花生四烯酸含量减少的含二高-γ-亚麻酸的微生物油制造技术

本发明专利技术的目的在于，提供一种含更高纯度的二高

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】花生四烯酸含量减少的含二高
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γ
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亚麻酸的微生物油


[0001]本专利技术涉及含二高
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γ
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亚麻酸(以下有时称为DGLA)的微生物油、由该微生物油得到的低级醇酯组合物或游离脂肪酸组合物、含二高
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γ
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亚麻酸的微生物菌体、以及它们的利用、它们的制造方法、以及在它们的制造中使用的微生物。

技术介绍

[0002]DGLA(C20:3,n
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6)(8,11,14
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二十碳三烯酸)是鱼油、海藻等中的构成脂肪酸(日语：構成脂肪酸)之一。DGLA已知在高山被孢霉等微生物中作为花生四烯酸(C20:4,n
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6)(5,8,11,14
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二十碳四烯酸)(以下有时称为ARA)的前体物质而生成。然而，可知在含有甘油三酯、甘油二酯、甘油单酯、磷脂质和甾醇作为脂质成分的微生物中，DGLA的生成量极少。DGLA与ARA为具有类似的化学特征的脂肪酸。因此，DGLA与ARA的分离是困难的。
[0003]为了高效率地生产DGLA，提出了尽可能减少微生物中的ARA的生成量的技术(非专利文献1～5、专利文献1～3)。例如，日本特开平5
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091887号公报中，公开了一种DGLA或含有DGLA的脂质的制造方法，其包括：培养具有ARA生产能力、但Δ5去饱和酶活性降低或缺失的微生物，生成DGLA或含有DGLA的脂质的步骤；以及收集DGLA或含有DGLA的脂质的步骤。此外，专利文献1中，还公开了通过在Δ5去饱和酶抑制剂、例如芝麻素等的存在下培养具有ARA生产能力、且Δ5去饱和活性降低或缺失的微生物，从而得到DGLA或含有DGLA的脂质。此外，专利文献2中，公开了通过组合使用2种以上的Δ5去饱和酶抑制剂，能够生产具有高DGLA/ARA比的微生物油。此外，非专利文献1～5中，公开了利用在高山被孢酶(Mortierella alpina)1S
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4株中对Δ5去饱和酶的基因导入突变、或利用该基因被破坏的菌株而生成含DGLA的油。非专利文献5中，多种Δ5去饱和酶基因被破坏的菌株中，实现了检测限以下的ARA。然而，非专利文献5的表3中，仅示出到小数点后1位的结果。
[0004]此外，专利文献3中公开了包含ARA、DGLA等长链高不饱和脂肪酸作为结构要素的磷脂质的制造方法。
[0005]尽管已知这些现有技术，然而在技术上仍然难以实现产品的满意度和使用品质，因此目前几乎未见在商业上进行DGLA含有率更高的微生物油的生产。现有技术文献专利文献
[0006]专利文献1：日本特开平5
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091887号公报专利文献2：日本特表2017
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502114号公报专利文献3：国际公开第2005/083101号非专利文献
[0007]非专利文献1：Abe et al.,J.Biosci.Bioeng.(2005)vol.99,No.3,pp.296
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299非专利文献2：Jareonkitmongkol et al.,J.Gneneral Microbiology(1992)vol.138,pp.997
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1002非专利文献3：Kawashima et al.,JAOCS(2000)vol.77,No.11,pp.1135
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1138
非专利文献4：Jareonkitmongkol et al.,Appl.Environ.Microbiol.(1993)vol.59,No.12,pp.4300
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4304非专利文献5：Kikukawa et al.,J.Biosci.Bioeng.(2016)vol.122,No.1,pp.22
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技术实现思路

专利技术要解决的技术问题
[0008]本专利技术的技术问题在于，提供一种微生物油和微生物菌体，其能够用于得到与通过现有方法得到的微生物油相比以更高纯度含有二高
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亚麻酸的油，此外，提供使用微生物菌体的微生物油的制造方法。用于解决问题的手段
[0009]本专利技术涉及一种微生物油，其以高纯度包含二高
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亚麻酸(DGLA)作为油的构成脂肪酸。本专利技术的微生物油的特征在于，含有DGLA和/或减少不期望的构成脂肪酸。作为本专利技术的微生物油中不期望的构成脂肪酸，可以举出花生四烯酸(ARA)和/或长链饱和脂肪酸。
[0010]更具体而言，本专利技术的微生物油以DGLA的含有率和ARA的含有率来确定。在该情况下，也可以进一步以长链饱和脂肪酸的含有率来确定。
[0011]另一个方式中，本专利技术的微生物油以DGLA的含有率和长链饱和脂肪酸的含有率来确定。在该情况下，也可以进一步以ARA的含有率来确定。
[0012]另一个方式中，本专利技术的微生物油包含DGLA，以长链饱和脂肪酸的含有率和ARA的含有率来确定。在该情况下，也可以进一步以DGLA的含有率来确定。
[0013]另一个方式中，本专利技术的微生物油包含DGLA，可以以长链饱和脂肪酸相对于DGLA的构成比率来确定。在该情况下，也可以进一步以ARA的含有率来确定，也可以进一步以DGLA的含有率来确定。
[0014]另一个方式中，本专利技术的微生物油包含DGLA，可以以ARA相对于DGLA的构成比率来确定。在该情况下，也可以进一步以长链饱和脂肪酸相对于DGLA的构成比率来确定，也可以进一步以ARA的含有率来确定，也可以进一步以DGLA的含有率来确定。
[0015]本专利技术的一个方式中，长链饱和脂肪酸为C24:0、C22:0和C20:0，基于总计量计算含有率、构成比率。另一个方式中，长链饱和脂肪酸为C24:0和C22:0，基于总计量计算含有率、构成比率。进一步的另一个方式中，长链饱和脂肪酸为C24:0，可以算出C24:0的含有率、构成比率。
[0016]本专利技术的微生物油中含有的DGLA以油的构成脂肪酸计，可以以大于30重量％、大于31重量％、大于32重量％、或大于34重量％的含有率含有在微生物油中。
[0017]ARA在本专利技术的微生物油中，其含有率降低或实质上不含。一个方式中，本专利技术的微生物油中，ARA在微生物油的构成脂肪酸之中为0.3重量％以下、0.2重量％以下、0.1重量％以下、0.05重量％以下、0.04重量％以下、0.03重量％以下、或0.01重量％以下。此外，另一个方式中，本专利技术的微生物油中，ARA相对于DGLA的构成比率以重量比计可以为1/120以下、1/180以下、1/360以下、1/1000以下、1/2350以下、或1/3000以下。
[0018]长链饱和脂肪酸是指碳原子数至少为20的饱和脂肪酸，例如是指选自花生酸
(C20:0)、山嵛酸(C22:0)、木蜡酸(C24:0)中的至少1种脂肪酸。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，包含大于30重量％、大于32重量％、或大于34重量％的二高
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亚麻酸，实质上不含花生四烯酸，或花生四烯酸的含有率为0.3重量％以下、0.2重量％以下、0.1重量％以下、0.05重量％以下、0.04重量％以下、0.03重量％以下、或0.01重量％以下。2.根据权利要求1所述的微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，C24:0的含有率为8.5重量％以下、7.0重量％以下、6.0重量％以下、或5.5重量％以下。3.根据权利要求1或2中任一项所述的微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，C24:0和C22:0的总计的含有率为11.0重量％以下、10.0重量％以下、9.0重量％以下、8.0重量％以下、或7.5重量％以下。4.根据权利要求1～3中任一项所述的微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，C24:0、C22:0和C20:0的含有率为12.0重量％以下、11.0重量％以下、10.0重量％以下、9.0重量％以下、或8.0重量％以下。5.一种微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，包含大于30重量％、大于32重量％、或大于34重量％的二高
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亚麻酸，C24:0的含有率为8.5重量％以下、7.0重量％以下、6.0重量％以下、或5.5重量％以下。6.根据权利要求5所述的微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，C24:0和C22:0的总计的含有率为11.0重量％以下、10.0重量％以下、9.0重量％以下、8.0重量％以下、或7.5重量％以下。7.根据权利要求5或6所述的微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，C24:0、C22:0和C20:0的含有率为12.0重量％以下、11.0重量％以下、10.0重量％以下、9.0重量％以下、或8.0重量％以下。8.一种微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，包含大于30重量％、大于32重量％、或大于34重量％的二高
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亚麻酸，C24:0和C22:0的总计的含有率为11.0重量％以下、10.0重量％以下、9.0重量％以下、8.0重量％以下、或7.5重量％以下。9.根据权利要求8所述的微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，C24:0、C22:0和C20:0的含有率为12.0重量％以下、11.0重量％以下、10.0重量％以下、9.0重量％以下、或8.0重量％以下。10.一种微生物油，其中，作为油的构成脂肪酸，包含大于30重量％、大于32重量％、或大于34重量％的二高
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亚麻酸，C24:0、C22:0和C20:0的含有率为12.0重量％以下、11.0重量％以下、10.0重量％以下、9.0重量％以下、或8.0重量％以下。11.一种微生物油，其中，包含二高
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亚麻酸作为油的构成脂肪酸，花生四烯酸相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/120以下、1/180以下、1/360以下、1/1000以下、1/2350以下、或1/3000以下。12.根据权利要求11所述的微生物油，其中，C24:0相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/4.1以下、1/5.0以下、或1/6.0以下。13.根据权利要求11或12所述的微生物油，其中，C24:0和C22:0的总计相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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γ
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/3.1以下、1/4.0以下、或1/5.0以下。14.根据权利要求11～13中任一项所述的微生物油，其中，C24:0、C22:0和C20:0的总计
相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/3.0以下、1/3.9以下、或1/4.8以下。15.一种微生物油，其中，包含二高
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亚麻酸作为油的构成脂肪酸，C24:0相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/4.1以下、1/5.0以下、或1/6.0以下。16.根据权利要求15所述的微生物油，其中，C24:0和C22:0的总计相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/3.1以下、1/4.0以下、或1/5.0以下。17.根据权利要求15或16所述的微生物油，其中，C24:0、C22:0和C20:0的总计相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/3.0以下、1/3.9以下、或1/4.8以下。18.一种微生物油，其中，包含二高
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亚麻酸作为油的构成脂肪酸，C24:0和C22:0的总计相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/3.1以下、1/4.0以下、或1/5.0以下。19.根据权利要求18所述的微生物油，其中，C24:0、C22:0和C20:0的总计相对于作为油的构成脂肪酸的二高
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亚麻酸的构成比率以重量比计为1/3.0以下、1/3.9以下、或1/4.8以下。20.一种微生物油，其中，包含二高
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亚麻酸作为油的构成脂肪酸，C24:0、C22...

【专利技术属性】
技术研发人员：佐藤诚造，关口峻允，高桥美咲，
申请(专利权)人：日本水产株式会社，
类型：发明
国别省市：