一种油梨的组织快繁方法技术

本发明专利技术涉及油梨培育技术领域，尤其涉及一种油梨的组织快繁方法，包括以下步骤：S1、外植体消毒，S2、诱导萌发，S3、芽条育壮培养，S4、芽条继代增值，S5、再生植株的生根培养，S6、炼苗移栽本发明专利技术利用腋芽、顶芽等外植体，通过去除顶端生长优势，诱导产生侧新芽和嫩枝，再通过侧嫩枝上去除顶端生长优势，诱导产生新的侧枝上新芽和嫩枝，通过这样无限诱导增殖，可产生大量的具有原优质性状的嫩芽条，再通过壮苗、生根等培养，产生大量的优质种苗，本技术不仅增加了油梨种苗繁殖系数，减少了嫁接的问题，同时解决了油梨生根困难，周期长的技术问题，为油梨种苗快速繁育提供核心技术。为油梨种苗快速繁育提供核心技术。

【技术实现步骤摘要】
一种油梨的组织快繁方法


[0001]本专利技术涉及油梨培育
，尤其涉及一种油梨的组织快繁方法。

技术介绍

[0002]油梨(PerseaamericanaMill)，又名鳄梨、牛油果，原产于中美洲及墨西哥湿润地区，是著名的热带、亚热带水果，也是木本油料树种之一。我国的海南、贵州、广东、广西、云南等省(区)均适宜栽培。油梨是营养价值极高的水果，含多种维生素、脂肪酸、蛋白质和矿质元素，其中80％的脂肪酸为亚油酸和亚麻酸等人体必需的不饱和脂肪酸，人体吸收率高达93.7％，被美誉为“森林黄油”。油梨也是高能食品，已被称为“水果粮食”。
[0003]油梨具有的营养和保健价值，一直为消费者所热衷和追捧。近几十年来，世界油梨种植面积和产量增长迅速，消费量与日俱增，在国际市场上长期处于供不应求状态。
[0004]而制约油梨产业化发展主要重要因素健康种苗快速繁育，现在适合油梨种植的各个产区种植区急速扩大种植面积，但种苗缺乏严重制约种植面积。现在国内主要依靠种子作为砧木繁殖，存在繁殖材料的单一性和局限性，没法快速、大规模地生产建康油梨种苗。
[0005]油梨为木本果树，制约组培苗快速繁育，主要是除了组培苗生根问题，还有就是多为组培快速繁育砧木为主，而直接组培具有优质性状的种苗较少。因此，我们提出了一种油梨的组织快繁方法用于解决上述问题。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种油梨的组织快繁方法。
[0007]一种油梨的组织快繁方法，包括以下步骤：
[0008]S1、外植体消毒：选择含芽油梨茎段，进行消毒，得到消毒完的外植体材料；
[0009]S2、诱导萌发：将外植体材料重新切除外植体两端，然后按生长极性接种到MS培养基中培养，接好外植体的MS培养基先置于黑暗中培养2天，随后转入光照培养；
[0010]S3、芽条育壮培养：外植体材料经萌发培养后，当新萌发芽茎长到1cm以上时，将外植体材料接种到育壮培养基中进行增殖培养；培养到萌发的芽条，育壮至长度3cm以上，茎粗壮，长势良好，顶部叶片1
‑
2张开；
[0011]S4、芽条继代增值：将经过育壮培养的芽条，从靠近老的茎段基部切割下来，然后移植继代增值培养基培养，当恢复生长时，切除顶部芽，然后继续在移植继代增值培养基培养，按照以上继代增殖流程培养，当培养到所需的增殖系数或所需要的植株数量，就可以进行下一步的诱导生根培养，芽条的剩余部分可以一直增殖；
[0012]S5、再生植株的生根培养：对于经过继代增值培养的芽条，选取叶片嫩绿、生长旺盛且叶片4
‑
6片叶以上、茎干健壮的茎芽，插入生根培养基，诱导生根培养；
[0013]S6、炼苗移栽：待生根培养后的培苗的苗高长3厘米以上，形成不定根3根以上，且根长超过5厘米时，放在室温内，闭瓶培育3天以上后；进行锻炼，待新叶展开4
‑
5叶后即可带
土移栽至大田。
[0014]优选的，MS基础培养基中包括：硝酸钾KNO3：1900mg/L；硝酸铵NH4NO3：1650mg/L；磷酸二氢钾KH2PO4：170mg/L；硫酸镁MgSO4·
7H2O：370mg/L；氯化钙CaCl2·
2H2O：440mg/L；碘化钾KI：0.83mg/L；硼酸H3BO3：6.2mg/L；硫酸锰MnSO4·
4H2O：22.3mg/L；硫酸锌ZnSO4·
7H2O：8.6mg/L；钼酸钠Na2MoO4·
2H2O：0.25mg/L；硫酸铜CuSO4·
5H2O：0.025mg/L；氯化钴CoCl2·
6H2O：0.025mg/L；乙二胺四乙酸二钠Na2‑
EDTA：37.25mg/L；硫酸亚铁FeSO4·
7H2O：27.85mg/L；肌醇：100mg/L；甘氨酸：2mg/L；盐酸硫胺素VB1：0.1mg/L；盐酸吡哆醇VB6：0.5mg/L和烟酸VB5：0.5mg/L。
[0015]优选的，所述含芽油梨茎段为含有多个腋芽或顶芽的油梨茎段，含芽油梨茎段包括嫩茎段和老茎段。
[0016]优选的，所述S1中，消毒的具体步骤为：先通过洗洁精溶液浸泡2分钟，流动自来水冲洗10分钟，75vol％乙醇浸泡15s，无菌水冲洗4
‑
5次，0.1wt％氯化汞和0.1wt％吐温的混合溶液浸泡15min，无菌水冲洗4
‑
5次，75vol％乙醇浸泡10s，无菌水冲洗4
‑
5次。
[0017]优选的，所述S2中，MS培养基中包括：MS基础培养基、6
‑
苄氨基嘌呤(6
‑
BA)0.5
‑
4mg/L、8wt％琼脂粉和蔗糖30g/L，MS培养基的pH值为5.7，培养条件为：培养温度为21
‑
25℃，光照时间为14小时/天，光照强度30
‑
40微摩尔/米2·
秒。
[0018]优选的，所述S3中，育壮培养基中包括：MS基础培养基、6
‑
BA0.5
‑
4mg/L、萘乙酸(NAA)0.1mg/L、8wt％琼脂粉、蔗糖30g/L、羧甲基壳聚糖2.5g/L、β
‑
环糊精1.5g/L和10vol％椰子水，育壮培养基的pH值为5.7；培养条件为：培养温度为21
‑
25℃，光照时间为14小时/天，光照强度30
‑
40微摩尔/米2·
秒。
[0019]优选的，所述S4中，继代增值培养基中包括：MS基础培养基、6
‑
BA2.0mg/L、NAA0.1mg/L、8wt％琼脂粉、蔗糖30g/L和10vol％椰子水，继代增值培养基的pH值为5.7；培养条件为：培养温度为21
‑
25℃，光照时间为14小时/天，光照强度30
‑
40微摩尔/米2·
秒。
[0020]优选的，所述S5中，生根培养基中包括：50％浓度的MS基础培养基、0.5
‑
4mg/L吲哚丁酸(IBA)、3mg/L激动素(KT)、1.00g/L活性炭、10vol％椰子水、8wt％琼脂粉和蔗糖30g/L，生根培养基的pH为5.7；培养条件为：培养温度为21
‑
25℃，光照时间为14小时/天，光照强度30
‑
40微摩尔/米2·
秒，培养25
‑
60天。
[0021]优选的，所述S6中，锻炼的具体步骤为：松开组培瓶的瓶盖，往瓶中注入少量无菌水，3天后，移走瓶盖，正常灯光直照下培养，培育2天后，小心清除生根苗培养基，用流水小心将残留的琼脂冲洗干净；然后将植株定植于预先消毒过的蛭石、椰糠和营养土的混合土壤中，株距2厘米以上，用透明的聚乙烯塑料薄膜覆盖以保湿，室内温度控制在21
‑
24℃，3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、外植体消毒：选择含芽油梨茎段，进行消毒，得到消毒完的外植体材料；S2、诱导萌发：将外植体材料重新切除外植体两端，然后按生长极性接种到MS培养基中培养，接好外植体的MS培养基先置于黑暗中培养2天，随后转入光照培养；S3、芽条育壮培养：外植体材料经萌发培养后，当新萌发芽茎长到1cm以上时，将外植体材料接种到育壮培养基中进行增殖培养；培养到萌发的芽条，育壮至长度3cm以上，茎粗壮，长势良好，顶部叶片1
‑
2张开；S4、芽条继代增值：将经过育壮培养的芽条，从靠近老的茎段基部切割下来，然后移植继代增值培养基培养，当恢复生长时，切除顶部芽，然后继续在移植继代增值培养基培养，按照以上继代增殖流程培养，当培养到所需的增殖系数或所需要的植株数量，就可以进行下一步的诱导生根培养，芽条的剩余部分可以一直增殖；S5、再生植株的生根培养：对于经过继代增值培养的芽条，选取叶片嫩绿、生长旺盛且叶片4
‑
6片叶以上、茎干健壮的茎芽，插入生根培养基，诱导生根培养；S6、炼苗移栽：待生根培养后的培苗的苗高长3厘米以上，形成不定根3根以上，且根长超过5厘米时，放在室温内，闭瓶培育3天以上后；进行锻炼，待新叶展开4
‑
5叶后即可带土移栽至大田。2.根据权利要求1所述的一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，MS基础培养基中包括：硝酸钾KNO3：1900mg/L；硝酸铵NH4NO3：1650mg/L；磷酸二氢钾KH2PO4：170mg/L；硫酸镁MgSO4·
7H2O：370mg/L；氯化钙CaCl2·
2H2O：440mg/L；碘化钾KI：0.83mg/L；硼酸H3BO3：6.2mg/L；硫酸锰MnSO4·
4H2O：22.3mg/L；硫酸锌ZnSO4·
7H2O：8.6mg/L；钼酸钠Na2MoO4·
2H2O：0.25mg/L；硫酸铜CuSO4·
5H2O：0.025mg/L；氯化钴CoCl2·
6H2O：0.025mg/L；乙二胺四乙酸二钠Na2‑
EDTA：37.25mg/L；硫酸亚铁FeSO4·
7H2O：27.85mg/L；肌醇：100mg/L；甘氨酸：2mg/L；盐酸硫胺素VB1：0.1mg/L；盐酸吡哆醇VB6：0.5mg/L和烟酸VB5：0.5mg/L。3.根据权利要求1所述的一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，所述含芽油梨茎段为含有多个腋芽或顶芽的油梨茎段，含芽油梨茎段包括嫩茎段和老茎段。4.根据权利要求1所述的一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，所述S1中，消毒的具体步骤为：先通过洗洁精溶液浸泡2分钟，流动自来水冲洗10分钟，75vol％乙醇浸泡15s，无菌水冲洗4
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5次，0.1wt％氯化汞和0.1wt％吐温的混合溶液浸泡15min，无菌水冲洗4
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5次，75vol...

【专利技术属性】
技术研发人员：王甲水，李艳霞，刘远征，张贺，马蔚红，
申请(专利权)人：海南热作两院种业科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：