预测食管腺癌患者对联合治疗响应的标志物及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物医学领域，具体涉及预测食管腺癌患者对联合治疗响应的标志物及其应用。本发明专利技术所述联合治疗是新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗。具体地，所述标志物包括RORB、IGKV1_9、FGD5P1或其组合。FGD5P1或其组合。FGD5P1或其组合。

【技术实现步骤摘要】
预测食管腺癌患者对联合治疗响应的标志物及其应用


[0001]本专利技术属于生物医学领域，具体涉及预测食管腺癌患者对联合治疗响应的标志物及其应用。

技术介绍

[0002]食管癌是常见的消化道肿瘤，全世界每年约有30万人死于食管癌。其发病率和死亡率各国差异很大。食管癌在中国发病率居恶性肿瘤中第3位，死亡率居第4位，局限晚期患者5年生存率仅为24％。大多数患者确诊时已是中晚期，生存率较低。食管癌典型的症状为进行性咽下困难，先是难咽干的食物，继而是半流质食物，最后水和唾液也不能咽下。食管癌的人群分布与年龄、性别、职业、种族、地域、生活环境、饮食生活习惯、遗传易感性等有一定关系。
[0003]食管癌切除术是用于治疗食管癌的手术方法，对应适用情况有严格的选择。食管癌切术适用于以下情况：经确诊为较早期的食管或贲门癌，及部分三期食管下段癌，病变长度在5cm之内，一般情况尚好，无远处转移，并无心、肺、肝、肾功能严重损害或其他的手术禁忌症者，对70岁以上高龄者则更应严格选择。
[0004]对于可切除的食管癌患者来说，外科手术仍是首选治疗手段，但单纯手术治疗中晚期食管癌患者的5年生存率只有10％
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20％，疗效不佳的主要原因是肿瘤复发和转移。所以多数看似可切除的食管癌患者治愈前景黯淡。放疗可控制食管癌的局部复发，同时化疗也具有抗肿瘤复发转移的作用，这为食管癌的治疗带来了希望。对此不同学者提出了多种以手术为基础的多学科综合治疗方案，有前瞻性研究证实了术前新辅助放化疗(neoadjuvant chemoradiotherapy，NCRT)可以将手术根治的局部晚期患者5年生存率提高10％，中位总生存期(overall survival，OS)从24.0个月提高至48.6个月。食管病灶达到病理完全缓解(pathologic complete remission，pCR)的食管癌患者(约为30％)比未达pCR的患者有更好的生存预后。但是，同时有研究认为对于放化疗后达到临床缓解(clinical complete remission，cCR)的患者以手术或者放化疗完成根治其生存预后无差别，放化疗和手术患者的2年生存率分别为39.8％和33.6％，中位OS期分别为19.3个月和17.7个月。但考虑到手术带来较高的治疗相关死亡率、不良反应发生率以及因食管切除造成的生活质量下降，NCRT后达pCR的患者是否可以推迟或免于手术正越来越引起研究者们的热议和关注。
[0005]肿瘤退缩分级(tumor regression grade，TRG)也称为病理反应分级，是对新辅助化疗后切除的肿瘤进行病理形态学评估的分级标准，用于对患者的化疗或靶向药物的疗效做出评估，并且预测患者预后情况。肿瘤受到新辅助治疗后退缩反应中可见到多种不同的形态学表现，比如坏死、纤维组织增生、炎细胞浸润、细胞泡沫样变性、少量细胞不典型增生等，但不是所有肿瘤退缩均会有各种形态学特征性表现。故当前的TRG评判标准多依赖于肿瘤组织中的纤维化比例以及残存肿瘤比例。手术切除标本按照每1cm取材一次，切片交由至少2位病理学专家独立评分。对于多发肝转移灶的患者，每个病灶均需取材并评级。分级主要依据镜下残余肿瘤细胞和纤维化的比例，分为5级：TRG1
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无肿瘤细胞残存，由大量纤维化
取代；TRG2
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存在极少量肿瘤细胞散落在纤维化中；TRG3
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残存更多肿瘤细胞，但占比小于纤维化；TRG4
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残存肿瘤细胞占比超过纤维化；TRG5
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几乎全部为肿瘤细胞，难觅纤维化。

技术实现思路

[0006]为在选择进行新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗前，提前预测患者是否对该联合治疗有良好的反应，本专利技术提供了可以预测联合治疗疗效的标志物；同时提供了标志物组合，为临床开展治疗方案选择提供重要依据。
[0007]一方面，本专利技术提供了一种预测患者接受联合治疗疗效的标志物组合，所述标志物组合选自以下任意一种：
[0008]1)RORB+IGKV1_9、
[0009]2)RORB+FGD5P1、
[0010]3)IGKV1_9+FGD5P1、
[0011]4)RORB+IGKV1_9+FGD5P1；
[0012]本专利技术所述“联合治疗”是新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗。
[0013]如本专利技术所使用，所述“新辅助放化疗”与“NCRT”、“nCRT”相同含义，可以互换使用。
[0014]如本文所使用，所述“阿特珠单抗”即“Atezolizumab”，也可翻译为“阿替利珠单抗”，在本专利技术中，以上词语表示相同含义，可以互换使用。阿特珠单抗(Atezolizumab)，可靶向PD
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L1蛋白。阿特珠单抗与肿瘤细胞和肿瘤浸润性免疫细胞上表达的PD
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L1结合，阻断其与PD
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1和B7.1受体的相互作用。通过抑制PD
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L1，可以激活T细胞消灭肿瘤细胞。
[0015]具体地，所述“新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗”的治疗方案是：患者在nCRT的第一周和第四周静脉注射阿特珠单抗(1200毫克)。在nCRT后第7、10和13周给予阿特珠单抗单药治疗；所述nCRT是每周五次以下治疗：静脉注射卡铂(AUC为2mg/mL/min)、静脉注射帕卡利(50mg/min)和放射治疗(41.4Gy/23f/1.8Gy)，流程示意图如附图4所示。
[0016]优选地，所述患者是食管腺癌患者。
[0017]更优选地，所述患者是可切除食管腺癌的患者。更具体地，所述可切除的食管腺癌是指病理分期<cT4b，cN0或cM0。
[0018]优选地，所述“疗效”包括“响应(R)”或“不响应(NR)”。所述“响应”是用TRG评估为1
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2级，所述“不响应”是用TRG评估为3
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5级，或在手术前病情进展。
[0019]另一方面，本专利技术提供了一种预测患者接受联合治疗疗效的试剂盒，所述试剂盒包括检测前述标志物组合中任意一个标志物或多个的表达量的试剂；
[0020]所述联合治疗是新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗。
[0021]优选地，所述患者是食管腺癌患者。
[0022]更优选地，所述患者是可切除食管腺癌的患者。
[0023]优选地，所述试剂为能够检测标志物mRNA水平的试剂。这类试剂是本领域公知的，包括但不限于特异性结合目标序列的核酸探针、扩增目标序列的引物、非特异性荧光染料(例如，SYBR Green I)等。
[0024]优选地，所述核酸探针可以为单标记的核酸探针，例如放射性核素(如32P、3H、35S等)标记探针、生物素标记探针、辣根过氧化物酶标记探针、地高辛标记探针或荧光基团(如
FITC、FAM、TET、HEX、TAMRA、Cy3、Cy5等)标记探针；所述核酸探针也可以为双标记的核酸探针，例如Taqman本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种预测患者接受联合治疗疗效的标志物组合，所述标志物组合选自RORB+IGKV1_9、RORB+FGD5P1、IGKV1_9+FGD5P1、RORB+IGKV1_9+FGD5P1中任意一种；所述联合治疗是新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗；所述患者是食管腺癌患者。2.一种预测患者接受联合治疗疗效的试剂盒，所述试剂盒包括检测RORB、IGKV1_9、FGD5P1或权利要求1所述的标志物组合的表达量的试剂；所述联合治疗是新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗；所述患者是食管腺癌患者。3.如权利要求2所述的试剂盒，所述试剂是检测标志物mRNA水平的试剂。4.如权利要求3所述的试剂盒，所述试剂还包括提取RNA的试剂。5.一种预测患者接受联合治疗疗效的系统，所述系统包括根据RORB、IGKV1_9、FGD5P1或权利要求1所述的标志物组合的表达量检测结果判断患者接受联合治疗疗效的计算装置；所述联合治疗是新辅助放化疗联合阿特珠单抗治疗；所述患者是食管腺癌患者；所述计算是将表达量的检测结果与表达量阈值相比较，对联合治疗有响应的患者样本中：RORB表达量下调；IGKV1_9表达量下调；FGD5P1表达量下调；符合以上至少一种判断标准，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，郭静，
申请(专利权)人：青岛泱深生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：