一种番鸭精液稀释液及其应用制造技术

本发明专利技术属于鸭的辅助生殖技术领域，具体涉及一种番鸭精液稀释液及其应用。本发明专利技术由下述质量份的组分混合而成：谷氨酸钠2.8g～2.9g/100ml、肌醇0.2g～0.3g/100ml、葡萄糖0.4g～0.6g/100ml、磷酸氢二钾三水合物0.4g～0.6g/100ml、磷酸二氢钾0.2g～0.4g/100ml、青霉素10万IU/100ml、链霉素10万IU/100ml，溶于无菌水至100ml，调溶液pH至7.0

【技术实现步骤摘要】
一种番鸭精液稀释液及其应用


[0001]本专利技术属于鸭辅助生殖
，具体涉及一种番鸭精液稀释液及其应用。

技术介绍

[0002]相对蛋用型种公鸭而言，肉用型种公鸭的繁殖效率较低，且研究较少。本专利技术的试验对象是一种肉用种公鸭，自然交配的受精率比较低，平均受精率低于50％。受精率主要受种公鸭种用性能、人工授精技术等因素的影响。人工授精技术已经在家禽育种中广泛应用，目前半番鸭的生产多采用人工授精，其受精率一般为60％～80％。由于种公鸭体内缺乏副性腺，精浆中的营养物质以及精子的内源性能源储存低，这就导致精子在体外存活的时间很短，精液品质在很短时间内就大幅度下降。在实际应用中，直接利用原精液进行人工授精需要在采集新鲜的精液后30分钟以内完成授精，这就限制了优质种公禽的利用效率。精液稀释是提高种公禽利用率和种蛋受精率的一种直接有效手段，稀释液是精子的保护剂，可稀释精液使其均匀分布，提高授精能力，因动物物种不同其效果也有差异，现对肉用种鸭适宜的精液稀释液却很少见到。肉用种番鸭精液量少，精子密度高，在人工输精过程中，随着暴露时间的延长，精子容易发生凝集，不利于精液的保存。加入本专利技术的精液稀释液后，可以对其有很好的保护作用，抑制细菌生长，在保证精子密度的同时可以增加输精母番鸭数量，高效利用优秀种公番鸭。稀释液中含有精子体外存活所需的额外能量，可延长精子受精能力的持续时间，实现精液的短期甚至长期保存和运输。目前番鸭人工授精仍大规模使用生理盐水作为稀释液，通过一系列试验反复检测验证，发现本专利技术的稀释液代替生理盐水在2h、4h、8h、12h和24h等各时间阶段均可显著提高精子活力，显著减少精子的畸形率。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种肉用种公鸭的精液稀释液，用于稀释鸭的精液，旨在延长精子在体外的存活时间，使肉用种公鸭体外人工授精的工作能够开展，本专利技术优化的稀释液可代替生理盐水作为肉用种公鸭精液稀释。
[0004]本专利技术的技术方案如下所述：
[0005]一种番鸭精液稀释液，由下述质量份的组分混合而成：谷氨酸钠2.8g～2.9g/100ml、肌醇0.2g～0.3g/100ml、葡萄糖0.4g～0.6g/100ml、磷酸氢二钾三水合物0.4g～0.6g/100ml、磷酸二氢钾0.2g～0.4g/100ml、青霉素10万IU/100ml、链霉素10万IU/100ml，溶于无菌水至100ml，调溶液pH至7.0
‑
7.5。
[0006]作为优选方案；申请人提供了一种番鸭精液稀释液，由下述质量份的组分混合而成：谷氨酸钠2.85g、肌醇0.25g、葡萄糖0.5g、磷酸氢二钾三水合物(K2HPO
4 x 3H2O)0.5g、磷酸二氢钾0.3g、青霉素10万IU、链霉素10万IU，溶于无菌水至100ml，调溶液的pH至7.0
‑
7.5。
[0007]本专利技术的番鸭精液稀释液可在番鸭辅助生殖中应用。
[0008]本专利技术稀释液的制备方法为，按配方量，将上述物质溶于适量无菌水中，调pH值为7.0
‑
7.5,通过过滤灭菌和高压蒸汽灭菌，得到番鸭精液稀释液成品，将该成品贮存于4℃冰
箱内保存。
[0009]本专利技术精液稀释液配方的理论依据：精液中含有谷氨酸钠，张兆旺等人的研究表明母禽的输卵管会分泌谷氨酸盐，可以延长精子在体外的存活时间；肌醇可以防止低温对精子造成损伤；葡萄糖既可以充当稀释剂调节渗透压，还可以为精子提供能源；磷酸氢二钾三水合物和磷酸二氢钾等缓冲物质可以维持PH值，避免精子受不良因素的损伤；此外作为抗生素的青霉素和链霉素可以有效防止精液中微生物的大量繁殖。
具体实施方式
[0010]实施例1
[0011]本专利技术的精液稀释液的成分如下：
[0012]表1本专利技术的精液稀释液的成分
[0013]谷氨酸钠2.85g/100ml肌醇0.25g/100ml葡萄糖0.5g/100mlK2HPO
4 x 3H2O(磷酸氢二钾三水合物)0.5g/100mlKH2PO4‑
(磷酸二氢钾)0.3g/100ml青霉素10万IU/100ml链霉素10万IU/100ml
[0014]调整pH在7.0—7.5之间。
[0015]实施例2精液稀释后保存精子后精液品质测定
[0016]精液采集后立即检测精液品质并按实施例1方法制备的精液稀释液稀释番鸭的精液，检测稀释后相同条件下不同时间段的精液品质，包括精子活力、精子活率和精子畸形率。检测方法如下：
[0017]1)检测时用微量移液器吸取10微升稀释后的精液滴于载玻片上，盖上盖玻片置于显微镜下观察。观察视野内直线运动的精子数占总精子数的比例，按照1～10的评定等级评定精子活力，观察视野不少于3个。采用台盼蓝染色和血球计数的方法测定精子活率，平均计数五个中方格的活精子占比。采用伊红染色的方法测定精子畸形率，计数染色的精子个数不少于300个。
[0018]2)稀释后的精液置于4℃冰箱中保存，并在2h、4h、8h、12h、24h时检测不同组别的精液品质。
[0019]本专利技术稀释液配制及使用时需注意：
[0020]1.稀释液最好现配现用，如条件可以，4℃保存不要超过1周；
[0021]2.制备过程需保证无菌条件，所有用具需消毒灭菌；
[0022]3.原精液和稀释液混合前需在水浴锅预温加热，避免降温打击；
[0023]4.稀释时稀释液沿管壁缓缓加入，稀释后缓缓摇晃均匀，避免震荡打击。
[0024]试验组为原精液与精液稀释液1:1稀释混合，对照组为原精液与生理盐水1:1稀释混合。
[0025]表1精子活力测定
[0026]时间试验组对照组
0h882h774h758h6212h50
[0027]表2精子活率测定
[0028][0029][0030]表3精子畸形率
[0031]时间试验组对照组0h0.0843
±
0.00330.0843
±
0.00332h0.1360
±
0.00600.2000
±
0.03024h0.1941
±
0.02910.3043
±
0.03678h0.1606
±
0.03030.4079
±
0.061812h0.2130
±
0.04120.4841
±
0.032724h0.1860
±
0.04600.4970
±
0.0423
[0032]表3备注：精子活率和精子畸形率*p<0.05。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种番鸭精液稀释液，其特征在于：由下述质量份的组分混合而成：谷氨酸钠2.8g～2.9g/100ml、肌醇0.2g～0.3g/100ml、葡萄糖0.4g～0.6g/100ml、磷酸氢二钾三水合物0.4g～0.6g/100ml、磷酸二氢钾0.2g～0.4g/100ml、青霉素10万IU/100ml、链霉素10万IU/100ml，溶于无菌水至100ml，调溶液pH至7.0
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【专利技术属性】
技术研发人员：朱桂玉，黄黎明，俸艳萍，张震，杨宇，龚萍，王丽霞，叶胜强，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：