与癌干细胞特异性结合的适体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及与癌干细胞特异性结合的适体。根据本发明专利技术的适体与癌干细胞特异性结合，降低作为癌干细胞特征的细胞粘附、细胞增殖、抗癌剂耐药性和细胞迁移，具有优异的抗癌效果。因此，适体可以以多种方式用于癌症诊断、预后预测和治疗领域。测和治疗领域。测和治疗领域。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与癌干细胞特异性结合的适体及其用途


[0001]本专利技术涉及与癌干细胞特异性结合的适体。

技术介绍

[0002]癌组织中也存在可以像正常器官一样维持和使癌组织再生的癌干细胞。据报道，癌干细胞在体外悬浮培养中形成球体，形成球体的癌干细胞比原始细胞系具有更强的肿瘤启动能力。此外，由于癌干细胞参与癌症的发展、癌症的发生、复发或转移以及通过使施加了常规癌症治疗后减少的癌细胞再生而产生的对抗癌药物的抗性，因而防止癌干细胞的增殖在癌症治疗中很重要。
[0003]目前，在发达国家，能够获得诸如乳腺癌、肝癌、结直肠癌、和胰腺癌领域的癌干细胞信息。因此，需要对器官和组织中的癌干细胞进行研究，这可能与这些发达国家的研究方向有所不同。
[0004]在癌症的情况下，异质性即使在单个组织内也非常强，并且在抗癌治疗期间会表达对抗癌剂具有抗性的癌组织，因此这被认为是抗癌治疗失败的主要原因。据悉，癌干细胞是最高水平的表现出这种异质性特征的细胞，并且与对抗癌剂的抗性密切相关。
[0005]虽然通过一般抗癌治疗去除癌组织相对容易，但是，由于组织中所含或抗癌剂治疗后获得的癌干细胞的特征，尽管存在各种靶向治疗技术，癌细胞的耐药性仍不断表达，成为癌症患者治疗中必须克服的新近课题。为了开发靶向癌干细胞的抗癌治疗技术，有必要开发可以与癌干细胞中表达的标记性标志物特异性结合的抗体或适体。
[0006]另一方面，CD166最早被报道为一种活化白细胞粘附分子(ALCAM)，目前其表达在甲状腺癌、颈癌、肺癌和肝癌中均有所发现。特别地，据报道，CD166的表达与前列腺癌的转移潜能、胆管癌的侵袭性和乳腺癌的细胞凋亡规避有关，并且最近报道CD166有作为癌干细胞的标记性标志物的可能性。此外，据报道在作为正常干细胞的间充质干细胞中，CD166也与CD40、CD90和CD105一起表达。
[0007]另外，适体是具有稳定的三级结构的单链核酸(DNA、RNA或修饰的核酸)分子，具有能够以高亲和力和特异性与靶分子结合的特征。适体通常由40mer到120mer组成，可以以固有的高亲和力(通常为pM水平)和特异性与靶分子结合。临床癌症诊断和癌症治疗领域正在积极研究适体，原因如下。
[0008]1)不会发生体内免疫排斥反应。
[0009]2)由于其体积非常小，其体内渗透和结合是有效的。
[0010]3)由于适体是通过化学合成生产的，因此其可以在短时间内以低成本生产。
[0011]4)适体比抗体具有更高的稳定性。适体可在常温下储存或运输，温度稳定性高。因此，适体对于需要长期和重复使用的诊断特别有用。
[0012]5)适体是可以通过多种方式修饰的核酸分子，因此其可以应用于各种研究和实验。
[0013]由于适体具有上述优点，因此适体可以以多种方式应用于临床癌症诊断和癌症治
疗领域。美国食品和药物管理局于2005年批准了首次开发的适体相关药物。

技术实现思路

[0014]技术问题
[0015]因此，本专利技术人开发了与癌干细胞中表达的CD166特异性结合的适体，且确认该适体降低癌干细胞的特性，以及对作为表达CD166的正常干细胞的间充质干细胞的增殖和功能没有影响。基于上述结果，本专利技术人完成了本专利技术。
[0016]因此，本专利技术的一个目的是提供与癌干细胞特异性结合的适体及包含其的组合物，该适体包含选自由SEQ ID NO：1至6表示的核酸序列组成的组中的至少一种核酸序列或其片段。
[0017]本专利技术的另一个目的是提供诊断癌症的方法，该方法包括使生物样品与特异性结合癌干细胞的适体反应。
[0018]本专利技术的另一个目的是提供治疗癌症的方法，该方法包括向对象施用与癌干细胞特异性结合的适体。
[0019]问题解决方案
[0020]为实现上述目的，本专利技术提供与癌干细胞特异性结合的适体，该适体包含选自由SEQ ID NO：1至6表示的核酸序列组成的组中的至少一种核酸序列或其片段。
[0021]此外，本专利技术提供用于诊断癌症的组合物，该组合物包含与癌干细胞特异性结合的适体。
[0022]此外，本专利技术提供用于诊断癌症的试剂盒，该试剂盒包含用于诊断癌症的组合物。
[0023]此外，本专利技术提供用于诊断癌症的方法，该方法包括使生物样品与特异性结合癌干细胞的适体反应。
[0024]此外，本专利技术提供用于预防或治疗癌症的药物组合物，该药物组合物包含与癌干细胞特异性结合的适体。
[0025]此外，本专利技术提供抗癌佐剂组合物，该抗癌佐剂组合物包含与癌干细胞特异性结合的适体。
[0026]此外，本专利技术提供用于预防或减轻癌症的食品组合物，该食品组合物包含与癌干细胞特异性结合的适体。
[0027]此外，本专利技术提供用于癌症特异性药物递送的组合物，该组合物包含与癌干细胞特异性结合的适体。
[0028]此外，本专利技术提供用于治疗癌症的方法，该方法包括向对象施用与癌干细胞特异性结合的适体。
[0029]专利技术效果
[0030]根据本专利技术的适体与癌干细胞特异性结合，降低细胞粘附能力、细胞增殖、耐药性和细胞迁移(其均为癌干细胞特征)，因此具有优异的抗癌效果。因此，该适体可以以多种方式用于癌症诊断、预后预测和治疗领域。
附图说明
[0031]图1表示通过RT
‑
PCR分析确认作为一般细胞培养方法的将A2780卵巢癌细胞贴附
在细胞培养皿上而培养的A2780卵巢癌细胞(A2780
‑
AD)中、以及通过对细胞进行三维培养以选择性扩增癌干细胞而培养的A2780
‑
SP卵巢癌干细胞系中的CD166表达获得的结果。
[0032]图2表示通过流式细胞术确认卵巢癌干细胞系A2780
‑
SP细胞中CD166表达而获得的结果。
[0033]图3表示通过确认从卵巢癌细胞系A2780分离的CD166表达细胞和非表达细胞中的CD166表达而获得的结果。
[0034]图4表示通过确认从卵巢癌细胞系A2780分离的CD166表达细胞和非表达细胞中的癌干细胞相关基因的表达而获得的结果。
[0035]图5表示通过确认从卵巢癌细胞系A2780分离的CD166表达细胞和非表达细胞的细胞增殖能力而获得的结果。
[0036]图6表示确认在从卵巢癌细胞系A2780分离的CD166表达细胞和非表达细胞的3D细胞培养期间通过癌细胞增殖导致的球状癌球体形成能力而获得的结果。
[0037]图7表示通过确认从卵巢癌细胞系A2780中分离的CD166表达细胞和非表达细胞的药物敏感性而获得的结果。
[0038]图8表示通过确认从卵巢癌细胞系A2780分离的CD166表达细胞和非表达细胞的细胞迁移而获得的结果。
[0039]图9表示通过确认在CD166的表达受到抑制的卵巢癌细胞系A2780中的癌干细胞相关基因的表达而获得的结果。
[0040]图10至图1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.与癌干细胞特异性结合的适体，所述适体包含选自由SEQ ID NO：1至6表示的核酸序列组成的组中的至少一种核酸序列或其片段。2.根据权利要求1所述的与癌干细胞特异性结合的适体，其中所述适体与CD166特异性结合。3.根据权利要求1所述的与癌干细胞特异性结合的适体，其中所述适体的大小为70mer至80mer。4.根据权利要求1所述的与癌干细胞特异性结合的适体，其中所述癌症为选自由胃癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、血癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼内黑色素瘤、子宫肉瘤、卵巢癌、直肠癌、肛门癌、结肠癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、小肠癌、内分泌癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肿瘤、尿道癌、前列腺癌、支气管癌和骨髓瘤组成的组中的至少一种。5.用于诊断癌症的组合物，所述组合物包含根据权利要求1所述的与癌干细胞特异性结合的适体。6.用于诊断癌症的试剂盒，所述试剂盒包含根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：金载皓，金大敬，
申请(专利权)人：株式会社海赛尔科技，
类型：发明
国别省市：