组成，通过β
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1,2糖苷键连接而成的一类环状多糖，聚合度分布为17～25，在某些菌株中聚合度可达到40。环β
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1,2
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葡聚糖分为无支链结构和有支链结构，有支链结构的取代基包括磷酸甘油酯基，甲基丙二酰基以及琥珀酰基。并且聚合度和取代基在不同的细菌种类中有很大差异。因为环β
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1,2
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葡聚糖与环糊精的结构极其相似，均是由葡萄糖单体组成的环状结构。
[0003]姜黄素(curcumin)，其结构式如下：是从姜科姜黄属的一些植物的根茎中提取的一种天然的多酚类化合物，为橙黄色结晶粉末，难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂。具有抗氧化作用、抗炎作用、抗肿瘤作用等多种生理生化活性，日益受到国内外学者的关注。
[0004]姜黄素具有抗氧化、抗肿瘤、抗肿瘤和降血脂等作用，但姜黄素溶解性差、口服生物利用度低等缺点，导致它无论在医药保健品领域或者化妆品行业的应用受到了限制。目前，市场可以买到的姜黄根粉和含有姜黄素的保健产品多是进口产品。产品种类丰富，有姜黄素胶囊、片剂、茶和功能饮料，主要功效为抗氧化及保肝等作用。但由于姜黄根粉和姜黄素的溶水性较差，并容易分解等特点，大大阻碍了姜黄素在功能性食品以及保健品中的应用。同时中国已经进入老龄化社会，养生保健，提高生命质量越来越成为人们对保健品和功能性食品的要求。姜黄素是目前公认的对预防和治疗老年痴呆有效的天然化合物。因此，该类保健品和功能性食品的推出一定会受到市场的欢迎。
[0005]但姜黄素的水溶性低、生物利用度低、易降解、稳定性差等特性，限制其在临床上的广泛应用。因此，增加姜黄素的水溶性从而提高其生物利用度显得尤为重要。

技术实现思路

[0006]为了得到一种增加姜黄素的水溶性的方法，本专利技术采用环β
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1,2
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葡聚糖与姜黄素进行包合，由于环β
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1,2
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葡聚糖具有较强水溶性(环β
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1,2
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葡聚糖溶解度为250g/L；环糊精为18g/L)，且聚合度较环糊精聚合度大(环β
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1,2
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葡聚糖聚合物为17
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25，最大者为40；环糊精的聚合度为6
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12)，环状空腔直径更大(环β
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1,2
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葡聚糖空腔直径为0.88～1.30nm；环糊精为0.85nm)。单位体积的环β
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1,2
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葡聚糖可以包合更多的物质、携带更大的分子。
[0007]本专利技术首先提供了一种环β
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1,2
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葡聚糖的制备方法，所述方法包括以下步骤：
[0008](1)以放射型根瘤菌(Rhizobium radiobacter)ATCC 1333为发酵菌株，将其种子液接种至发酵培养基中，发酵制备得到发酵上清液；
[0009](2)对发酵上清液进行纯化，制备得到环β
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1,2
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葡聚糖。
[0010]在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)为：将种子液以体积比10％～15％的接种量接种于发酵培养基中，转化温度为30～33℃。
[0011]在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)为，将放射型根瘤菌(Rhizobium radiobacter)ATCC1333在种子培养基中活化，获得种子液；将种子液以体积比为10％～15％的接种量接种于7
‑
L发酵罐中，发酵获得发酵液；将发酵液离心并纯化获得环β
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1,2
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葡聚糖。
[0012]在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)为：将放射型根瘤菌(Rhizobium radiobacter)ATCC1333在种子培养基中活化，获得种子液；将种子液以体积比10％～15％的接种量接种于7
‑
L发酵罐中，转化温度30℃，两阶段控制pH，设置初始通气比1vvm，初始转速400r/min为100％DO值，发酵获得发酵液；将发酵液离心获得发酵上清液。
[0013]在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵的反应条件为：30～33℃，200rpm的条件下培养24h。
[0014]在本专利技术的一种实施方式中，所述两阶段控制pH为，发酵前期菌种生长期(发酵0～24h)，控制pH为7.0，发酵24h后，为产糖期，控制pH为7.0。
[0015]在本专利技术的一种实施方式中，所述种子培养基包括(g/L)：蛋白胨10，酵母膏2，MgSO4·
7H2O 1，调pH 7.0。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵培养基包括：甘露醇10～30g/L，谷氨酸1.0～5.0g/L，NaCl 0.2～0.6g/L，K2HPO
4 1.0～3.0g/L，MgSO4·
7H2O 0.2～0.6g/L，CaCl2·
2H2O 0.02～0.06g/L，微量元素0.1L/L；
[0017]微量元素母液：FeCl3·
6H2O 2.5g/L，MnCl2·
4H2O 1g/L，Na2MoO4·
2H2O 0.01g/L，ZnSO4·
7H2O 0.01g/L，CuSO4·
5H2O 0.01g/L，H3BO
3 0.01g/L，CoCl2·
6H2O 0.01g/L，生物素0.01g/L，硫胺素0.01g/L。
[0018]在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵培养基为：甘露醇20g/L，谷氨酸1.0g/L；NaCl 0.2g/L，K2HPO
4 1.0g/L，MgSO4·
7H2O 0.2g/L，CaCl2·
2H2O 0.04g/L，微量元素0.1L/L；
[0019]微量元素母液：FeCl3·
6H2O 2.5g/L，MnCl2·
4H2O 1g/L，Na2MoO4·
2H2O 0.01g/L，ZnSO4·
7H2O 0.01g/L，CuSO4·
5H2O 0.01g/L，H3BO
3 0.01g/L，CoCl2·
6H2O 0.01g/L，生物素0.01g/L，硫胺素0.01g/L。
[0020]在本专利技术的一种实施方式中，所述步骤(2)的纯化方法具体为：
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种环β
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1,2
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葡聚糖的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)以放射型根瘤菌(Rhizobium radiobacter)ATCC 1333为发酵菌株，将其种子液接种至发酵培养基中，发酵制备得到发酵上清液；(2)对发酵上清液进行纯化，制备得到环β
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1,2
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葡聚糖。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)的方法具体为：将种子液以体积比为10％～15％的接种量接种于发酵培养基中，转化温度为30～33℃。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)的纯化方法具体为：步骤1：将步骤(1)制备得到的发酵上清液旋转蒸发浓缩，取上清液，并加入无水乙醇进行孵育后，取上清液浓缩后，得到浓缩溶液；将无水乙醇添加到浓缩溶液中，进行醇沉后，取上清液并浓缩至原体积的1/5～1/10，得到浓缩液；步骤2：向步骤1得到的浓缩液中加入十倍体积无水乙醇，得到混合物，并将混合物进行醇沉后，取沉淀并去除有机试剂后，冻干得到粗寡糖粉末；步骤3：将步骤2中的粗寡糖粉末加水配制成溶液，除蛋白后，使用石墨化碳固相萃取小柱进行纯化；将石墨化碳固相萃取小柱采用乙腈活化，并用水淋洗后上样，采用不同浓度的乙腈对样品进行洗脱，取10
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20％的乙腈洗脱液作为固相萃取纯化的样品；步骤4：收集步骤3经过固相萃取纯化的样品，旋蒸浓缩去除乙腈，冷冻干燥浓缩，得到预处理好的样品；步骤5：将步骤4得到的样品溶于水中，制备得到寡糖超纯水溶液，将该溶液注入DEAE
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Sepharose ...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹晓北，吴传超，朱莉，蒋芸，张洪涛，吴剑荣，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：