本发明专利技术涉及生物技术领域，公开了一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，包括：将能够在含苯甲酰二甲基铵类化合物的废水中正常生长的藻菌共生培养体系的沉积物作为种子株；将种子株接入苯甲酰二甲基铵类化合物和JTUK 12培养基中进行驯化，得到混合菌液；将能够正常生长的混合菌液通过稀释平板法进行分离，挑取单菌落重新接种至JTUK 12培养基中扩培，得到菌团。还公开了上述筛选方法筛选得到的菌团在降解苯甲酰二甲基铵类化合物中的应用。本发明专利技术筛选得到的菌团包括真菌和细菌中的多种菌种，丰富了苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌种库，同时能够高效降解苯甲酰二甲基铵类化合物，降解率高达92％以上。降解率高达92％以上。降解率高达92％以上。
【技术实现步骤摘要】
一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法及其应用
[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种降解苯甲酰二甲基铵类化合物的方法。
技术介绍
[0002]有研究表明，苯甲酰二甲基铵类化合物对大型溞、光合细菌和微藻等水生生物的半数有效浓度浓度范围为普遍低于200μg/L，而其在污水中的最高检出浓度高达2800μg/L，一旦含苯甲酰二甲基铵类化合物的废水被排入水生态系统后将会严重抑制水生生物的生长、繁殖，进而影响水生态系统的稳定性。因此开发出一种在苯甲酰二甲基铵类化合物融入生态环境前将其降解的方法十分重要。
[0003]近些年采用的离子吸附等物理化学方法处理苯甲酰二甲基铵类化合物虽有较好进展，但操作成本较高及处理效果易受废水其他成分影响，可考虑从微生物方法方面入手。目前有关处理苯甲酰二甲基铵类化合物的微生物方法的研究较少，已经报道的苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌种类非常有限，且其对苯甲酰二甲基铵类化合物的降解效率较低，仅为70％～80％。
技术实现思路
[0004]有鉴于此，本专利技术实施例通过提供一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法及其应用，用于解决现有降解苯甲酰二甲基铵类化合物的方法存在降解效率低的问题。
[0005]为了解决上述问题，本专利技术实施例提供了一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，包括以下步骤：
[0006]S1，将能够在含苯甲酰二甲基铵类化合物的废水中正常生长的藻菌共生培养体系的沉积物为种子株；
[0007]所述藻菌共生培养体系为公开内容，市场上可用于处理废水的藻菌共生培养体系都可以用于本专利技术。
[0008]S2，将种子株接入苯甲酰二甲基铵类化合物和JTUK 12培养基中进行驯化，得到混合菌液；
[0009]S3，将混合菌液通过稀释平板法进行分离，挑取单菌落重新接种至液体JTUK 12培养基中扩培，得到菌团；
[0010]JTUK 12培养基为含有0.1
‑
10g/L酵母提取物、10
‑
50g/L葡萄糖、1.5
‑
2.0g/LK2HPO4·
3H2O的BG 11培养基。
[0011]BG 11培养基包括硝酸钠1.5g/L、三水磷酸氢二钾0.04g/L、七水硫酸镁0.075g/L、二水氯化钙0.036g/L、柠檬酸0.006g/L、柠檬酸铁铵0.006g/L、EDTA0.001g/L、碳酸钠0.02g/L、硼酸0.00286g/L、一水氯化锰0.00181g/L、七水硫酸锌0.000222g/L、五水硫酸铜0.000079g/L、二水钼酸钠0.00039g/L、六水硝酸钴0.000049g/L，调节pH值7.1
±
0.1。
[0012]可选地，S1中，废水中苯甲酰二甲基铵类化合物浓度为0.1
‑
160mg/L。
[0013]可选地，S2中，苯甲酰二甲基铵类化合物浓度为0.1
‑
160mg/L。
[0014]可选地，菌团包括拟青霉属、威克汉姆酵母属、隐球菌属、毛霉属、曲霉属以及产碱杆菌属。
[0015]可选地，JTUK 12培养基中，葡萄糖的浓度为10g/L。
[0016]可选地，JTUK 12培养基中，酵母提取物的浓度为2g/L。
[0017]本专利技术还公开了用上述方法筛选得到的菌团在降解苯甲酰二甲基铵类化合物中的应用。
[0018]可选地，用上述方法筛选得到的菌团在降解苯甲酰二甲基铵类化合物中的应用，包括以下步骤：将上述方法得到的菌团接种至含有苯甲酰二甲基铵类化合物的废水中，接入JTUK 12培养基，无光照下培养。
[0019]可选地，菌团接种至JTUK 12培养基中，培养时间不小于6天，对苯甲酰二甲基铵类化合物的降解率可达92％以上。
[0020]可选地，废水中苯甲酰二甲基铵类化合物的浓度为0.1
‑
160mg/L，在此范围内，本专利技术的方法能够高效降解苯甲酰二甲基铵类化合物，降解率可达92％以上。
[0021]本专利技术得到的菌团中不仅包括无色杆菌、绿脓杆菌等细菌，还包括拟青霉属(Purpureocillium sp.)、威克汉姆酵母属(Wickerhamomyces sp.)、隐球菌属(Cutaneotrichosporon sp.)、毛霉属(Mucor sp.)、曲霉属(Aspergillus sp.)等真菌，丰富了苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌种库。
[0022]相比现有的方法，本专利技术提供的方法能够高效降解高浓度苯甲酰二甲基铵类化合物，降解率高达92％以上。
[0023]上述说明仅是本申请技术方案的概述，为了能够更清楚了解本申请的技术手段，而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本申请的上述和其它目的、特征和优点能够更明显易懂，以下特举本申请的具体实施方式。
附图说明
[0024]图1为本专利技术实施例中菌株在50mg/L苯甲酰二甲基铵类化合物下的生长情况；其中，(a)显示种子株接种10天后培养基中出现较为明显的白色菌，(b)显示种子株接种15天后培养基的白色菌细胞密度显著提高，培养基已经变得浑浊；(c)显示种子株接种20天后，菌液开始变黄，而且出现大量丝状菌团。
[0025]图2为本专利技术实施例中菌团在不同浓度的K2HPO4·
3H2O下的菌斑形态；其中，1～6分别代表K2HPO4·
3H2O浓度为0g/L、0.5g/L、1.0g/L、1.5g/L、2.0g/L、2.5g/L的培养基。
具体实施方式
[0026]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1
[0028]本专利技术实施例提供了一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，包括以
下步骤：
[0029]S1，将能够在苯甲酰二甲基铵类化合物浓度为47.0mg/L的市政废水中正常生长的藻菌共生培养体系的沉积物为种子株；
[0030]所述藻菌共生培养体系为公开内容，市场上可用于处理废水的藻菌共生培养体系都可以用于本专利技术。
[0031]S2，将其接入含50mg/L苯甲酰二甲基铵类化合物和JTUK 12培养基中进行多次驯化，每次驯化条件不变，第一次驯化20天，生长情况如图1所示，第二次驯化10天，第三次驯化6天，第四次驯化2天，然后得到混合菌液；
[0032]S3，将混合菌液通过稀释平板法进行分离，挑取单菌落重新接种至液体JTUK 12培养基中扩培，120rpm，30℃，无光照下振荡培养，得到菌团。
[0033]其中，JTUK 12培养基为含有1.0g/L酵母提取物、1.0g/L葡本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，将能够在含苯甲酰二甲基铵类化合物的废水中正常生长的藻菌共生培养体系的沉积物作为种子株；S2，将种子株接入苯甲酰二甲基铵类化合物和JTUK 12培养基中进行驯化，得到混合菌液；S3，将混合菌液通过稀释平板法进行分离，挑取单菌落重新接种至JTUK12培养基中扩培，得到菌团；JTUK 12培养基为含有0.1
‑
10g/L酵母提取物、10
‑
50g/L葡萄糖、1.5
‑
2.0g/L K2HPO4·
3H2O的BG 11培养基。2.根据权利要求1所述的一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，其特征在于：S1中，废水中苯甲酰二甲基铵类化合物浓度为0.1
‑
160mg/L。3.根据权利要求1所述的一种苯甲酰二甲基铵类化合物降解菌团的筛选方法，其特征在于：菌团包括拟青霉属、威克汉姆酵母属、隐球菌属、毛霉属、曲...
【专利技术属性】
技术研发人员：金涛，葛亚明，方浩，朱慧超，黄辉泽，李馥杉，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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