抗整联蛋白抗体及其用途制造技术

公开了抗整联蛋白抗体。还公开了使用所述抗体治疗或预防诸如纤维化疾病、癌症、眼科病症和NAFLD的病症的方法。还公开了选择与αvβ1特异性结合的抗体或与αvβ1和αvβ6结合的抗体或与整联蛋白的RGD亚家族的一个或多个成员结合的抗体的方法。员结合的抗体的方法。员结合的抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗整联蛋白抗体及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年4月8日提交的美国临时申请号62/830,961的权益，所述临时申请的内容以引用的方式整体并入本文。


[0003]本专利技术总体上涉及抗整联蛋白抗体(例如，与整联蛋白的RGD亚家族的一个或多个成员结合的抗体)及其用途。

技术介绍

[0004]整联蛋白是在发育和病理过程中起重要作用的细胞粘附受体。整联蛋白被广泛表达，并且体内的每个有核细胞都具有特定的整联蛋白特征。这些受体由非共价缔合的阿尔法(α)链和贝塔(β)链组成，这些链组合以提供多种具有不同的细胞和粘附特异性的异二聚体蛋白。整联蛋白家族由24个αβ异二聚体成员组成，所述成员介导细胞与细胞外基质(ECM)的附着，也参与专门的细胞
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细胞相互作用。α亚基和β亚基彼此之间没有显示同源性，但是不同的α亚基本身之间具有相似性，并且在不同的整联蛋白β亚基中存在保守区。整联蛋白的一个亚类(24个中的8个)识别天然配体中的RGD序列(精氨酸(R)、甘氨酸(G)和天冬氨酸(D))，并且也被称为RGD结合整联蛋白，其包括αvβ1、αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α5β1、α8β1和αIIBβ3整联蛋白。整联蛋白涉及包括细胞粘附、迁移、侵袭、分化、增殖、凋亡和基因表达的多种细胞过程的调节。因此，需要开发可用于治疗诸如纤维化疾病、眼科疾病和癌症的参与整联蛋白途径的疾病的抗整联蛋白抗体。

技术实现思路

[0005]一方面，本公开的特征在于一种抗体，其与αvβ1整联蛋白特异性结合但不与其他整联蛋白结合。在一些实施方案中，所述抗体不结合其他含αv或β1的整联蛋白异二聚体。在一些实施方案中，所述抗αvβ1抗体不结合其他RGD整联蛋白(例如，αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α5β1、α8β1和αIIBβ3整联蛋白)。在一些实施方案中，所述抗体与包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的参考抗αvβ1整联蛋白抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的VH和VL包含：(i)分别地在SEQ ID NO:11中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:12中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在SEQ ID NO:21中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:22中示出的氨基酸序列；(iii)分别地在SEQ ID NO:27中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:28中示出的氨基酸序列；(iv)分别地在SEQ ID NO:30中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:12中示出的氨基酸序列；(v)分别地在SEQ ID NO:35中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:22中示出的氨基酸序列；(vi)分别地在SEQ ID NO:44中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:45中示出的氨基酸序列；(vii)分别地在SEQ ID NO:49中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:50中示出的氨基酸序列；(viii)分别地在SEQ ID NO:57中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:58中示出的氨基酸序列；(ix)分别地在SEQ ID NO:61中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:58中
示出的氨基酸序列；或(x)分别地在SEQ ID NO:64中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:58中示出的氨基酸序列。
[0006]另一方面，本公开的特征在于一种抗体，其与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者特异性结合但不与其他整联蛋白结合。在一些实施方案中，所述抗体不结合其他含αv、β1或β6的整联蛋白异二聚体。在一些情况下，所述抗体不与除αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白以外的RGD结合整联蛋白(例如αvβ3、αvβ5、αvβ8、α5β1、α8β1和αIIBβ3)结合。在一些实施方案中，所述抗体与结合αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者且包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的参考抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的VH和VL包含：(i)分别地在SEQ ID NO:44中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:68中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在SEQ ID NO:44中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:70中示出的氨基酸序列；(iii)分别地在SEQ ID NO:49中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:72中示出的氨基酸序列；或(iv)分别地在SEQ ID NO:76中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:77中示出的氨基酸序列。
[0007]另一方面，本公开的特征在于一种抗体，其与αvβ1以及一种或多种选自由αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α5β1、α8β1和αIIBβ3组成的组的整联蛋白特异性结合。在一些实施方案中，所述抗体结合αvβ1和αvβ8。在一些实施方案中，所述抗体结合αvβ1和αvβ3。在一些实施方案中，所述抗体结合αvβ1、αvβ3、αvβ5、αvβ6和αvβ8。在一些实施方案中，所述抗体不与除RGD结合整联蛋白中的一种或多种以外的整联蛋白结合。在一些实施方案中，所述抗体与包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的参考抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的VH和VL包含：(i)分别地在SEQ ID NO:82中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:83中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在SEQ ID NO:92中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:93中示出的氨基酸序列；(iii)分别地在SEQ ID NO:92中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:95中示出的氨基酸序列；(iv)分别地在SEQ ID NO:100中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:28中示出的氨基酸序列；(v)分别地在SEQ ID NO:21中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:104中示出的氨基酸序列；或(vi)分别地在SEQ ID NO:49中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:107中示出的氨基酸序列。
[0008]另一方面，本公开的特征在于一种抗体，其与人αvβ1特异性结合且具有以下特性中的一种或多种(例如，1、2、3、4或5种)：(i)与人αvβ1以KD≤20nM的高亲和力(二价亲和力)结合；(ii)阻断αvβ1与其配体(例如，LAP和纤连蛋白)的相互作用；(iii)对于与人αvβ1的结合是阳离子依赖性的(例如，钙和镁；或锰)或阳离子非依赖性的；(iv)与成纤维细胞上的αvβ1结合；和(v)抑制成纤维细胞TGFβ响应(例如，如通过LPA诱导的PAI
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1测定所评估)。在一些实施方案中，所述抗体是内化的。在一些实施方案中，所述抗体与食蟹猴、小鼠和大鼠αvβ1结合。在一些实施方案中，所述抗体包含示例性抗体1
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10的VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3。在一些实施方案中，所述抗体包含示例性抗体1
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10的VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3。在一些实施方案中，所述抗体与包含示例性抗体1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白特异性结合但不与其他整联蛋白结合，并且任选地其中所述抗体具有以下特性中的一种或多种：(i)与人αvβ1以KD≤20nM的高亲和力(二价亲和力)结合；(ii)阻断αvβ1与其配体的相互作用；(iii)对于与人αvβ1的结合是阳离子依赖性的；(iv)对于与人αvβ1的结合是阳离子非依赖性的；(v)与成纤维细胞上的αvβ1结合；和(vi)抑制成纤维细胞TGFβ响应。2.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体与包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的参考抗αvβ1整联蛋白抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的VH和VL包含：(i)分别地在SEQ ID NO:35中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:22中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在SEQ ID NO:61中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:58中示出的氨基酸序列；(iii)分别地在SEQ ID NO:11中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:12中示出的氨基酸序列；(iv)分别地在SEQ ID NO:21中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:22中示出的氨基酸序列；(v)分别地在SEQ ID NO:27中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:28中示出的氨基酸序列；(vi)分别地在SEQ ID NO:30中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:12中示出的氨基酸序列；(vii)分别地在SEQ ID NO:44中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:45中示出的氨基酸序列；(viii)分别地在SEQ ID NO:49中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:50中示出的氨基酸序列；(ix)分别地在SEQ ID NO:57中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:58中示出的氨基酸序列；或(x)分别地在SEQ ID NO:64中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:58中示出的氨基酸序列。3.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者特异性结合但不与其他整联蛋白结合，并且任选地其中所述抗体具有以下特性中的一种或多种：(i)与人αvβ1以KD≤20nM的高亲和力(二价亲和力)结合且与人αvβ6以100nM的亲和力(二价亲和力)结合；(ii)阻断αvβ1和/或αvβ6与其配体的相互作用；(iii)对于与人αvβ1和/或αvβ6的结合是阳离子依赖性的；(iv)与成纤维细胞上的αvβ1结合；和(v)抑制成纤维细胞TGFβ响应。4.如权利要求3所述的抗体，其中所述抗体与结合αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者且包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的参考抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的VH和VL包含：(i)分别地在SEQ ID NO:44中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:68中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在SEQ ID NO:44中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:70中示出的氨基酸序列；
(iii)分别地在SEQ ID NO:49中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:72中示出的氨基酸序列；或(iv)分别地在SEQ ID NO:76中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:77中示出的氨基酸序列。5.一种抗体，其与αvβ1以及一种或多种选自由αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α5β1、α8β1和αIIBβ3组成的组的整联蛋白特异性结合，并且任选地其中所述抗体具有以下特性中的一种或多种：(i)其与人αvβ1以KD≤20nM的高亲和力(二价亲和力)结合且与其他RGD结合整联蛋白以100nM的亲和力(二价亲和力)结合；(ii)阻断αvβ1和/或RGD家族整联蛋白与其配体的相互作用；(iii)对于与人αvβ1和/或RGD结合整联蛋白的结合是阳离子依赖性的；(iv)对于与人αvβ1和/或RGD结合整联蛋白的结合是阳离子非依赖性的；(v)与成纤维细胞上的αvβ1和/或RGD结合整联蛋白结合；和(v)抑制成纤维细胞TGFβ响应。6.如权利要求5所述的抗体，其中所述抗体与包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的参考抗体竞争和/或结合相同的表位，其中所述参考抗体的VH和VL包含：(i)分别地在SEQ ID NO:82中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:83中示出的氨基酸序列；(ii)分别地在SEQ ID NO:92中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:93中示出的氨基酸序列；(iii)分别地在SEQ ID NO:92中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:95中示出的氨基酸序列；(iv)分别地在SEQ ID NO:100中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:28中示出的氨基酸序列；(v)分别地在SEQ ID NO:21中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:104中示出的氨基酸序列；或(vi)分别地在SEQ ID NO:49中示出的氨基酸序列和在SEQ ID NO:107中示出的氨基酸序列。7.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白结合但不与其他整联蛋白结合，所述抗体含有包含VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的VH以及包含VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的VL，其中VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含：(i)分别地SEQ ID NO:32、34、17、18、19和20；(ii)分别地SEQ ID NO:60、39、55、18、19和56；(iii)分别地SEQ ID NO:4、6、7、8、9和10；(iv)分别地SEQ ID NO:14、16、17、18、19和20；(v)分别地SEQ ID NO:4、6、23、24、25和26；(vi)分别地SEQ ID NO:29、6、7、8、9和10；(vii)分别地SEQ ID NO:37、39、40、41、42和43；(viii)分别地SEQ ID NO:37、39、46、18、47和48；(ix)分别地SEQ ID NO:52、54、55、18、19和56；或(x)分别地SEQ ID NO:63、54、55、18、19和56。8.如权利要求7所述的抗体，其中：
(i)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:35和22中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(ii)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:61和58中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iii)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:11和12中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iv)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:21和22中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(v)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:27和28中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(vi)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:30和12中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(vii)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:44和45中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(viii)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:49和50中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(ix)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:57和58中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；或(x)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:64和58中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列。9.一种抗体，其与αvβ1整联蛋白和αvβ6整联蛋白两者结合但不与其他整联蛋白结合，其中所述抗体含有包含VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的VH以及包含VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的VL，其中VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3包含：(i)分别地SEQ ID NO:37、39、40、65、66和67；(ii)分别地SEQ ID NO:37、39、40、65、66和69；(iii)分别地SEQ ID NO:37、39、46、18、47和71；或(iv)分别地SEQ ID NO:37、39、73、74、42和75。10.如权利要求9所述的抗体，其中：(i)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:44和68中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(ii)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:44和70中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序列；(iii)所述VH和所述VL分别地包含与在SEQ ID NO:49和72中示出的氨基酸序列至少75％、80％、85％、90％、95％或100％相同的氨基酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：C格拉夫，C帕尔默，B布莱克利，T马伦，A加德特，
申请(专利权)人：比奥根MA公司，
类型：发明
国别省市：