一种莫海威芽孢杆菌的制备方法及其用途技术

本发明专利技术公开了一种莫海威芽孢杆菌的制备方法及其用途，解决了现有技术中的培养方法在降低菌种生产成本的同时无法使活菌数显著提高的缺陷。本发明专利技术包括：将莫海威芽孢杆菌的菌种接种在无机盐培养基上进行活化获得活菌量为9.0

【技术实现步骤摘要】
一种莫海威芽孢杆菌的制备方法及其用途


[0001]本专利技术涉及菌株制备领域，具体涉及一种莫海威芽孢杆菌的制备方法。

技术介绍

[0002]随着经济技术的飞速发展和城市化进程的不断加速，城市垃圾中的厨余垃圾源源不断的上升，在厨余垃圾的处理中存在处理不充分，处理时间长且极易产生恶臭气体等问题。近几年国内外兴起厨余垃圾处理方式-厨余垃圾液化降解机，其原理是利用微生物菌剂，通过间歇性搅拌物料，使厨余垃圾在发酵降解的过程中不断降解液化，最后产出极少量残渣的降解液。因此，制备能够有效、快速降解厨余垃圾，并降低垃圾臭味的复合菌制剂迫在眉睫。
[0003]中国文献CN105816897A中公开了一种含有微生物菌株的有机垃圾除臭剂及其制备方法，具体公开了该有机垃圾除臭剂中包括有莫海威芽孢杆菌和短小芽孢杆菌作为活性成分的发酵液，并具体公开了其发酵培养的培养基为：硝酸铵0.50～1.00％、氯化钠0.20～0.40％、磷酸氢二钾0.15～0.25％、硫酸镁0.015～0.025％、七水合硫酸亚铁0.015～0.025％、酵母浸膏0.05～0.15％、蔗糖1.50％～2.50％、蒸馏水95.7～97.0％，所述发酵母液的pH值调节为7.0～7.5。该发酵液制备时，所述的培养基只能适用于实验室少量制备，直接应用到大规模的生产时，其活菌数始终达不到109cuf/ml以上，导致生产效率低，生产成本高。

技术实现思路

[0004]因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中的培养方法无法在降低菌种生产成本的同时使活菌数显著提高的缺陷，从而提供一种成本更低、在相同培养时间内活菌数更高，且活菌数甚至能够达到109cuf/ml以上的莫海威芽孢杆菌的制备方法。
[0005]一种莫海威芽孢杆菌的制备方法，包括：
[0006]活化步骤：将莫海威芽孢杆菌的菌种接种在无机盐培养基上进行活化获得活菌量为9.0
×
108cfu/ml以上的活化菌液；
[0007]种子培养：将活化菌液按照接种量2％-6％接入液体培养基中，摇床培养15-24h后获得种子菌液；
[0008]发酵培养：将种子菌液按照接种量2％-6％接入10L以上液体培养基中进行培养，培养过程中持续通气；
[0009]所述液体培养基的制备方法为：
[0010]将酵母膏4-6重量份、KH2PO
4 1-3重量份、蔗糖糖蜜12-18重量份、MgSO4·
7H2O 1-3重量份、氯化铵7-8重量份、硝酸钠2-4重量份，用水配置成总共1000重量份，调pH至6.5-7.2，灭菌后制成液体培养基。
[0011]所述发酵培养中，液体培养基盛装在发酵罐内，发酵罐内的培养条件为：发酵罐转速50-100r/min、初始pH为6.0-7.0、温度为35℃-40℃，种子菌液在发酵罐内培养15-24h后，
降温至25℃以下即可。
[0012]培养温度为35℃-40℃。
[0013]所述无机盐培养基的制备方法为：
[0014]将酵母膏4-6重量份、KH2PO
4 1-3重量份、蔗糖8-12重量份、MgSO4·
7H2O 1-3重量份、氯化铵7-8重量份、硝酸钠2-4重量份，用水配置成总共1000重量份，调pH至6.5-7.2，灭菌后即可。
[0015]所述无机盐培养基的制备方法为：
[0016]将酵母膏5g、KH2PO
4 2g、蔗糖10g、MgSO4·
7H2O 2g、氯化铵7.5g、硝酸钠3g，用水定容至1L，调pH至6.5-7.2，灭菌后即可。
[0017]所述液体培养基中的酵母膏为工业级酵母膏；
[0018]所述液体培养基的灭菌温度为113-118℃；
[0019]所述液体培养基的制备方法为：将酵母膏5g、KH2PO
4 2g、蔗糖糖蜜15g、MgSO4·
7H2O 2g、氯化铵7.5g、硝酸钠3g，用水定容至1L，调pH至6.5-7.2，灭菌后即可。
[0020]上述制备方法制备得到的莫海威芽孢杆菌在制备厨余垃圾降解剂中的用途。
[0021]所述厨余垃圾降解剂中还复配有嗜酸乳酸杆菌、酵母菌、植物乳杆菌和短小芽孢杆菌。
[0022]所述莫海威芽孢杆菌:嗜酸乳酸杆菌:酵母菌:植物乳杆菌:短小芽孢杆菌的活菌数量比值为(3～5):(1～2):(2～3):(1～2):(3～5)。
[0023]所述厨余垃圾降解剂的活菌在厨余垃圾中的添加量为1
×
105～1
×
107cfu/kg。
[0024]本专利技术技术方案，具有如下优点：
[0025]1.本专利技术提供的莫海威芽孢杆菌的制备方法，其主要对接种量和液体培养基的配方进行了调节，具体为：省略了七水合硫酸亚铁，并将蔗糖替换成了蔗糖糖蜜，并优化了各物质的组成浓度。其中，本专利技术通过培养基的优化，有效减少了七水合硫酸亚铁的用量，同时采用蔗糖糖蜜替代成本更高的蔗糖，有效降低了生产成本；
[0026]并且，本专利技术通过培养基配方的调节，有效促使培养的莫海威芽孢杆菌的活菌数有效提高，同时结合接种量2％-6％的设置，有效促使培养的莫海威芽孢杆菌的活菌数可以达到109cfu/ml以上，效果十分显著。
[0027]2.本专利技术进一步优化了液体培养基的灭菌温度，通过降低灭菌温度，可以减少温度对液体培养基中物质的影响，进一步提高活菌数量，效果更加显著。
[0028]3.本专利技术提供了该莫海威芽孢杆菌的用途，其与嗜酸乳酸杆菌、酵母菌、植物乳杆菌和短小芽孢杆菌按照(3～5):(1～2):(2～3):(1～2)：(3～5)的比值进行复配后，能达到更好的降解厨余垃圾的目的，并有效降低垃圾臭味。
具体实施方式
[0029]实施例1
[0030]一种莫海威芽孢杆菌的制备方法，包括：
[0031]活化步骤：将莫海威芽孢杆菌的菌种接种在无机盐培养基上进行活化获得活菌量为9.0
×
108cfu/ml以上的活化菌液；所述无机盐培养基的制备方法为：将酵母膏5g、KH2PO
4 2g、蔗糖10g、MgSO4·
7H2O 2g、氯化铵7.5g、硝酸钠3g，用水定容至1L，调pH至7.0，121℃灭菌
15min即可。
[0032]种子培养：将活化菌液按照接种量3％接入液体培养基中，37℃条件下摇床培养20h后获得种子菌液，摇床转速为180r/min；所述液体培养基的制备方法为：将酵母膏5g、KH2PO
4 2g、蔗糖糖蜜15g、MgSO4·
7H2O 2g、氯化铵7.5g、硝酸钠3g，用水定容至1L，调pH至7.0，115℃灭菌15min即可。
[0033]发酵培养：将种子菌液按照接种量3％接入装有10L液体培养基的发酵罐中进行培养，发酵罐转速80r/min、初始pH为7.0、温度为37℃，种子菌液在发酵罐内培养18h后，降温至25℃以下即可，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种莫海威芽孢杆菌的制备方法，其特征在于，包括：活化步骤：将莫海威芽孢杆菌的菌种接种在无机盐培养基上进行活化获得活菌量为9.0
×
108cfu/ml以上的活化菌液；种子培养：将活化菌液按照接种量2％-6％接入液体培养基中，摇床培养15-24h后获得种子菌液；发酵培养：将种子菌液按照接种量2％-6％接入10L以上液体培养基中进行培养，培养过程中持续通气；所述液体培养基的制备方法为：将酵母膏4-6重量份、KH2PO
4 1-3重量份、蔗糖糖蜜12-18重量份、MgSO4·
7H2O 1-3重量份、氯化铵7-8重量份、硝酸钠2-4重量份，用水配置成总共1000重量份，调pH至6.5-7.2，灭菌后制成液体培养基。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养中，液体培养基盛装在发酵罐内，发酵罐内的培养条件为：发酵罐转速50-100r/min、初始pH为6.0-7.0、温度为35℃-40℃，种子菌液在发酵罐内培养15-24h后，降温至25℃以下即可。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述种子培养的过程中，培养温度为35℃-40℃。4.根据权利要求1-3任一所述的制备方法，其特征在于，所述无机盐培养基的制备方法为：将酵母膏4-6重量份、KH2PO
4 1-3重量份、蔗糖8-12重量份、MgSO4·
7H2O 1-3重量份、氯化铵7-8重量...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁境，刘金华，
申请(专利权)人：中创宏远北京环保科技有限公司，
类型：发明
国别省市：