大过路黄药效物质在制备抗新冠病毒药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了大过路黄药效物质在制备抗新冠病毒药物中的应用，大过路黄水提物、大过路黄30％醇提物、大过路黄60％醇提物和大过路黄85％醇提物，具有抑制新型冠状病毒肺炎药物靶点Cathepsin L蛋白酶活性；大过路黄中单体化合物金丝桃素、柚皮素、二氢槲皮素、槲皮苷、圣草酚和柚皮素查尔酮在浓度为0.1mg/mL时对Cathepsin L蛋白酶的抑制作用分别为79.4％、28.1％、18.1％、16.3％、14.3％和22.2％，可用于制备新型冠状病毒肺炎Cathepsin L蛋白酶抑制剂和抗新型冠状病毒肺炎药物以及用于制备预防和治疗新型冠状病毒肺炎药物。预防和治疗新型冠状病毒肺炎药物。预防和治疗新型冠状病毒肺炎药物。

【技术实现步骤摘要】
大过路黄药效物质在制备抗新冠病毒药物中的应用


[0001]本专利技术涉及药物
，特别是涉及大过路黄不同溶剂提取物和单体化合物在制备抗新冠病毒药物中的应用。
技术背景
[0002]新冠病毒(SARS
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CoV
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2)属于单链RNA正链包膜β冠状病毒，通过飞沫、接触、粪口侵入人体后，迅速攻击肺部、心脏、肾脏、肠道等多个器官，造成多器官衰竭，最后导致死亡。在SARS
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CoV
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2大流行期间，病毒基因组积累了多种突变，如VOC B.1.617.2谱系(Delta 变体)是高度融合并易形成合胞体的病毒株，由于P681R突变促进了弗林蛋白酶(furin)介导的刺突蛋白(S蛋白)的切割，加速了细胞
ꢀ‑
细胞的融合，促使B.1.617.对中和抗体产生抗性。
[0003]新冠病毒(SARS
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CoV
‑
2)的复制周期包括侵入、复制、组装与分泌等阶段，阻断病毒复制周期的任何阶段，都可以抑制病毒的复制，该病毒基因组包括28种编码蛋白，其中16种非结构蛋白，4种结构蛋白和8种辅助蛋白。目前已确立新冠病毒的7个药物筛选靶点分别是刺突糖蛋白(SARS
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CoV S)、病毒受体ACE2蛋白、木瓜样蛋白酶(PLpro)、3
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胰凝乳蛋白酶样蛋白酶(M
pro
)、介导病毒RNA帽子的甲基化修饰的nsp16、病毒转录复制相关的RNA聚合酶(RdRp)和潜在病毒用于干扰宿主免疫的X domain蛋白。据报道SARS
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CoV S蛋白水解过程对病毒侵入和融合起着关键作用的肽链内切酶组织蛋白酶L(Cathepsin L，CatL PR)已被证明是SARS
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CoV S蛋白酶酶解过程中关键裂解位点的相关外源基因蛋白酶，对病毒进入宿主细胞很重要的人类蛋白
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组织蛋白酶L(cathepsin L)是研究抗SARS
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CoV
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2 (2019
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nConV)药物的有效靶点。
[0004]目前无抗新型冠状病毒特效药物，天然产物具有化学结构复杂性和生物活性多样性，是创新药物研究开发的重要物质来源之一。大过路黄为藤黄科金丝梅属植物，味苦、性寒，具有清热利湿解毒、疏肝通络、祛瘀止痛的功效，主治湿热淋病，肝炎，感冒，扁桃体炎，疝气偏坠，筋骨疼痛，跌打损伤，主要分布在中国陕西、贵州、四川、湖南、湖北、江苏等省。该属植物在民间具有2400年的药用历史，在欧洲民间草药治疗创伤，在德国用作抗抑郁药物已有百年的使用历史，目前未见有用于抗新冠病毒(SARS
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CoV
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2)的相关报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是提供一种大过路黄不同溶剂提取物和单体化合物在制备Cathepsin L蛋白酶抑制剂抗新型冠状病毒药物中的应用，从而克服现有治疗新型冠状肺炎的有效药物稀少的缺陷，为患者提供新的药物选择。
[0006]为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]大过路黄药效物质在制备抗新冠病毒药物中的应用。
[0008]上述应用中，包括大过路黄不同溶剂提取物在制备Cathepsin L 蛋白酶抑制剂和治疗新型冠状病毒药物中的应用。
[0009]具体来说，大过路黄水提物、大过路黄30％醇提物、大过路黄60％醇提物和大过路
黄85％醇提物，具有抑制新型冠状病毒肺炎药物靶点 Cathepsin L蛋白酶活性，其中大过路黄水提物、大过路黄30％醇提物、大过路黄60％醇提物和大过路黄85％醇提物抑制新型冠状病毒肺炎药物靶点Cathepsin L蛋白酶活性IC
50
分别为0.21mg/mL、0.034 mg/mL、0.025mg/mL和0.03mg/mL。
[0010]上述应用中，还包括大过路黄中单体化合物金丝桃素、柚皮素、二氢槲皮素、槲皮苷、圣草酚、柚皮素查尔酮在制备Cathepsin L蛋白酶抑制剂和治疗新型冠状病毒药物中的应用。
[0011]上述应用中，具体来说，大过路黄中单体化合物金丝桃素、柚皮素、二氢槲皮素、槲皮苷、圣草酚和柚皮素查尔酮在0.1mg/mL时抑制Cathepsin L蛋白酶活性分别为79.4％、28.1％、18.1％、16.3％、 14.3％和22.2％。
[0012]有益效果：与现有技术相比，本申请的专利技术人经过研究发现大过路黄水提物、大过路黄30％醇提物、大过路黄60％醇提物和大过路黄 85％醇提物对新型冠状病毒肺炎药物靶点Cathepsin L蛋白酶具有较好的抑制作用，大过路黄单体化合物中金丝桃素活性最强，柚皮素、二氢槲皮素、槲皮苷、圣草酚、柚皮素查尔酮对Cathepsin L蛋白酶具有一定抑制性。上述所有药效物质(大过路黄不同溶剂提取物和大过路黄中单体化合物)可用于制备新型冠状病毒肺炎Cathepsin L蛋白酶抑制剂和抗新型冠状病毒肺炎药物，以及用于制备预防和治疗新型冠状病毒肺炎药物，也可与其它组分复配用于制备预防和治疗新型冠状病毒肺炎的药物。
附图说明
[0013]图1为大过路黄不同溶剂提取物UPLC
‑
HRMS(Negative)分析结果图；
[0014]图2为大过路黄不同溶剂提取物UPLC
‑
HRMS(Positive)分析结果图；
[0015]图3为Rutin配体与Cathpsin L蛋白的相互作用图；
[0016]图4为Hypericin配体与Cathpsin L蛋白的相互作用图；
[0017]图5为Naringenin chalcone配体与Cathpsin L蛋白的相互作用图。
具体实施方式
[0018]下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步说明，但不作为对本专利技术的任何限制。
[0019]为了确认药物质量及验证其抗Cathepsin L作用，本专利技术做了相关的实验如下：
[0020]1、大过路黄药材质量检测
[0021]1.1药材鉴定：实验药材于2020年08月购于贵阳花果园药材市场，经贵州中医药大学陈德媛教授鉴定为大过路黄(Hypericumkouytchense L
é
vl.)和(Hypericum acmosepalum N.Robson)的瘤状物，样品编号：HK2020.08，实验样品存储于贵州中医药大学科研楼活性筛选实验室。
[0022]2、大过路黄不同溶剂提取物制备：取大过路黄粗粉200g各4份，分别加2倍体积不同溶剂(水、30％甲醇、60％甲醇和85％甲醇)，回流提取三次，提取时间：1h，1h，30min。合并三次提取液，减压浓缩，低温真空干燥，制备出大过路黄水提取(HW)、大过路黄30％醇提物(H30)、大过路黄60％醇提物(H60)和大过路黄85％醇提物 (本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.大过路黄药效物质在制备抗新冠病毒药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：大过路黄不同溶剂提取物在制备Cathepsin L蛋白酶抑制剂和治疗新型冠状病毒药物中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：大过路黄水提物、大过路黄30％醇提物、大过路黄60％醇提物和大过路黄85％醇提物，具有抑制新型冠状病毒肺炎药物靶点Cathepsin L蛋白酶活性。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：大过路黄水提物、大过路黄30％醇提物、大过路黄60％醇提物和大过路黄85％醇提物，抑制新型冠状病毒肺炎药物靶点Cathepsin L蛋白酶活性IC
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分别为0.21mg/mL、0.034mg/mL、0.025mg/mL和0.03mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：危英，马超美，李苏梅，周英，潘博文，肖俊伟，杨欣，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：