一种戊糖片球菌He10-a-1及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)He10

【技术实现步骤摘要】
一种戊糖片球菌He10
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1及其用途


[0001]本专利技术属于生物
更具体地，本专利技术涉及一种戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)He10
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1，还涉及戊糖片球菌He10
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1的用途。

技术介绍

[0002]国内外现有一些地区的重金属污染相当严重，并且对人体危害较大，逐渐成为危害 人类健康中的最主要问题之一。目前，人和动物体铅急性中毒通常服用巯基类化合物(二 巯基丙醇(BAL)、二巯基丙磺酸盐(DMPS)等)进行解毒，但是50％的病人会产生 副作用，主要表现是发烧、心跳过速、恶心、呕吐、盗汗，可能引起组胺的释放。乳酸 菌是食品发酵中应用广泛、安全的微生物，且易培养、繁殖速度快，越来越多的报道发 现其对于重金属铅具有良好的耐受性和吸附能力，但对实际应用到人体内作为重金属新 型生物吸附剂的研究尚处于起步阶段。
[0003]戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)He10
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1作为益生乳酸菌被广泛应用到发酵 肉制品、发酵乳制品、发酵蔬菜等食品加工和发酵饲料中，例如CN 112205525 A公开 了一种奶牛饲养用生物发酵饲料及其制备工艺，CN 111944732 A公开了一种利用戊糖片 球菌C53改善发酵果蔬风味品质的方法，CN 110129219 A公开了一种戊糖片球菌可作 为饲料添加剂来预防玉米赤霉烯酮对动物的毒性影响，CN 109673960 A提供一种包含 戊糖片球菌为复合菌发酵鹿肉干及其制备方法，CN 107099482 A提供一种戊糖片球菌 T036在牛乳发酵中的应用，CN 106222103 A公开了一株产胞外多糖的戊糖片球菌及其 作为益生菌或抗氧化产品用于食品、医药、化妆品等领域的应用。但是，戊糖片球菌在 防治重金属方面未见报道。
[0004]因此，本专利技术人针对现有技术状况，在通过大量实验研究与分析总结的基础之上终 于完成了本专利技术。

技术实现思路

[0005][要解决的技术问题][0006]本专利技术的目的是提供一种戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)He10
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1。
[0007]本专利技术的另一个目的是提供所述戊糖片球菌He10
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1的用途。
[0008][技术方案][0009]本专利技术是通过下述技术方案实现的。
[0010]本专利技术涉及一种戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)He10
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1，该菌株已于2021 年10月19日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCC No.23628。
[0011]本专利技术还涉及所述的戊糖片球菌He10
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1在制备高耐受和高吸附重金属铅微生物 制剂中的用途。
[0012]根据本专利技术的一种优选方式，高耐受和高吸附重金属铅微生物制剂制备方法的制
上，在1mL亚油酸乳化液、0.5mL pH＝7.2 PBS缓冲液、0.2mL浓度为以重量计0.01％ 的FeSO4与0.2mL浓度为以重量计0.01％的抗坏血酸混合介质中在50℃条件下的抑制 脂质过氧化能力达到61.65％以上。
[0030]根据本专利技术的另一种优选方式，所述的乳酸菌微生物制剂在发酵食品或发酵饲料中 的用途。
[0031]根据本专利技术的另一种优选方式，所述的发酵食品是馒头、面包、果酒或乳饮料；所 述的乳酸菌微生物制剂在发酵食品中的用量是以重量计1.0～2.0％。
[0032]根据本专利技术的另一种优选方式，所述的发酵饲料是鱼饲料、鸡饲料、猪饲料或羊 饲料；所述的乳酸菌微生物制剂在发酵饲料中的用量是以重量计5.0～8.0％。
[0033]下面将更详细地描述本专利技术。
[0034]本专利技术涉及一种戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)He10
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1，该菌株已于2021 年10月19日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCC No.23628。
[0035]高抗重金属铅乳酸菌筛选与驯化方法如下：
[0036](i)采用常规菌株采集方法从内蒙古包头钢铁厂重金属污染区、包头黄河流段污染 区和白云鄂博矿区采集分离得到26株乳酸菌。
[0037](ii)高耐受重金属铅筛选驯化
[0038]采集分离得到的26株乳酸菌采用含重金属铅连续培养方法(李畅，题目“具有潜 在益生特性的乳酸菌对铅吸附特性及吸附机制的研究”，内蒙古农业大学，2018年。) 进行了高耐受重金属铅的筛选与驯化，其中12株菌株对铅的耐受量达到3600～ 6000mg/L，它们分别记为植物乳杆菌HeF
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1、粪肠球菌HeF
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4、戊糖片球菌HeF
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2、 食窦魏斯氏菌HeF
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1、粪肠球菌HeE
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a
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2、食窦魏斯氏菌He8
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2、戊糖片球菌HeF
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3、 清酒乳杆菌He6
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b
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1、戊糖片球菌He10
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1、动物乳杆菌HeF
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h
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1、戊糖片球菌He9
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b
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1、 戊糖片球菌HeF
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f
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3，这些菌株均保藏于内蒙古农业大学食品科学与工程学院微生物实 验室中。
[0039](iii)高吸附重金属铅菌株筛选
[0040]将上述12株高耐受重金属铅菌株接种于MRS培养基中，在温度37℃下培养24h， 得到第一代培养物；第一代培养物按照MRS培养基体积2％的接种量接种于MRS培养 基中，在温度37℃下培养24h，得到第二代培养物；第二代培养物按照MRS培养基体 积2％的接种量接种于MRS培养基中，在温度37℃下培养24h，得到第三代培养物。 第三代培养物在转速4000r/min下离心10min，弃去上清，使用等量的无菌超纯水洗涤 离心分离菌体3次，收集菌泥，使用少量超纯水制成菌悬液。在48孔方形深孔板中加 入1.4mL浓度为50mg/L的pH6.5铅离子水溶液，加入菌悬液，使铅离子水溶液中的菌 体终浓度达到5g/L。利用深孔摇床培本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)He10
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1，该菌株已于2021年10月19日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCCNo.23628。2.根据权利要求1所述的戊糖片球菌He10
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1在制备高耐受和高吸附重金属铅微生物制剂中的用途。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于高耐受和高吸附重金属铅微生物制剂制备方法的制备步骤如下：A、菌种活化挑取一环甘油保存的戊糖片球菌He10
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1接种于MRS培养基中，在温度37℃的条件下培养24h，得到含有5～6
×
107cfu/ml的第一代培养物；B、扩大培养按照MRS培养基体积计2～4％的接种量，将步骤A得到的第一代培养物接种于MRS培养基中，在温度37℃的条件下进行第二代培养24h，得到含有7～9
×
107cfu/ml的第二代培养物；然后，按照MRS培养基体积计2～4％的接种量，将所述第二代培养物接种于MRS培养基中，在温度37℃的条件下进行第三代培养24h，得到含有2～5
×
109cfu/ml的第三代培养物；C、离心分离将步骤B得到的第三代培养物在转速3500～4500r/min的条件下离心分离8～12min，得到的上清弃去，得到的沉淀物按照它与无菌生理盐水相同重量用无菌生理盐水洗涤2～4次，每次洗涤后使用离心机进行离心分离1～3min，得到的沉淀物为含有3～4
×
10
10
个/克戊糖片球菌He10
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a
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1的菌泥；D、配制保护剂将脱脂乳、蔗糖、谷氨酸钠与甘油溶于蒸馏水中，得到含有以重量计8～12％脱脂乳、8～12％蔗糖、4～6％谷氨酸钠与2～4％甘油的水溶液为保护剂；E、添加保护剂按照以克计菌泥与以毫升计保护剂的比为1：8～12，把步骤D得到的保护剂添加到步骤C得到的戊糖片球菌He10
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a
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1菌泥中，使用振荡搅拌设备将它们混匀，得到含有保护剂的菌泥；F、冷冻干燥：将步骤E得到的含有保护剂的菌泥装入冻存盘，在液氮中预冷冻3～4min，再将其迅速放入真空冷冻干燥机中，在温度
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48℃～
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53℃与压力6...

【专利技术属性】
技术研发人员：田建军，贺银凤，贺敏，李畅，顾悦，张开屏，张保军，张亮，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：