一种快速检测食品接触材料生物抗菌性能试验方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测食品接触材料生物抗菌性能试验方法。该发明专利技术专利率先将快检显色试纸片应用于食品接触材料抗菌性能检验中，通过制备一种显色试纸片，贴膜于添加菌悬液的被试样品上，在（37

【技术实现步骤摘要】
TTC，溶解、混匀；c.将配制好的显色培养基在121 ℃下，灭菌15 min备用；d.将经过灭菌后的显色培养基放在56 ℃水浴锅中恒温水浴。取恒温后的显色培养基倒入无菌培养皿中，再将灭菌后的棉质纤维试纸片夹入到显色培养基中，充分覆盖浸泡3 s~5 s。再将浸泡后的试纸片用灭菌镊子夹取到无菌培养皿中；e.将浸泡好的显色试纸片放于50 ℃培养箱中18 h~24 h，干燥备用；f.将对照样品、测试样品裁剪为5.0 cm
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5.0 cm大小，试验前对样品进行清洗、消毒或杀菌。通常选择用75%酒精浸泡5min，后用无菌水清洗、晾干。
[0007]g.试验菌悬液制备浓度为5.0
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5 CFU/mL~10.0
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10
5 CFU/mL，具体操作如下：大肠埃希氏菌菌悬液，用1uL接种环刮取2环新鲜细菌培养物，于100mL接种培养液；制备金黄色葡萄球菌菌悬液，用1uL接种环刮取4环新鲜细菌培养物，于100mL接种培养液。加入培养液后并依此做10倍梯度稀释液，经过试验测试选择100倍稀释液进行抗菌性能测试。
[0008]h.将浓度为5.0
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5 CFU/mL~10.0
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10
5 CFU/mL菌悬液制备2~3个适宜稀释度，取适宜稀释度菌悬液200 uL滴加到被试样品、对照样品，每个稀释度做2个平行；i.取显色试纸片贴膜于滴加菌悬液的被试样品、对照样品上，使试纸片充分与被试样品贴合同时在试纸片上贴膜卫生级别聚乙稀薄膜，粘合缩水保湿；j.将样品放于在（37
±
1）℃、相对湿度＞90% 的恒温恒湿培养箱内，培养（24
±
1）h。取出培养后的样片，可直接读取。
[0009]与现有技术比较，传统抗菌性能检验方法需要花费大量时间进行稀释、洗脱、回收，导致检验周期长且费时费力的问题。本专利技术率先将自制快检显色试纸片应用于食品接触材料抗菌性能检测中，可有效摆脱传统方法操作复杂，费时费力等问题。本专利技术方法操作简单、省时省力、检验周期短，具有较高的可行性和实用性,是一种成功率高、重复性好、操作简便快捷的食品接触材料生物抗菌性能快检方法。本专利技术创新性的引入快检显色试纸片法可以有效摆脱传统检验方法操作繁琐、费时费力、检验周期长等问题，通过显色试纸片直接读取实验数据可以将检验样品批量化处理，大大提升检验效率,该专利技术通过显色试纸片，贴膜于添加菌悬液的被试样品上，在（37
±
1）℃、相对湿度＞90% 的条件下培养（24
±
1）h,经过培养后的试纸样片可直接读取、计算食品接触材料的抗菌率，可有效摆脱传统方法操作复杂，费时费力等问题，将原本4~5天的检验周期缩短到2天完成，该方法明显优于传统检验方法，具有较好的可行性和实用性。
具体实施方式
[0010]以下结合实施例，对本专利技术进行进一步的详细说明，实施例1:随机抽取市面上销售的抗菌性食品接触材料，共10份样品，编号为YP1~10，采用显色试纸片快检方法对其抗菌性能进行检测。操作步骤如下： 显色试纸片制备1.1、将棉质纤维、卫生级别聚乙稀薄膜切割裁剪为4.0 cm
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4 .0 cm大小，并进行消毒灭菌。棉质纤维选择用高压灭菌锅在121℃下，灭菌15 min；卫生级别聚乙烯薄膜选择用75%酒精浸泡5 min,再用无菌水反复洗脱、晾干，用于后续显色试纸片制备；
1.2、显色培养基制备：称取10.0g明胶加入到100mL营养肉汤中，再添加0.02gTTC，溶解、混匀；1.3、将经过灭菌后的显色培养基放在56℃水浴锅中恒温水浴。取恒温后的显色培养基倒入无菌培养皿中，再将灭菌后的棉质纤维试纸片夹入到显色培养基中，充分覆盖浸泡3s~5s。再将浸泡后的试纸片用灭菌镊子夹取到无菌培养皿中；1.4、将浸泡好的显色试纸片放于50℃培养箱中18h~24h，干燥备用；菌悬液制备制备大肠埃希氏菌菌悬液，用1uL接种环刮取2环新鲜细菌培养物，于100mL接种培养液；制备金黄色葡萄球菌菌悬液，用1uL接种环刮取4环新鲜细菌培养物，于100mL接种培养液。加入培养液后并依此做10倍梯度稀释液，经过试验测试选择100倍稀释液，可有效控制菌悬液浓度在5.0
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105CFU/mL~10.0
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105CFU/mL，用于抗菌性能测试。
[0011]样品测试选择2~3个合适稀释度的菌悬液用于抗菌性能测试，每个稀释度做两个平行。分别在阴性对照样、被测样品YP1~10上,滴加200μL，使菌液均匀接触样品。用灭菌镊子夹起显色试纸片、灭菌覆盖膜分别覆盖在阴性对照样、被测样品上，铺平，使菌液均匀接触样品，盖好平皿。在37℃、相对湿度＞90%条件下培养24h。取出培养24h的样品，读数、计算抗菌率。
[0012]检测结果计算读数时选择测试片菌落数在15CFU~150CFU之间的合适稀释度用于抗菌率计算，计算方式参考GB4789.2
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2016。
[0013]计算公式：R(%)=（B
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C）/B
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100%C——测试样品平均回收菌数B——对照样平均回收菌数R——抗菌率，%数值取三位有效数字抗菌性能快检显色试纸片法采用本专利技术的技术方案进行食品接触材料抗菌性能试验，抗菌性能结果如表1所示，同时用传统方法GB/T31402
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2015/ISO22196：2007进行平行验证，经过SPSS分析软件，检测结果为（P＞0.05）。验证实验显示两种方法的试验结果无显著性差异。
[0014]表1：实施例1传统方法与快检方法试验结果
实施例2:2021年绿色建材国家重点实验室质控样盲样考核工作，其中 HYNMW 30003测试结果如表2所示 检测结果符合质控要求。
[0015]表2：实施例 快检方法与质控范围以上通过对所列实施方式的介绍，阐述了本专利技术的基本构思和基本原理。显然，所述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，并非限定性穷举。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术的保护范围。
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速检测食品接触材料生物抗菌性能试验方法，其特征在于：包括以下步骤：将棉质纤维、卫生级别聚乙稀薄膜切割裁剪为4.0cm
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4.0cm大小，并进行消毒灭菌;棉质纤维选择用高压灭菌锅在121℃下，灭菌15min；卫生级别聚乙烯薄膜选择用75%酒精浸泡5min，再用无菌水反复洗脱、晾干，用于后续显色试纸片制备；显色培养基制备：称取10.0g明胶加入到100mL营养肉汤中，再添加0.02gTTC，溶解、混匀；将配制好的显色培养基在121℃下，灭菌15min备用；将经过灭菌后的显色培养基放在56℃水浴锅中恒温水浴;取恒温后的显色培养基倒入无菌培养皿中，再将灭菌后的棉质纤维试纸片夹入到显色培养基中，充分覆盖浸泡3s~5s;再将浸泡后的试纸片用灭菌镊子夹取到无菌培养皿中；将浸泡好的显色试纸片放于50℃培养箱中18h~24h，干燥备用；将对照样品、测试样品裁剪为5.0cm
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5.0cm大小，试验前对样品进行清洗、消毒或杀菌;通常选择用75%酒精浸泡5min，后用无菌水清洗、晾干;试验菌悬液制备浓度为5.0
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105CFU/mL~10.0
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105CFU/mL，具体操...

【专利技术属性】
技术研发人员：张芳，韩涛，许竞思，王涛，张雅薇，
申请(专利权)人：福建省产品质量检验研究院，
类型：发明
国别省市：