一种具有免疫增强作用的血红栓菌均一多糖及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有免疫增强作用的血红栓菌均一多糖及其应用。本发明专利技术制备血红栓菌均一多糖并以该多糖为活性成分制备药物组合物，应用在以增强免疫为目的的疾病治疗中。该多糖是从血红栓菌子实体中提取分离纯化后的均一多糖TS2

【技术实现步骤摘要】
一种具有免疫增强作用的血红栓菌均一多糖及其应用


[0001]本专利技术属于医药领域，尤其涉及一种具有免疫增强作用的血红栓菌多糖结构及其活性和以该多糖为活性组分的组合物，以及它们在免疫佐剂中的应用。

技术介绍

[0002]人体免疫系统包括先天性免疫系统和获得性免疫系统，与机体其他系统相互协调，共同维持机体内环境稳定和生理平衡的功能。作为机体识别、杀伤、清除入侵异物和癌变细胞的第一道防线，巨噬细胞在抵抗微生物感染和癌症预防的防御系统中发挥着重要作用。多糖可以通过刺激巨噬细胞、增强巨噬细胞的吞噬能力、促进相关细胞因子的分泌、促进淋巴细胞的增值、激活补体等方式调节免疫应答。真菌多糖，作为真菌子实体中的重要活性成分，因其高效的免疫调节作用和毒副作用小的特点，已成为目前国内外众多领域的研究热点。
[0003]血红栓菌(Trametes sanguinea)，是一种药用真菌，属于多孔菌科栓菌属，分布于吉林、河北、山西、陕西等地；子实体侧生无柄，木栓质，菌盖扁半球形，单生至瓦状叠生，橙色至红色，有微细绒毛至无毛，稍有皱纹；以干燥子实体入药，味微辛、涩，性温，具有祛风除湿，清热解毒，行气，止血，止痒等功效。其扶正驱邪的药用功效与现代药理的免疫调节作用不谋而合。但目前对其研究主要集中于漆酶类物质，对其中富含的多糖成分研究甚少，现代药理学研究表明，多糖是真菌中的重要活性成分，其具有安全、无毒、生物活性学活性的优良特性，对血红栓菌多糖的结构和活性研究可推动该类物质在免疫佐剂中的应用，为栓菌属中药资源的开发利用提供科学依据。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种具有免疫增强作用的血红栓菌均一多糖及其应用。本专利技术中的血红栓菌均一多糖具有显著的免疫增强作用，且对骨髓源性巨噬细胞无细胞毒作用；其高效、低毒的成药性优势显示了其作为免疫佐剂药物的独特优势。
[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：一种血红栓菌均一多糖，结构如下：
[0006]所述血红栓菌均一多糖为包含
→
3)
‑
α
‑
Glcp
‑
(1
→
和
→
4)
‑
β
‑
Glcp
‑
(1
→
两种连接片段以1:4比例构成的线性葡聚糖。
[0007]一种上述血红栓菌均一多糖的应用为，血红栓菌均一多糖具有免疫增强活性。
[0008]一种上述血红栓菌均一多糖的应用为，血红栓菌均一多糖具有特异的激活TLR4受体的作用。
[0009]一种上述血红栓菌均一多糖的应用为，治疗有效量的血红栓菌均一多糖与药学上可接受的载体结合，单独或者和其他物质组合用于制备免疫佐剂类药物。
[0010]进一步地，所述药物为汤剂、丸剂、散剂、膏剂、冲剂、口服液剂、胶囊剂或片剂等。
[0011]本专利技术的有益效果是：本专利技术血红栓菌均一多糖TS2
‑
2A为结构中同时含有α和β两种构型的新颖葡聚糖，且可特异性激活细胞表面的I型跨膜糖蛋白TRL4受体，促进NO和细胞因子在巨噬细胞中的释放，从而发挥免疫增强活性，具有此类结构的TLR4特异性激动剂暂未见报道。所述均一多糖，在生物医药领域具有多种潜在的应用前景，可望作为新型糖类免疫佐剂，用于多种疾病的预防及治疗。
[0012]与现有的药物相比，本专利技术所述血红栓菌均一多糖作为免疫佐剂应用的优势在于，多糖制备简单，结构新颖，无细胞毒活性，有显著的免疫增强作用。血红栓菌多糖制备过程所使用溶剂价廉易得且无毒；制备所得血红栓菌均一多糖结构新颖，无细胞毒活性，具有显著的免疫增强作用，是理想的开发免疫佐剂药物的先导化合物，具有良好的应用前景。
附图说明
[0013]为更清楚的说明本专利技术例，下面将对实施例中所需要的附图做简要地介绍：
[0014]图1为所述血红栓菌均一多糖结构的结构式；
[0015]图2为血红栓菌均一多糖的分子量及单糖组成分析结果示意图；其中，(A)为所述血红栓菌均一多糖的高效凝胶渗透色谱图；(B)为所述血红栓菌均一多糖的柱前衍生高效液相色谱图，(a)为单糖标准品的柱前衍生高效液相色谱图，(b)为所述血红栓菌均一多糖TS2
‑
2A的高效凝胶渗透色谱图；
[0016]图3为所述血红栓菌均一多糖的红外光谱图；
[0017]图4为血红栓菌均一多糖的各核磁图谱示意图；其中，(A)为所述血红栓菌均一多糖的1HNMR谱；(B)为所述血红栓菌均一多糖的
13
C NMR及部分DEPT谱；(C)为所述血红栓菌均一多糖的1H
‑
1H COSY谱；(D)为所述血红栓菌均一多糖的1H
‑
13C HSQC谱；(E)为所述血红栓菌均一多糖的1H
‑
13C HMBC谱；
[0018]图5为血红栓菌均一多糖的结构分析示意图；其中，(A)为所述血红栓菌均一多糖的一级质谱图；(B)为所述血红栓菌均一多糖降解所得2糖片段的二级质谱图；(C)为所述血红栓菌均一多糖降解所得3糖片段的二级质谱图；(D)为所述血红栓菌均一多糖降解所得4糖片段的二级质谱图；(E)为所述血红栓菌均一多糖降解所得5糖片段的二级质谱图；(F)为所述血红栓菌均一多糖降解所得6糖片段的二级质谱图；
[0019]图6为血红栓菌均一多糖的高级结构解析示意图；其中，(A)为所述血红栓菌均一多糖的电子力学显微镜的平面图；(B)为所述血红栓菌均一多糖的电子力学显微镜的立体图；
[0020]图7为血红栓菌均一多糖的免疫增强活性研究结果示意图；其中，(A)为所述血红栓菌均一多糖对RAW264.7细胞活力的影响；(B)为所述血红栓菌均一多糖对RAW264.7细胞分泌TNF
‑
α的影响；(C)为所述血红栓菌均一多糖对RAW264.7细胞分泌NO的影响；(D)为所述血红栓菌均一多糖对RAW264.7细胞TNF
‑
αmRNA表达的影响；(E)为所述血红栓菌均一多糖对
RAW264.7细胞iNOS mRNA表达的影响；***表示样品组与空白组的比较，其显著性水平p<0.001；
[0021]图8为血红栓菌均一多糖发挥免疫增强活性的机制研究结果示意图；其中，(A)为TLR4拮抗剂阻断前后所述不同浓度血红栓菌均一多糖对RAW264.7细胞TNF
‑
α分泌的影响；(B)为血红栓菌均一多糖对TLR4
+/+
和TLR4
‑
/
‑
小鼠TNF
‑
αmRNA表达水平的影响；(C)为血红栓菌均一多糖对TLR4
+/+
和TLR4
‑
/
‑
小鼠IL
‑
6mRNA表达水平的影响；(D)为血红栓菌均一多糖对TLR4
+/+
和TLR4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血红栓菌均一多糖，其特征在于，结构如式(I)所示：所述血红栓菌均一多糖为包含
→
3)
‑
α
‑
Glcp
‑
(1
→
和
→
4)
‑
β
‑
Glcp
‑
(1
→
两种连接片段以1:4比例构成的线性葡聚糖。2.一...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨波，闫孟霞，王一奇，张梦婷，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：