PPDPF在胰腺癌诊断及药物制备中的应用制造技术

本发明专利技术提供了胰腺祖细胞分化与增殖因子(PPDPF)在胰腺癌诊断及药物制备中的应用。本发明专利技术揭示了PPDPF在胰腺癌中高表达且促进胰腺癌的进展，其可以作为诊断或治疗的新型靶点。以其作为靶标，可开发抑制胰腺癌的药物，对胰腺癌或症状进行诊断、预后评估，以及进行治疗药物、诊断试剂的筛选。诊断试剂的筛选。

【技术实现步骤摘要】
PPDPF在胰腺癌诊断及药物制备中的应用


[0001]本专利技术属于生物技术和药物学领域，更具体地，本专利技术涉及PPDPF在胰腺癌诊断及药物制备中的应用。

技术介绍

[0002]胰腺癌是世界上最常见的癌症之一，被称为“癌症之王”。是一种恶性程度极高的肿瘤，其发病的隐蔽性高，中位生存期仅为3-6个月，5年生存率低于5％，为预后最差的肿瘤之一。胰腺导管腺癌(Pancreatic ductal adenocarcinoma，PDAC)是胰腺癌的最常见的病理类型，约占胰腺癌的90％。手术切除是唯一有可能治愈胰腺腺癌的方法。但是诊断对胰腺癌是一个重大的挑战，大多数患者被诊断出患胰腺癌时已经是晚期，即局部晚期或转移性肿瘤，这意味着80％-85％患者被诊断出胰腺癌时已经无法用手术切除了。若能发现胰腺癌新的诊断和治疗的靶标，对于改善胰腺癌的预后有非常重要的意义。
[0003]胰腺癌的传统治疗药物包括核苷类似物吉西他滨。厄洛替尼或白蛋白紫杉醇联合吉西他滨的疗法也显示出一定的治疗益处。尽管采取积极的治疗方案，但胰腺癌的中位生存期仍然仅在6个月左右。
[0004]目前，有关调控胰腺癌细胞浸润和转移的分子机制和细胞生物学特性尚不清楚。近年来，有关胰腺癌的发病机制，尤其是转移机制方面的研究成为热点。
[0005]本领域在研究的胰腺癌相关靶点包括：PI3激酶/Akt/mTOR通路、HER2信号通路、RAF/MEK/ERK通路、KRAS、表皮生长因子受体(EGFR)、JAK/ATAT信号通路、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、血管内皮生长因子受体通路(VEGF)、转化生长因子-Beta、血小板衍生的生长因子(PDGFs)、透明质酸、基质金属蛋白酶(MMPs)、Hh抑制剂、白蛋白结合性紫杉醇、PEP02(MM-398)、Endo TAG-1等。
[0006]虽然胰腺癌的生物学特征已被充分地研究，但新的分子靶点的确定进展却仍然是极为缓慢的，潜在的候选药物非常少，这可能是由于胰腺癌的遗传复杂性所致。另外，由于疾病存活时间短，很难有机会测试任何可能的免疫疗法或其它疗法的有效性。
[0007]因此，本领域迫切需要研究新的胰腺癌诊断或治疗靶点，从而为胰腺癌的疾病研究以及临床治疗提供新的途径。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供PPDPF在胰腺癌诊断及药物制备中的应用。
[0009]在本专利技术的第一方面，提供胰腺祖细胞分化与增殖因子的应用，用于：作为抑制胰腺癌的靶标；作为对胰腺癌进行诊断或预后的标志物；制备胰腺癌诊断或预后的诊断试剂；或作为筛选抑制胰腺癌的药物的靶标。
[0010]在本专利技术的另一方面，提供胰腺祖细胞分化与增殖因子的下调剂的应用，用于制备抑制胰腺癌的组合物。
[0011]在一个优选例中，所述的抑制胰腺癌包括：预防、缓解或治疗胰腺癌。
[0012]在另一优选例中，所述的组合物还用于：抑制胰腺癌细胞的非锚定依赖生长；抑制胰腺癌细胞的成瘤能力；抑制Erk和/或AKT308的磷酸化；和/或抑制RAS的活化。
[0013]在另一优选例中，所述胰腺祖细胞分化与增殖因子的下调剂包括(但不限于)：下调胰腺祖细胞分化与增殖因子活性的物质或下调胰腺祖细胞分化与增殖因子的表达、稳定性或减少其有效作用时间的物质。
[0014]在另一优选例中，所述下调剂包括选自(但不限于)：敲除或沉默胰腺祖细胞分化与增殖因子的试剂；特异性与胰腺祖细胞分化与增殖因子结合的结合分子(如抗体或配体)；针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的化学小分子拮抗剂或抑制剂；抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的胰腺癌细胞的非锚定依赖生长或成瘤的试剂；抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的Erk和/或AKT308的磷酸化的试剂；抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的RAS活化的试剂；或干扰胰腺祖细胞分化与增殖因子和效应分子相互作用的试剂。
[0015]在另一优选例中，所述敲除或沉默胰腺祖细胞分化与增殖因子的试剂包括(但不限于)：针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的CRISPR基因编辑试剂，特异性干扰胰腺祖细胞分化与增殖因子的编码基因表达的干扰分子，针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的同源重组试剂或定点突变试剂，所述同源重组试剂或定点突变试剂将胰腺祖细胞分化与增殖因子进行功能丧失性突变。
[0016]在另一优选例中，所述干扰分子包括siRNA、shRNA，miRNA，反义核酸等，或能形成所述siRNA、shRNA，miRNA，反义核酸等的构建体。
[0017]在另一优选例中，所述针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的CRISPR基因编辑试剂为sgRNA，其核苷酸序列如SEQ ID NO:19和/或SEQ ID NO:20所示。
[0018]在另一优选方式中，所述的PPDPF选自下组：(a)氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽；(b)将(a)所示的氨基酸序列经过一个或多个(如1～20个，1-10个，1-5个，1-3个或1-2个)氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的具有(a)或(b)多肽功能的PPDPF衍生物，或其活性片段；(c)序列与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列相比，同源性≥90％(如同源性≥92％，≥94％，≥96％，≥98％或≥99％)的PPDPF衍生物，或其活性片段。
[0019]在另一优选方式中，用于将sgRNA或干扰分子等下调剂引入细胞内的表达构建物(表达载体)包括：病毒载体，非病毒载体；较佳地，所述的表达载体包括：腺相关病毒载体，慢病毒载体，腺病毒载体。
[0020]在另一优选方式中，所述的胰腺癌包括(但不限于)：胰腺导管腺癌，胰腺上皮内瘤变。
[0021]在本专利技术的另一方面，提供特异性识别或扩增胰腺祖细胞分化与增殖因子的试剂的用途，用于制备对胰腺癌进行诊断或预后的诊断试剂或试剂盒。
[0022]在一个优选方式中，所述的试剂包括(但不限于)：特异性结合胰腺祖细胞分化与增殖因子蛋白的结合分子(如抗体或配体)；特异性扩增胰腺祖细胞分化与增殖因子基因的引物；特异性识别胰腺祖细胞分化与增殖因子基因的探针；或，特异性识别胰腺祖细胞分化与增殖因子基因的芯片。
[0023]在本专利技术的另一方面，提供一种用于抑制肿瘤的药物组合物或药盒，包括：胰腺祖细胞分化与增殖因子的下调剂；较佳地，所述下调剂为用于针对胰腺祖细胞分化与增殖因子进行基因编辑的sgRNA，其核苷酸序列如SEQ ID NO:19和/或SEQ ID NO:20所示。
[0024]在本专利技术的另一方面，提供一种筛选抑制胰腺癌的潜在物质的方法，所述方法包括：(1)用候选物质处理一表达体系，该体系表达胰腺祖细胞分化与增殖因子；和，(2)检测所述体系中胰腺祖细胞分化与增殖因子的表达或活性；若所述候选物质在统计学上下调(显著下调，如下调10％以上，20％以上，50％以上，80％以上等，或使之不表达或没有活性)胰腺祖细胞分化与增殖因子的表达或活性，则该候选物质是降低胰腺癌的潜在物质。
[0025]在一个优选方式中，步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.胰腺祖细胞分化与增殖因子的应用，用于：作为抑制胰腺癌的靶标；作为对胰腺癌进行诊断或预后的标志物；制备胰腺癌诊断或预后的诊断试剂；或作为筛选抑制胰腺癌的药物的靶标。2.胰腺祖细胞分化与增殖因子的下调剂的应用，用于制备抑制胰腺癌的组合物。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的组合物还用于：抑制胰腺癌细胞的非锚定依赖生长；抑制胰腺癌细胞的成瘤能力；抑制Erk和/或AKT308的磷酸化；和/或抑制RAS的活化。4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述胰腺祖细胞分化与增殖因子的下调剂包括：下调胰腺祖细胞分化与增殖因子活性的物质或下调胰腺祖细胞分化与增殖因子的表达、稳定性或减少其有效作用时间的物质。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述下调剂包括选自：敲除或沉默胰腺祖细胞分化与增殖因子的试剂；特异性与胰腺祖细胞分化与增殖因子结合的结合分子；针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的化学小分子拮抗剂或抑制剂；抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的胰腺癌细胞的非锚定依赖生长或成瘤的试剂；抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的Erk和/或AKT308的磷酸化的试剂；抑制由胰腺祖细胞分化与增殖因子介导的RAS活化的试剂；或干扰胰腺祖细胞分化与增殖因子和效应分子相互作用的试剂。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述敲除或沉默胰腺祖细胞分化与增殖因子的试剂包括：针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的CRISPR基因编辑试剂，特异性干扰胰腺祖细胞分化与增殖因子的编码基因表达的干扰分子，针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的同源重组试剂或定点突变试剂，所述同源重组试剂或定点突变试剂将胰腺祖细胞分化与增殖因子进行功能丧失性突变。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述针对胰腺祖细胞分化与增殖因子的CRISPR基因编辑试剂为sgRNA，其核苷酸序列如SEQ ID NO:19和/或SEQ ID NO:20所示。8.特异性识别或扩增胰腺祖细胞分化与增殖因子的试剂的用途，用于制备对胰腺癌进行诊断或预后的诊断试剂或试剂盒。9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述的试剂包括：特异性结合胰腺祖细胞分化与增殖因子蛋白的结合...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晶晶，倪谦枝，谢东，朱兵，郑茜文，
申请(专利权)人：中国科学院上海营养与健康研究所，
类型：发明
国别省市：