乳清蛋白自组装凝胶的制备方法技术

本发明专利技术公开了乳清蛋白自组装凝胶的制备方法。本发明专利技术探究了不同pH

【技术实现步骤摘要】
乳清蛋白自组装凝胶的制备方法


[0001]本专利技术属于生物材料
，具体涉及乳清蛋白自组装凝胶的制备方法。

技术介绍

[0002]乳清蛋白是奶酪加工中的副产物经特殊工艺浓缩精制获得的蛋白质，主要可分为浓缩乳清蛋白(WPC)，分离乳清蛋白(WPI)和乳清蛋白肽三大类，其具有较高的营养特性(生物活性较高、抗癌特性、提供能量和促进神经发育等)。乳清蛋白是亲水性较好的球状蛋白，其组成中含量最多的两大类分别为β
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乳球蛋白(约占乳清蛋白50％
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55％)和α
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乳白蛋白(约占乳清蛋白的20％
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25％)，除此之外还有牛血清蛋白(BSA)、免疫球蛋白(Ig)和乳铁蛋白(Lf)，乳清蛋白的功能特性与这些蛋白有关。
[0003]就乳清蛋白而言，不仅具有高含量的必需氨基酸，营养价值高，还拥有多种功能特性。蛋白质的功能特性是指食品在加工、储存、运输和消费过程中蛋白对食品产生影响的理化性质，可归纳为三类：结构性质(凝胶性和弹性等)；水合性质(溶解性、持水性和吸水性等)；表面性质(乳化性、起泡性、成膜性和配体结合等)。其凝胶性能将水分、脂肪风味物质等保留在内部，可改善食品质构、感官和风味，得到食品研究者的重视。此外，蛋白凝胶由于具有生物相容性与降解性、无毒和多尺度结构等特点，在日化用品、生物医学和载体等领域得到广泛应用。传统蛋白凝胶需10％以上的蛋白浓度才可制备成凝胶，且凝胶强度弱，容易受到应力诱发裂纹的形成，这些裂缝的扩展可能会影响凝胶网络结构的完整性，导致功能丧失并限制凝胶的使用寿命。为了克服传统凝胶的缺点，扩展其实际应用，需探索新型凝胶材料和技术。
[0004]自组装概念来源于生命科学，受天然蛋白质自组装启发，通过自组装法制备得纳米材料在载体与缓释、生物传感器、组织工程支架等领域有着广阔的应用前景，与其他方法相比具有简单易行、成本低、安全无毒、重复性好等优点而被关注。经自组装后蛋白质形成的聚集体因具有高度有序的β
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折叠而热稳定性高，同时具有良好的表面活性和流变学特性，可被用作良好的凝胶剂、增稠剂和泡沫稳定剂。因此我们选择用乳清蛋白通过温度
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pH梯度诱导形成不同形貌的乳清蛋白自组装体，以此为原料制备新型凝胶。

技术实现思路

[0005]为了克服传统凝胶的缺点，本专利技术提供了乳清蛋白自组装凝胶的制备方法。本专利技术第一目的在于制备获得乳清蛋白自组装凝胶；本专利技术第二目的在于调节pH和热处理制备出两种不同形貌的乳清蛋白自组装体，再以两种乳清蛋白自组装体为原料通过二价阳离子和简单热处理使其在水溶液中形成稳定的凝胶。
[0006]本专利技术具体是通过如下技术方案实现的：
[0007]乳清蛋白自组装凝胶的制备方法，包括如下步骤：
[0008]S1、将乳清蛋白溶于超纯水中，使其在室温下磁力搅拌2h充分溶解后得到总浓度为6％的乳清蛋白溶液，然后过夜水合；
[0009]S2、将S1水合后混合物离心沉淀，取中间清液过0.45μm纤维滤膜得到乳清蛋白混合液；
[0010]S3、将S2所得乳清蛋白混合液pH值分别调至2.0和7.0并水浴加热，加热后立即冰浴冷却得到两种乳清蛋白自组装体溶液并于4℃条件下保存；
[0011]S4、用NaOH将S3制得的两种乳清蛋白自组装体溶液pH值均调至7.5，分别缓慢加入CaCl2溶液并搅拌得到两种样品溶液；
[0012]S5、将S4所得两种样品溶液密封，然后分别水浴加热，加热后立即冰浴冷却至室温，4℃条件下过夜，得到纤维状/颗粒状乳清蛋白自组装凝胶。
[0013]进一步地，S1所述过夜水合在4℃条件下进行。
[0014]进一步地，S2所述离心转速为4000rpm，时间为15min。
[0015]进一步地，S3所述乳清蛋白混合液pH值采用5M HCl或5M NaOH调节。
[0016]进一步地，S3所述水浴加热的温度为90℃；其中，pH值调至2.0的乳清蛋白混合液水浴加热时间为5h，pH值调至7.0的乳清蛋白混合液水浴加热时间为20min。
[0017]进一步地，所述pH值调至2.0的乳清蛋白混合液加热冷却后得到纤维状乳清蛋白自组装体溶液。
[0018]进一步地，所述pH值调至7.0的乳清蛋白混合液加热冷却后得到颗粒状乳清蛋白自组装体溶液。
[0019]进一步地，S4加入CaCl2溶液需使最终得到的样品溶液的离子强度为100mM。
[0020]进一步地，S5所述水浴加热温度为80℃，时间为30min。
[0021]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0022]本专利技术制备得到两种不同形貌的乳清蛋白自组装体；利用制得的乳清蛋白自组装体为原料，制备获得了机械强度较大的弹性凝胶。本专利技术制备工艺可降低凝胶浓度和凝胶时间，大大降低了蛋白凝胶的成本，有利于扩展到工业生产。
附图说明
[0023]图1是未处理乳清蛋白溶液TEM图。
[0024]图2是6％乳清蛋白溶液在pH 2.0、90℃加热5h得到纤维状自组装体的TEM图。
[0025]图3是6％乳清蛋白溶液在pH 7.0、90℃加热20min得到颗粒状自组装体的TEM图。
[0026]图4是未处理乳清蛋白在6％、8％、10％蛋白浓度下凝胶图。
[0027]图5是纤维状自组装体溶液在6％、8％、10％蛋白浓度下凝胶图。
[0028]图6是颗粒状自组装体溶液在6％、8％、10％蛋白浓度下凝胶图。
[0029]图7是未处理乳清蛋白凝胶扫描电镜图。
[0030]图8是纤维状乳清蛋白自组装体制备的凝胶扫描电镜图。
[0031]图9是颗粒状乳清蛋白自组装体制备的凝胶扫描电镜图。
[0032]图10是未处理乳清蛋白温度扫描图。
[0033]图11是纤维状乳清蛋白自组装体温度扫描图。
[0034]图12是颗粒状乳清蛋白自组装体温度扫描图。
具体实施方式
[0035]为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。
[0036]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。
[0037]实施例1
[0038](1)将乳清蛋白溶于超纯水中，室温下磁力搅拌2h，4℃过夜保证完全水合；
[0039](2)室温下4000rpm离心15min，取中间清液过0.45μm纤维滤膜，使其乳清蛋白总浓度为6％；
[0040](3)采用5M HCl或5M NaOH将乳清蛋白溶液pH调节至2.0，随后于90℃的水本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.乳清蛋白自组装凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、将乳清蛋白溶于超纯水中，使其在室温下磁力搅拌2h充分溶解后得到总浓度为6％的乳清蛋白溶液，然后过夜水合；S2、将S1水合后混合物离心沉淀，取中间清液过0.45μm纤维滤膜得到乳清蛋白混合液；S3、将S2所得乳清蛋白混合液pH值分别调至2.0和7.0并水浴加热，加热后立即冰浴冷却得到两种乳清蛋白自组装体溶液并于4℃条件下保存；S4、用NaOH将S3制得的两种乳清蛋白自组装体溶液pH值均调至7.5，分别缓慢加入CaCl2溶液并搅拌得到两种样品溶液；S5、将S4所得两种样品溶液密封，然后分别水浴加热，加热后立即冰浴冷却至室温，4℃条件下过夜，得到纤维状/颗粒状乳清蛋白自组装凝胶。2.根据权利要求1所述乳清蛋白自组装凝胶的制备方法，其特征在于，S1所述过夜水合在4℃条件下进行。3.根据权利要求1所述乳清蛋白自组装凝胶的制备方法，其特征在于，S2所述离心转速为4000rpm，时间为15min。4.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟俊祯，吴静静，蒙晓琳，周磊，刘伟，刘成梅，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：